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信息的鑒別與評價范文1
當我們不得不承認信息技術學科進入了“周課時為1”這一時代的時候,我們能做的就是改變自己。那么,如何適應當前變化,讓信息技術課煥發活力呢?答案是:實施課堂教學內容改革,注重學生自主合作學習能力的提升。
一、實施教學內容改革的必要性
當前,我省許多普通高中的信息技術課的課時被壓縮為一周一課時,而所配套的教卻都是按一周兩課時來設計的,面對這一矛盾,教師的普遍做法有兩種:一是用兩個學時的課時去完成一個模塊的教學內容;二是每學期上一模塊,所教內容是挑選性或壓縮式的。方法一能夠很好利用教材進行授課,但與學校壓縮非高考科目課時的實際需求不符。方法二則使得授課很隨意,學生無法全面掌握模塊中要求掌握的知識,不符合新課程的要求。因此,在課時被壓縮的背景下采用原來教材授課基本上行不通,改革教學內容的必要性就突顯出來了。
二、實施教學內容改革的可行性
《普通高中信息技術課程標準》強調課程的總目標是:提升學生的信息素養。而當下社會提升學生信息素養的途徑已經十分豐富,特別是經濟發達的地區,家家戶戶都有計算機、智能手機等,學生的信息素養已經有了很好的基礎,適當地減少一些課堂課
時,增加一些課外課時,對課程的總目標影響不大。因此,改革教材內容對實現課程的總目標是可行的。
三、實施教學內容改革的方法
我校信息科技組這幾年積極開展在線教學平臺下“導學案”教學實踐研究,在促進學生學會學習方面取得了很好的效果。下面以《信息技術基礎》必修模塊為例,談一談如何開展信息技術教學內容改革。
1.圍繞課程目標,按每周1課時的要求規劃學期教學主題
《信息技術基礎》模塊是高中學生信息素養提升的基礎。通過本模塊的學習,學生應該掌握信息的獲取、交流、加工、管理與呈現的基本方法;理解信息技術對社會發展的影響,形成與信息化社會相適應的價值觀。圍繞該課程要求,結合學校的實際和學生的特點,我們制定了18課時的學期課堂教學內容主題和18課時的假期綜合活動任務:
該主題設計體現了《信息技術基礎》模塊的課程要求,以信息的獲取、處理與交流為主線,重點強調了學生在輔助學習與解決自己生活實際方面的信息素養,而簡略了信息的加工,最后通過假期活動全面提升學生的信息素養。
2.以提升學生信息素養為宗旨,編制自主學習型教學導學案
編制的導學案要注重以學習任務為主線,以提升學生素養為宗旨,精選導學任務,各個任務具有層次化、遞進性的特點,注重培養學生的自主、合作、探究的學習能力,設計的學習任務要盡可能地挖掘德育素材,盡量豐富信息技術課堂的人文內涵,為學生的健康成長服務。
【任務一】搜索信息
有一位偉人說了一句話:“打開窗戶,新鮮空氣進來了,蒼蠅蚊子也進來了。”
提問:偉人是誰?這句話的哲理是什么?
【任務二】網絡信息鑒別(要求從信息的來源、價值取向、時效性、真偽等方面進行鑒別,提高網絡信息的鑒別能力)。
【任務三】手機信息鑒別(提高手機信息的鑒別能力)
【任務四】信息評價
若你通過某權威媒體獲得了這樣一條信息:“某車主張先生為聲援保釣活動,抵制日貨,自己砸了自己的日系車。”請針對這一信息展開評論。
上述學習任務體現了一個循序漸進的過程,任務一是復習前面的獲取信息,同時通過哲理分析引入信息鑒別與評價的重要性,任務二是鑒別與評價的實例展示,任務三則是在任務二的基礎上要求又有所提高,任務四是關鍵任務。學生在完成該任務時,由于有了任務二和任務三的鋪墊,有可能會從信息的價值取向或時效性等方面進行評論,至少都能提到理國等內容,實現了一次很好的德育過程。到最后,教師點撥時列舉了車主張先生的三種身份(激進愛國者,非日系車企的托,敵對政治分子),學生的評論一下子就豁然開朗,同時對理國的教育達到了一個十分
完美的效果。
信息的鑒別與評價范文2
隨著寬帶網絡和用戶規模的不斷增長,用戶對寬帶接入業務的高可用性要求不斷增強,對電信運營商在IP城域、接入網絡和支撐系統提出了更高的安全性要求。本文從信息安全管理的理念、方法學和相關技術入手,結合電信IP城域網,提出電信IP城域網安全管理、風險評估和加固的實踐方法建議。
關鍵字(Keywords):
安全管理、風險、弱點、評估、城域網、IP、AAA、DNS
1信息安全管理概述
普遍意義上,對信息安全的定義是“保護信息系統和信息,防止其因為偶然或惡意侵犯而導致信息的破壞、更改和泄漏,保證信息系統能夠連續、可靠、正常的運行”。所以說信息安全應該理解為一個動態的管理過程,通過一系列的安全管理活動來保證信息和信息系統的安全需求得到持續滿足。這些安全需求包括“保密性”、“完整性”、“可用性”、“防抵賴性”、“可追溯性”和“真實性”等。
信息安全管理的本質,可以看作是動態地對信息安全風險的管理,即要實現對信息和信息系統的風險進行有效管理和控制。標準ISO15408-1(信息安全風險管理和評估規則),給出了一個非常經典的信息安全風險管理模型,如下圖一所示:
圖一信息安全風險管理模型
既然信息安全是一個管理過程,則對PDCA模型有適用性,結合信息安全管理相關標準BS7799(ISO17799),信息安全管理過程就是PLAN-DO-CHECK-ACT(計劃-實施與部署-監控與評估-維護和改進)的循環過程。
圖二信息安全體系的“PDCA”管理模型
2建立信息安全管理體系的主要步驟
如圖二所示,在PLAN階段,就需要遵照BS7799等相關標準、結合企業信息系統實際情況,建設適合于自身的ISMS信息安全管理體系,ISMS的構建包含以下主要步驟:
(1)確定ISMS的范疇和安全邊界
(2)在范疇內定義信息安全策略、方針和指南
(3)對范疇內的相關信息和信息系統進行風險評估
a)Planning(規劃)
b)InformationGathering(信息搜集)
c)RiskAnalysis(風險分析)
uAssetsIdentification&valuation(資產鑒別與資產評估)
uThreatAnalysis(威脅分析)
uVulnerabilityAnalysis(弱點分析)
u資產/威脅/弱點的映射表
uImpact&LikelihoodAssessment(影響和可能性評估)
uRiskResultAnalysis(風險結果分析)
d)Identifying&SelectingSafeguards(鑒別和選擇防護措施)
e)Monitoring&Implementation(監控和實施)
f)Effectestimation(效果檢查與評估)
(4)實施和運營初步的ISMS體系
(5)對ISMS運營的過程和效果進行監控
(6)在運營中對ISMS進行不斷優化
3IP寬帶網絡安全風險管理主要實踐步驟
目前,寬帶IP網絡所接入的客戶對網絡可用性和自身信息系統的安全性需求越來越高,且IP寬帶網絡及客戶所處的信息安全環境和所面臨的主要安全威脅又在不斷變化。IP寬帶網絡的運營者意識到有必要對IP寬帶網絡進行系統的安全管理,以使得能夠動態的了解、管理和控制各種可能存在的安全風險。
由于網絡運營者目前對于信息安全管理還缺乏相應的管理經驗和人才隊伍,所以一般采用信息安全咨詢外包的方式來建立IP寬帶網絡的信息安全管理體系。此類咨詢項目一般按照以下幾個階段,進行項目實踐:
3.1項目準備階段。
a)主要搜集和分析與項目相關的背景信息;
b)和客戶溝通并明確項目范圍、目標與藍圖;
c)建議并明確項目成員組成和分工;
d)對項目約束條件和風險進行聲明;
e)對客戶領導和項目成員進行意識、知識或工具培訓;
f)匯報項目進度計劃并獲得客戶領導批準等。
3.2項目執行階段。
a)在項目范圍內進行安全域劃分;
b)分安全域進行資料搜集和訪談,包括用戶規模、用戶分布、網絡結構、路由協議與策略、認證協議與策略、DNS服務策略、相關主機和數據庫配置信息、機房和環境安全條件、已有的安全防護措施、曾經發生過的安全事件信息等;
c)在各個安全域進行資產鑒別、價值分析、威脅分析、弱點分析、可能性分析和影響分析,形成資產表、威脅評估表、風險評估表和風險關系映射表;
d)對存在的主要風險進行風險等級綜合評價,并按照重要次序,給出相應的防護措施選擇和風險處置建議。
3.3項目總結階段
a)項目中產生的策略、指南等文檔進行審核和批準;
b)對項目資產鑒別報告、風險分析報告進行審核和批準;
c)對需要進行的相關風險處置建議進行項目安排;
4IP寬帶網絡安全風險管理實踐要點分析
運營商IP寬帶網絡和常見的針對以主機為核心的IT系統的安全風險管理不同,其覆蓋的范圍和影響因素有很大差異性。所以不能直接套用通用的風險管理的方法和資料。在項目執行的不同階段,需要特別注意以下要點:
4.1安全目標
充分保證自身IP寬帶網絡及相關管理支撐系統的安全性、保證客戶的業務可用性和質量。
4.2項目范疇
應該包含寬帶IP骨干網、IP城域網、IP接入網及接入網關設備、管理支撐系統:如網管系統、AAA平臺、DNS等。
4.3項目成員
應該得到運營商高層領導的明確支持,項目組長應該具備管理大型安全咨詢項目經驗的人承擔,且項目成員除了包含一些專業安全評估人員之外,還應該包含與寬帶IP相關的“業務與網絡規劃”、“設備與系統維護”、“業務管理”和“相關系統集成商和軟件開發商”人員。
4.4背景信息搜集:
背景信息搜集之前,應該對信息搜集對象進行分組,即分為IP骨干網小組、IP接入網小組、管理支撐系統小組等。分組搜集的信息應包含:
a)IP寬帶網絡總體架構
b)城域網結構和配置
c)接入網結構和配置
d)AAA平臺系統結構和配置
e)DNS系統結構和配置
f)相關主機和設備的軟硬件信息
g)相關業務操作規范、流程和接口
h)相關業務數據的生成、存儲和安全需求信息
i)已有的安全事故記錄
j)已有的安全產品和已經部署的安全控制措施
k)相關機房的物理環境信息
l)已有的安全管理策略、規定和指南
m)其它相關
4.5資產鑒別
資產鑒別應該自頂向下進行鑒別,必須具備層次性。最頂層可以將資產鑒別為城域網、接入網、AAA平臺、DNS平臺、網管系統等一級資產組;然后可以在一級資產組內,按照功能或地域進行劃分二級資產組,如AAA平臺一級資產組可以劃分為RADIUS組、DB組、計費組、網絡通信設備組等二級資產組;進一步可以針對各個二級資產組的每個設備進行更為細致的資產鑒別,鑒別其設備類型、地址配置、軟硬件配置等信息。
4.6威脅分析
威脅分析應該具有針對性,即按照不同的資產組進行針對性威脅分析。如針對IP城域網,其主要風險可能是:蠕蟲、P2P、路由攻擊、路由設備入侵等;而對于DNS或AAA平臺,其主要風險可能包括:主機病毒、后門程序、應用服務的DOS攻擊、主機入侵、數據庫攻擊、DNS釣魚等。
4.7威脅影響分析
是指對不同威脅其可能造成的危害進行評定,作為下一步是否采取或采取何種處置措施的參考依據。在威脅影響分析中應該充分參考運營商意見,尤其要充分考慮威脅發生后可能造成的社會影響和信譽影響。
4.8威脅可能性分析
是指某種威脅可能發生的概率,其發生概率評定非常困難,所以一般情況下都應該采用定性的分析方法,制定出一套評價規則,主要由運營商管理人員按照規則進行評價。
信息的鑒別與評價范文3
關鍵詞:中藥,鑒定技術,進展
我國地大物博,蘊藏著極為豐富的中藥資源,據統計有12000種之多。但藥材種類繁多,來源復雜,既有同名異物、同物異名、一藥多名等普遍現象;又有來源不同、地區習慣用藥有別的客觀事實。不但貴重稀有藥材的偽劣品屢屢被發現,一些常用普通中藥也會有混淆品出現,并且同一藥材又有數種不同的等級規格;即使用同一藥材其活性成分含量也有波動。。因此以現代分析技術對中藥及其制品進行真偽鑒定、質量控制,對于中藥的經營、生產、質量監督和控制及臨床用藥都有重要的意義和實用價值。本文從各鑒定技術的原理、特性及其應用展開綜述。
1.顯微鑒定
顯微鑒定適用于含中藥粉末的制劑,是鑒別藥材真偽的最有效的手段之一,具有簡便、快速、準確的優點。
由于中藥的內部組織構造、細胞形態、內含物特征等,在不同的種群中是不同的,而在相同種群中則是一定的、固有的、比較穩定的,它不受外界因素的影響,因此常作為植物分類的依據。木質部的構造,導管的有無是區別被子植物及裸子植物的分界線,藥物粉末中的細胞形態、大小,所含內含物的種類、特征等可以用來區別不同的品種,所以該項技術可用來鑒定所用藥物的真偽。
另外,中成藥組成藥物多,中藥間的粉末顯微特征互相干擾,其鑒別遠比單味生藥粉末困難得多。通常根據處方,對各組成生藥的粉末顯微特征進行分析、比較,排除某些類似的細胞、組織及內含物等的干擾,選取各生藥在該成藥中較具專屬性的纖維特征,作為顯微鑒別依據。因此,單一粉末生藥的主要特征在制劑中有時不一定作為鑒別依據,而有些次要的特征反而起鑒別作用。王世清、鄭蕓[1]對婦科再造丸的研究表明,當歸、三七等的分泌細胞作為的顯微鑒定的特征而其鑒別作用。
2.色譜鑒定
2.1.薄層色譜法
薄層色譜法是將固定相載體均勻涂布在具有光潔表面的玻璃板或其他支持物上,用毛細管或適當點樣器將樣品液滴加薄層的起始線上待溶劑揮散后,置于展開槽內,用一定的溶劑展開,取出干燥,檢出或定量。在此過程中,不同的物質可以得到分離,但分離原理隨所用的固定相不同而異[2]。
TLC是一種快速、靈敏、高效地分離微量物質的方法,是最簡單的色譜技術之一,它具有操作方便、設備簡單、分離效率高、專屬性好、分離速度快、色譜參數易調整等特點,因而在中藥鑒定中的應用廣泛[3]。黃玉清[4]采用TLC鑒別牡丹皮及其偽品芍藥根皮,結果顯示,牡丹皮供試液與丹皮酚對照液位置上顯相同的紫色斑點,芍藥根皮供試液與芍藥苷對照液相應的位置上顯相同的藍色斑點。趙志軍[5]建立了益康膠囊的TLC鑒別方法,對方中組成藥物人參、黃芪、何首烏、丹參及甲基橙皮苷進行鑒別。結果斑點清晰,分離效果好,專屬性強,陽性對照無干擾。
2.2.氣相色譜法
氣相色譜是一種以氣體為流動相,液體或固體作為固定相的分離分析技術。具有高效、快速、靈敏、微量的特點,唯一局限之處在于所分析樣品應具有揮發性。氣相色譜技術已廣泛應用于中藥材揮發油分析[6-8]。
由于中藥揮發油成分復雜、種類繁多,氣相色譜技術作為揮發油分離分析的有力手段,可以用來建立中藥材揮發油及其成方制劑的指紋圖譜庫,為藥材鑒別、質量評價及成方制劑和生產過程中半成品的質量控制提供檢測方法。。王玉萍[9]以紫蘇葉中紫蘇醛為指標成分,采用內標法測定了不同產地、不同采收時間、不同放置時間紫蘇葉中紫蘇醛的含量,對紫蘇葉的質量進行了評價。
2.3.高效液相色譜法
高效液相色譜法是在經典的液相色譜法的基礎上,于20世紀60年代后期引入了氣相色譜法的理論,迅速發展起來的一種色譜分離技術。由于高效液相色譜法具有用量少、分離效能高、專屬性強、檢測靈敏度高、分析速度快、適用范圍廣(樣品不需氣化,只需制成溶液即可)、色譜柱可反復使用的特點,因而在重要鑒別與鑒定方面的應用廣泛。朱華等[10]采用高效液相色譜法對各種不同蛤蚧進行了鑒別,以防止以偽亂真現象。沙明[11]等利用高效液相色譜法的相對保留時間來鑒別地榆的真偽,還用峰面積比值來衡量該藥材的品質優劣,為地榆提供一種客觀、直觀的質量評價方法。張思巨等[12]利用高效液相色譜法確認了三種膠之間的內在差異,簡便、可靠地鑒別了阿膠、鹿角膠和龜甲膠,保證成品中所用阿膠的正源性。
3.紅外光譜鑒定
在藥物分析中,以紅外光譜具有的“指紋”特性作為藥物鑒定的依據,是各國藥典共同采用的方法。但通常僅限于西藥等單組分、單純化合物的鑒定。由于中藥材、中藥飲片和成藥本身都是遠比西藥復雜得多的混合物體系,它們的紅外光譜是組成它們的所有化合物的紅外光譜的疊加。因此對譜圖如何進行整體解析以及如何設法消除中藥主體成分的干擾等復雜而棘手的問題使得常規的紅外光譜法在相當長時期內令人望而卻步,從而未能在中藥質量控制和管理中發揮其應有的作用。
然而,將紅外光譜與計算機輔助解析技術(二維相關中外光譜法、模式識別和人工神經網絡等)有機地結合應用于中藥鑒定的若干報道,一系列的成果令人信服地向世人展示。這種將中藥學、數學、分析化學相結合,實現優勢互補的現代紅外光譜技術,無疑會在中藥的質量控制中扮演一個重要的角色[13]。劉小平[14]利用紅外光譜的測定數據進行分析,將相同波數的數值歸在一起,明顯得到六味地黃丸及其缺不同藥材后的紅外光譜的數據存在一定的差異。
4.DNA分子鑒定
DNA分子作為遺傳信息的直接載體,信息含量大,在同種或同品種內具有高度的遺傳穩定性,且不受外界環境因素和生物體發育階段及器官組織差異的影響,因此用DNA分子特征作為遺傳標記進行中藥鑒別更為準確可靠[15][16]。Shaw[17][18]等用AP-PCR對人參屬3種藥材人參、西洋參與三七及4種偽品桔梗、紫茉莉、土人參和商陸進行了鑒別研究,得到了能區別三種人參屬藥材與偽品的指紋圖譜。
5.聯用技術
5.1.氣相-質譜聯用技術
氣相-質譜聯用技術是將在標準電離條件下得到的大量已知純化合物的標準質譜圖存儲在計算機的磁盤里,作為已知化合物的標準質譜譜庫。然后將在標準電離條件下得到的、已被分離成純化合物的未知化合物質譜圖與計算機內存儲的質譜譜庫內的質譜圖按一定的程序進行比較,根據匹配度程度檢出這些化合物的名稱、相對分子質量、分子式、結構式和相似度,從而對未知化合物進行定性分析。
氣相-質譜聯用技術適宜分析小分子、易揮發、熱穩定、能氣化的化合物;用電子轟擊方式(EI)得到的譜圖,可與標準譜庫對比。馬松濤[19]等人利用氣相-質譜聯用方法分析了香紫蘇油的化學成分,為香紫蘇油的應用提供了依據。。
5.2.液相-質譜聯用技術
液相-質譜聯用技術自Horning于20世紀70年代進行開創性研究以來,經過20多年的發展已趨向成熟,各種商品化儀器相繼問世,而且應用日益廣泛,它集液相色譜的高分離效能與質譜的強鑒定能力于一體,對研究對象不僅具有足夠的靈敏度、選擇性,同時還能夠給出一定的結構信息,分析快速而且方便,具有其他分析方法所不能比擬的優點[20]。黎先春[21]等人采用HPLC-ESI-MS分析方法能很好的分離和鑒別穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯。
除以上常用方法外,還有差熱分析法[22]、X-射線衍射法[23]、生物芯片法[24]、電鏡掃描法[25]、核磁共振波譜法[26]、示波極譜法[27]等新技術。
結語中藥鑒定技術的迅速發展,對中藥的真偽鑒別、質量控制有著重要的意義,它正向著標準化、科學化和信息化的方向發展。
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信息的鑒別與評價范文4
[關鍵詞] 分子生藥學;教學方法;理論教學
[中圖分類號] R93 [文獻標識碼] C [文章編號] 1673-7210(2012)02(b)-0137-02
Investigation of teaching methods of molecular pharmacognosy
WANG Lili DAI Liping CHEN Suiqing
Pharmacognostic Research Office, School of Pharmacy, He'nan College of Traditional Chinese Medicine, He'nan Province, Zhengzhou 450008, China
[Abstract] Molecular pharmacognosy is an interdisciplinary subject which involves multidisciplinary subjects. Molecular pharmacognosy requires students to possess the professional basis of pharmacognosy, biochemistry, molecular biology and other courses, also involves some new techniques and methods. Therefore, it is very difficult to teach. This paper explores the use of variety teaching methods and means to improve the efficiency of the curriculum bases on the features of molecular pharmacognosy, and analyzes the problems existing in the teaching of molecular pharmacognosy, in order to promote the development and improvement of the theoretical teaching of molecular pharmacognosy and serve to improve the overall quality of traditional Chinese medicine major students through molecular pharmacognosy.
[Key words] Molecular pharmacognosy; Teaching method; Theoretical teaching
隨著分子生物學技術的飛速發展,DNA分子標記技術正在廣泛應用到生命科學的各個領域,促使了大批交叉學科和新型學科地產生。1995年,黃璐琦在《展望分子生物技術在生藥學中的應用》[1]中首先提出“分子生藥學(molecular pharmacognosy)”這一概念,分子生物學技術與生藥學的相互滲透和發展促使了分子生藥學的產生。分子生藥學主要研究內容為種質資源鑒定和評價、瀕危藥用植物保護、生藥的分子鑒定、道地藥材形成機制等,從分子水平對生藥的遺傳背景進行鑒別研究,克服了傳統鑒別方法的不足,因此迅速得到了專家學者的認可[2],特別是《中國藥典》(2010版)中已經收載了蘄蛇和烏梢蛇的聚合酶鏈式(PCR)鑒別方法[3]。2008年,中國中醫藥出版社出版了由黃璐琦和肖培根主編的《分子生藥學》,隨后《分子生藥學》進入本科生教材系列,我院亦對不同專業和層次的學生開展了《分子生藥學》的教學工作。筆者通過對《分子生藥學》教材進行認真鉆研,從教法上進行了摸索和探討,取得了較好的教學效果。
1 突出重點內容,主次分明
分子生藥學講授的內容為在分子水平上研究生藥的分類與鑒定、栽培與保護及有效成分生產所需掌握的技能。根據教學安排,本課程共設置54個學時,全部為理論教學,在每個章節的課時安排上,筆者對基礎理論、方法與技術、藥用植物的種植資源、道地藥材和生藥的鑒定等章節做了重點講述,突出分子生藥學的基本概念,同時對本學科的研究重點和熱點問題進行介紹。例如在生藥的分子鑒定一節中,生藥DNA分子遺傳標記鑒定是指通過比較生藥間DNA分子遺傳多樣性差異來鑒別生藥基源,確定其學名的方法,因此,選擇適當的DNA分子遺傳標記,能夠在屬、種、亞種、居群或個體水平上對研究對象進行準確地鑒別。在給學生講解的過程中,需要用具體的藥材來闡明不同種屬的藥物間在分子水平的差異。以人參為例,通過隨機多態性(RAPD)分析,人參、西洋參、竹節參能夠產生不同的RAPD指紋圖譜,從而達到分子鑒定的目的[4]。應用PCR直接測序技術對山藥以及其他三種地方常用偽品廣山藥、土山藥、方山藥的18S rRNA進行序列測定發現,山藥與廣山藥的序列完全相同,而與土山藥和方山藥的同源性較低,證明DNA測序技術可以成為山藥基源鑒定的有效方法[5]。通過理論及鑒別實例地講述,學生不僅掌握了基礎知識,同時能夠使理論應用到實際鑒別工作中,而且使其對本學科的重點和難點問題也有了進一步地了解。這種突出重點、以點帶面的教學方法取得了較好的效果。
2 多種教學方法并用,提高學習效率
2.1 利用多媒體資源和網絡資源
利用多媒體資源和網絡資源增強理論課的趣味性,培養學生扎實的基本功。分子生藥鑒定學是在分子水平上研究生藥的科學,是通過研究生物大分子核酸、基因組的結構及功能等來闡明各種生藥的真偽優劣。生藥有效成分多來源于次生代謝,不同種類的植物由于遺傳特性的不同,合成與積累次生代謝產物的種類及量可能存在著很大差異,從分子水平上尋找造成這些差異的原因需要堅實的理論基礎。多媒體課件既具有文字、圖像、動畫等視覺信息,也具有多媒體音響的聲音信息,這些多重感官刺激有利于提高學生的學習效果。另外,給學生推薦一些專業網站,例如美國國立生物技術信息中心(National Centre For Biotechnology Information,NCBI,http://ncbi.nlm.nih.gov)、歐洲生物信息研究所(The European Molecular Biology Laboratory database,EMBL,ebi.ac.uk)、日本國立遺傳學研究所(DNA database of Japan,DDBJ,ddbj.nig.ac.jp)等網站,可以使學生接觸到本專業最前沿的研究和技術,開闊學生的視野。
2.2 在分子生藥學教學中結合新手段、新技術
結合新手段、新技術等應用在分子生物學教學中,突出該學科的優越性,激發學生的求知欲。例如野生與栽培藥材的鑒別,利用傳統的鑒別方法極為困難,但利用分子標記技術對藥材的栽培品與野生品進行遺傳背景、種間親緣關系的探討,對于了解生藥變異的實質有重要的意義。以天麻的鑒別為例,由于野生天麻的資源稀少,近年來已有大面積的栽培,采用RAPD技術對野生天麻和三種人工種植的天麻進行DNA指紋圖譜的鑒別發現其RAPD指紋圖譜存在差異,提示可以利用各個樣品之間遺傳差異的大小,進行野生和栽培天麻分子水平的鑒別[6]。
2.3 鼓勵學生查閱文獻
鼓勵學生查閱本學科最新的文獻報道,擴大學生的視野,增強學生自主學習的能力。由教師擬定主題,每個月舉行一期討論會,根據主題,查閱文獻之后寫出綜述,在全班同學中間展開學習討論,通過這種方法可以提高學生的思考能力和動手寫作能力。
3 對教學中存在的問題與不足之處地探討
分子生藥學教學中存在的問題與不足主要表現在以下方面:首先,DNA分子鑒定技術對中藥的鑒別尚處于理論摸索階段,目前對大宗藥材的鑒別還是依靠來源、性狀、理化和化學的方法,分子鑒別由于儀器和試劑價格較高、操作比較復雜、對實驗室條件要求較高等因素,尚難普及推廣。其次,任何一門新學科發展都需要一個過程,都有一個從不成熟到逐步成熟的階段。由于課時的限制,加上分子生物學技術大多操作復雜,成本較高,費時費力,很難給學生開展實驗教學工作,學生對PCR擴增儀、電泳儀、DNA測序儀等儀器設備和常用試劑比較陌生,沒有直接的感性認識,給理論知識的理解造成了一定的困難。另外,教材中一些章節內容過多,基礎概念和理論講述不夠準確,給教學和學生的理解造成了一定的困難。例如《分子生藥學》教材第五章珍稀瀕危的藥用植物,對于物種的概念和遺傳多樣性的描述過于籠統,而且涉及到植物分類學、生態學以及遺傳學等方面的知識,對于中藥學專業的學生來說,理論知識過于龐雜。當然,分子生藥學為新興學科,尚未形成一整套自己的名詞和概念,有待不斷發展和完善。
分子生藥學的授課是在中醫藥理論基礎上學習生物技術的原理、手段及其在中藥資源學和中藥鑒定學中的應用,使學生拓寬知識領域,為從事中藥的真偽鑒別、品種整理、質量評價和開發應用打下基礎。結合分子生藥學的特點及社會的專業需求,授課中應運用現代生物技術和方法,采用理論聯系實際和現代化的教學手段進行系統全面教學。分子生藥學課程的設置是為推進素質教育,解決中藥資源和中藥鑒定突出問題;其培養目標是力求培養中藥專業學生對中藥品種和質量、安全等獨立分析鑒定和解決實際問題的能力;使其深刻領會中藥質量評價的核心思想,了解制訂規范化的中藥質量標準以及尋找新藥,實現中藥資源可持續利用等的理論知識和實踐問題。為了達到該目標,需要在教學方法和理論以及實踐等各方面取得不斷完善和進步,讓分子生藥學課程真正地為提高中藥專業學生的綜合素質而服務。
[參考文獻]
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【關鍵詞】中藥鑒定;分子生物學技術;免疫法;綜述
近年來,許多新學科理論和試驗技術不斷滲透到中藥鑒定領域,中藥鑒定技術有了一定的發展,現綜述如下。
1聚類分析法
聚類分析是按照對象的定性或定量特征進行分組歸類的一種現代統計方法。選取不同的模糊相似系數或長短距離計算公式,將一批樣品或變量進行數據處理,得到不同的動態聚類圖,從數圖上即可分類、鑒定和評價藥材質量。經李慧珍等[1]對馬勃等18種真菌顯微特征聚類分析、蘇薇薇[2]以砂仁及其偽品的紫外光譜為量化特征在計算機上用聚類分析法進行分析的實踐,證明該法的實驗結果與傳統的生物學方法吻合,顯示了該技術在中藥鑒定中的廣闊前景。常璇等[3]利用此法對寧夏中寧縣、平羅縣兩地枸杞中銅、鋅、錳、鍺、硒、砷等6種微量元素的含量進行了綜合評價,以比較研究不同產地之間的枸杞。聚類分析結果表明,該法在整體水平上可區分不同產地枸杞中6種元素含量,誤判率為0。提示經過更多的驗證之后,在不同省區枸杞之間進行聚類分析比較研究,可為枸杞道地性質量標準的制定提供有價值的理論依據。張水寒等[4]應用系統聚類法,對20批關黃柏樣品的HPLCFP中各特征峰的相對峰面積進行分析。聚類結果顯示16、17、18、19、20號樣品為道地藥材樣品,質量均較好,且以湖南的道地藥材樣品為好。此方法可用于中藥的鑒別,方法較為簡便,且樣品處理較簡單,這將對中藥質量的規范化起到一定的積極作用。
2指紋圖譜法
中藥指紋圖譜技術[5]是指某中藥材或中成藥中所共有的,具有特征性的某類或幾種成分的色譜或光譜的圖譜。即用一定的方法(如HPLC、GC、TLC、HPLCMS、GCMS、FTIR、Xray和UV等),對特定的對象(如中藥材、提取物、飲片、注射液等)和過程進行分析,得到的有特征性的相對穩定的圖譜。其最大的特點就是通過指紋圖譜的特征性,有效鑒別樣品的真偽。目前使用最多的中藥化學指紋圖譜是采用HPLC法[6],可提供大量的信息,符合中藥復雜體系研究的需要。
3免疫法
不同的動植物藥材含有不同的特異蛋白,免疫鑒別即利用該蛋白制備的特異抗體與待檢品中的特異抗原結合產生沉淀反應來鑒別藥材的真偽。該技術適用于動物藥材的鑒別,尤其是親緣關系比較接近的動物藥間的鑒別[7]。國內學者[8]采用免疫電泳法及瓊脂免疫擴散法準確鑒定了虎、豹等多種動物的骨骼,還能將豹骨進一步鑒定為雪豹、石豹或金錢豹,說明免疫鑒別方法是一種特異性很強的鑒別法。
4DNA分子遺傳標記技術
分子標記技術也稱DNA分子診斷技術,是基于研究DNA分子由于缺失、插入、易位、倒置、重排或由于存在長短與排列不一的重復序列等機制而產生的多態性的檢測技術[1]。現代分子生物學研究發現,中藥材(不含礦物藥)物種的多樣性是由于其基因多態性的結果,而基因多態性可在分子水平上檢測,它比在形態、組織和化學水平上檢測更能代表其變異類型的遺傳標記。由于DNA分子標記直接分析的是生物的基因型而非表現型,鑒別結果不受環境因素、樣品形態(原品、粉狀或片狀)和材料來源的影響,因此可為中藥品種鑒別提供更加準確可靠的手段。如:限制性片斷長度多態性分析技術(RFLP);多聚酶鏈反應(PCR)測序技術;隨機引物PCR技術(RAPD);DNA序列標記技術等。
綜上所述,現代中藥鑒定學發展的目標是:建立包括聚類分析、基因組成特征、指紋圖譜法、等多層面的中藥鑒定學科體系,同時通過這種學科體系建設,為尋找和擴大新藥源提供可靠的指導資料。新晨:
參考文獻】
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申明:本網站內容僅用于學術交流,如有侵犯您的權益,請及時告知我們,本站將立即刪除有關內容。 【摘 要】中藥是中華民族的精髓,是中華民族五千年歷史的結晶,中藥的現代化成為中藥走出國門更上一個新臺階的必要手段,因此藥材、中成藥的質量標準成為醫藥研究的一個重要課題。中藥的指紋圖譜作為一種非常先進并且切實可行有效手段,在中藥質量、中藥制劑及其中間體質量控制等方面得到了廣泛的應用,已成為國際公認的控制中藥質量非常有效的方法。本文就中藥指紋圖譜的方法及應用進展進行了綜述。 【關鍵詞】中藥 中藥制劑 指紋圖譜 【中圖分類號】G642 【文獻標識碼】A 【文章編號】1674-4810(2015)15-0117-03
一 指紋圖譜在中藥中重要性
中藥樣本經過現代分析技術手段可得到中藥各組成部分的中藥群體圖譜或圖像特征。主要用高效液相、氣相、紫外、紅外、計算機圖像分析、掃描電子顯微鏡、核磁共振、分子生物學技術、同功酶分析法、電泳技術、X射線衍射技術、聚類分析技術等現代分析測試手段,呈現比較完整的中藥的組成與含量及化學特定結構組成的圖譜。中藥圖譜的特征是它并不要求呈現出每一個組分的化學結構,同時對每一個組成部分的精確定量也要求不高,但為保證中藥的有效性,圖譜信息必須盡可能清晰、豐富,并一定要具備“指紋”特征,保證了中藥的有效性、安全性、可控性、一致性與穩定性。因此,為了對中藥質量進行有效控制及藥效研究及推廣,推行現代化的中藥指紋圖譜十分必要。
二 中藥指紋圖譜的建立方法
1.TLC(薄層色譜)層析法
因具有容易操作、設備簡單、結果呈現直觀,分析速度較快等特點而得到廣泛的應用。同時因薄層色譜分析發展較早、應用廣泛而作為最主要的鑒別方法被多國植物藥典收載(收錄)。在2000年版《中國藥典》收錄的1000余種中藥鑒別方法中,指紋圖譜法作鑒別的種類有600多種,由此可見指紋圖譜層析法應用之廣泛、實用性之大。同其他鑒別方法一樣,雖然指紋圖譜同時能鑒別多個樣品,但也有著自己的低效能、低重現性、低靈敏度等缺點,所以如果成分復雜的中藥,是很難用指紋圖譜來鑒別,并對中藥和制劑提出有效的質量評價。
2.HPLC(高效液相色譜)法
相較TLC(薄層色譜),高效液相色譜法有著高分離效能、重現性好的特點。根據樣品的不同和實際需要,高效液相色譜法還可以連同其他的檢測器來分析各種類型的樣品。HPLC與質譜分析以(MS)聯用,在對中藥分析時,不僅可快速得到中藥圖譜的指紋信息,還可同時得到色譜峰的結構信息,因此,HPLC與MS聯用,成為得到中藥指紋圖譜的主導方法。采用1.7um粒填料的超高效液相色譜技術(UPLC)借助于HPLC的理論及原理,在分析時的通量、靈敏度及色譜峰容量等方面有著非常大的優勢,是對天然產物及其代謝產物分離分析的有效方法,給中藥指紋圖譜研究提供了新方向和平臺。
3.氣相色譜法
氣相色譜由于其對揮發性成分的檢測具有分離效率高、分析速度快、樣品用量少、檢測靈敏度高和應用范圍廣的特點,常用于有揮發性的中藥的成分檢測分析,同時也用于在中藥經衍生化反應后分析其成分中的糖、生物堿、脂肪、內脂、酚類等物質。近年來,為獲得樣品的全信息特征,多維檢測技術的聯用越來越受到中藥分析的重視。
4.毛細管電泳(capillary electrophoresis,CE)法
毛細管電泳法因具有較少的進樣量,高靈敏度、高柱效、滿意的分析速度等優點而得到廣泛的應用。毛細管電泳法是以毛細管為分離通道,依據進量樣品中各組分之間有著淌度和分配行為上的不同,以高壓直流電場為驅動力而實現分離析方法,對中藥中復雜的成分可實現高效快速分離。毛細管電泳法理論體系逐漸成熟后,得到了迅速的發展,到目前為止毛細管電泳法已有多種分離模式,如處理盡量降低電滲流的毛細管區帶電泳法、在緩沖液中加入離子型表面活性劑的膠束電動毛細管色譜、含色譜固定相的毛細管為分離柱的毛細管電色譜等,都可對動植物類中藥成分進行高速有效的分離分析,在中藥指紋圖譜研究方面提供了更為廣闊的前景及方法。
5.高速逆流色譜法(HSCCC)
高速逆流色譜法起源于1982年,是連續高效的液―液分配色譜技術,和上述色譜分離技術不同,它不需要任何固態載體,它保證了不和樣品發生污染、失去活性,因而在分析分離中得到的結果重現性較好。高速逆流色譜法是根據動態液―液分配原理為基礎的一類分離分析方法,區別于其他高效液相色譜分離法,有著樣品前處理非常簡單的極大優勢。該方法具有分析純度高、操作簡單等優點,也存在分離時間過長、連接處容易出現滲漏等缺點。
6.X射線衍射法
區別于上述分析分離方法,X射線衍射法是依據光衍射原理的分析法。通過電子對X射線的散射產生衍射現象時,獲得的電子密度的分布情況等信息而產生的衍射圖譜。目前為止,X射線衍射法主要用于晶體結構分析中,但是只要樣品中的組成機構穩定,用X射線衍射法得到的衍射圖就可作為該樣品的特征圖譜(指紋圖譜)。因其分析法所需樣品量非常小,并且有著樣品的前處理非常簡單,操作方法簡便等優勢,以及獲得的圖譜信息量大,特征信息明顯,穩定性較高等優點而得到了廣泛應用。
7.DNA指紋圖譜法
DNA指紋圖譜法是限制性內切酶消化和與特異的核心探針雜交取得不同大小的DN段的多點區帶圖譜,再和已經得到的另一個體的比較以評價其相似性的技術,得到的DNA圖譜是利用聚合酶鏈反應從不同生物樣品中進行人工合成DN斷,因為其片斷的數目和大小都因不同的生物而不同,所以稱之為DNA指紋圖譜。這種DNA指紋技術不僅有更好的重現性和高靈敏度,而且具有鑒別結果不受外界環境因素干擾,對樣品形態(原品、粉末或片狀)和材料來源都沒有具體的限制,這樣DNA指紋技術就為中藥品種鑒別及藥效的開發利用提供更加精確穩定的方法。
三 中藥指紋圖譜的應用及前景
1.對中藥材進行質量鑒定及來源辨認
由于近年來名貴中藥的利用價值被不斷發現,部分中藥又因產地不同或者資源的再生能力差異,中藥市場出現了很多假冒偽劣商品,而中藥的有效成分是衡量中藥材質量的關鍵因素,所以鑒別中藥材的產地及質量尤為重要。但中藥材質量控制在傳統上都是以色、狀、味等外觀來確定真假及產地,后期最多加以顯微鏡等現代化設備來辨別真偽,但還是非常有限,更不用說一個完整的鑒定體系了。中藥指紋圖譜技術很好地避免了這些不利條件。在現有的中藥材質量控制標準中,主要偏重于“有效成分”“指標成分”等特定因素,大大對中藥的“整體”及“活性”成分給予了毀滅性的否定,所以中藥的藥用價值不能完全體現,仍難以真正控制現在中藥質量。
現代分離技術的不斷發展,這給中藥指紋圖譜技術的發展提供了肥沃的土壤及理論支撐,為中藥走出國門、服務人類、建立中藥藥用價值評價體系提供了非常大的幫助。同時由于中藥的生長環境不同,藥用價值也有很大的差異。為保證中藥材的藥效,對中藥的種植場地及采收環境也有著嚴格的限制。因此在對中藥的質量控制及藥效監控中,場地和等外界環境因素也是中藥質量鑒別的一個重要方面,中藥指紋圖譜技術很好地解決了這一難題。同時,中藥指紋圖譜技術從科學的角度解釋了中藥的臨床效果,這讓國內外廣泛接受中華民族之醫藥精髓就有據可查、有據可依,為中醫的全面崛起提供了非常強大的理論基礎。
2.規范中藥制劑,對中間體進行質量控制
中醫曾經被懷疑過,有一段時間,人們對中藥制劑的臨床作用存在顧慮,其制劑的中間質量控制也成為醫學領域難以控制的問題。中藥因其“整體性”一直困擾著我們。中藥制劑化學成分復雜,有的甚至不能用“化學成分”來定義,所以一份標準的中藥制劑是不能簡單地說它有什么樣的化學成分或組分。中藥指紋圖譜技術利用中藥組分的組合性及指紋特性,很好地為中藥制劑提供了解決方案,可以說中藥的指紋圖譜技術是中藥制劑發展的堅強科學支撐,因指紋圖譜技術引入了先進的現代分析和檢測設備,對中藥制劑全面的質量觀概念提供了標準化及科學化的依據,為中藥制劑的迅猛發展提供了強大技術力量支撐。
3.監控中藥材炮制過程,規范中藥生產工藝
中藥指紋圖譜技術除了能在中藥材的質量控制、產地來源確定、中間體和中藥制劑的質量規范行為上有較大的應用外,還可對中藥材的炮制過程進行監控、規范及完善中藥生產工藝。王冬梅等采用HPLC-UV-MS法,建立了貫葉連翹提取物(含金絲桃素類和黃酮類化合物的提取物)的指紋圖譜分析方法,并對貫葉連翹提取物的主要色譜峰進行定性定量的分析,以10個主要成分色譜峰的定性定量化學分析為質量標準,對中藥制劑的提取工藝中有效成分的富集程度、工藝的批內精密度和批間緊密度及穩定性的影響進行評價。實驗證明,在有效的整體質量體系里指紋圖譜法可為提取物的質量控制以及制備工藝的評價提供依據。
4.其他應用
為了實現中藥化學指紋圖譜向中藥藥效組分指紋圖譜的轉化,利用中藥指紋圖譜技術,還可對中藥指紋圖譜信息與藥效活性信息進行相關性實驗研究,由此建立中藥指紋圖譜的藥效研究體系;建立特征活性成分、有效組分群及特征活性指紋圖譜的研究中,特征活性指紋圖譜是指紋圖譜譜效學的最重要研究核心。中藥指紋圖譜可用現代分析分離方法對圖譜進行定性定量分析,將可知化學成分的指紋圖譜和體內代謝過程從數量上聯系起來,研究中藥活性成分、有效部位、單味中藥和中藥復方在體內吸收、分布、代謝、排泄的動態變化規律和量―效關系。
5.應用前景