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雞消化道內的菌群定植需要一個過程，3-7日齡是雛雞腸道內菌群形成階段，7-16日齡雛雞消化道內的正常菌群基本完成[1]，而在此之前，有益菌群未完全定植于腸道上皮細胞，容易受到外界病原菌的侵害，大部分的養殖者便采用飼料中添加抗生素來預防。但近年來，隨著抗生素的耐藥性和內源性感染等問題的日益嚴重，世界各國都在相繼立法，限制部分或完全禁止抗生素用作飼料添加劑[2]。微生態制劑作為替代飼用抗生素的添加劑，正憑借其安全、優質、無公害及有效的促生長作用被越來越多的人所認可。我國農業部公告（第318號）批準使用的微生物飼料添加劑有15種[3]，植物乳桿菌（LactobacillusPlantarum）便是其中一種，其能分解食物中的蛋白質和糖類、合成維生素，能顯著提高食物生物效價，促進消化吸收。前人對于乳酸菌對動物機體的影響研究已比較多，但是對于不同添加水平的植物乳桿菌對肉雞免疫機能影響的研究還較少。本試驗旨在對肉雞飼喂不同添加水平的植物乳桿菌，研究其分別對肉雞血清總蛋白含量、IgG含量及NDV抗體效價的影響，以便為植物乳桿菌在動物生產中的推廣和應用提供科學依據。   1材料與方法   1.1實驗材料   微生態制劑：植物乳桿菌菌粉，山東寶來利來生物工程股份有限公司生產。試驗動物：1日齡健康愛拔益加（AA）肉雞，購自山東民和牧業股份有限公司。雞新城疫弱毒苗和傳染性法氏囊疫苗均購自揚州威克生物工程有限公司。試驗日糧：參照AA肉雞營養標準自行配制的玉米-豆粕型全價料，按第一（1-14日齡）和第二（15-42日齡）兩個階段配制，不添加任何抗生素、藥物及微生態添加劑。   1.2試驗方法   1.2.1試驗設計與分組   本試驗選用健康體重狀況基本相同的1日齡AA肉雞420羽。隨機分成7組，每組3個重復，每個重復20只。Ⅰ組為對照組，飼喂基礎日糧；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ組為微生態制劑組，在飼喂基礎飼糧的同時，分別定時在飲水中添加1.0‰、2.0‰、4.0‰、6.0‰、8.0‰、1.0%的植物乳桿菌，之前需禁水0.5h，確保乳酸菌在最短時間內全部被雞只攝入，之后再補充清水。試驗期42天。   1.2.2飼養管理   所有參試雞采用籠養方式。雞只自由采食、充足飲水。舍內光照、溫度和濕度嚴格按照常規飼養管理要求進行控制。每日換食換水前進行食槽和飲水器的清洗工作。試驗期間詳細觀察、檢測并記錄各組試驗指標及試驗雞的健康狀況。免疫程序：分別于7和21日齡，按規定劑量和方法對雞進行新城疫疫苗的滴鼻點眼免疫；14日齡時，進行法氏囊滴鼻點眼免疫。   1.2.3樣品采集及檢測指標   （1）血液中血清總蛋白含量的測定：分別于14、21、28、35、42日齡清晨（禁食12h，僅供飲水）以重復組為單位，從中隨機選取2只接均體重的健康雞只，頸靜脈采血，常規方法分離血清，利用全自動生化分析儀測定血清總蛋白含量。（2）IgG含量的測定：采集血清（方法同上），利用全自動生化分析儀測定血清中的IgG含量。（3）NDV抗體效價的測定：采集血清（方法同上），按照血凝抑制試驗的標準檢測血清中的NDV抗體效價。   1.2.4數據處理   采用SPPS17.0軟件One－WayANOVA對上述數據進行方差分析，用Dun-can’s方法進行多重比較。試驗數據用平均數M±標準差SD表示。   2結果與分析   2.1植物乳桿菌對肉雞血清總蛋白含量的影響   由表1可知，14-42日齡各添加組的血清總蛋白含量均高于對照組。其中，第14日齡時，Ⅱ組和Ⅲ組顯著高于對照組(P<0.05)，21日齡時，Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組顯著高于對照組(P<0.05)，28日齡時，Ⅳ組顯著高于對照組(P<0.05)。35日齡及之后，各添加組之間以及與對照組之間差異均不顯著。從整體情況來看，隨著日齡的不斷增加各組的血清總蛋白含量是上升的，以Ⅱ組的效果最好最穩定，且在21日齡之前均顯著高于對照組(P<0.05)，其次為Ⅲ組和Ⅰ組。   2.2植物乳桿菌對肉雞血清中IgG含量的影響   由表2可知，除了14、28和35日齡時，Ⅰ組低于對照組以外，各添加組在任意時段的IgG含量均高于對照組，其中，14日齡時Ⅱ組和Ⅲ組顯著高于對照組（P＜0.05）。21日齡時，Ⅱ組顯著高于Ⅰ組，且Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組均顯著高于對照組（P＜0.05）。28日齡時，Ⅱ組和Ⅲ組顯著高于對照組（P＜0.05）。因此，整體來看，以Ⅱ組和Ⅲ組提高IgG含量效果最好，且在28日齡之前顯著高于對照組（P＜0.05）。   2.3植物乳桿菌對肉雞NDV效價的影響   從表3可以看出，14-42日齡各添加組的NDV效價均高于對照組。其中，21日齡時，Ⅱ組和Ⅲ組顯著高于對照組（P＜0.05）。42日齡時，Ⅱ組、Ⅲ組和Ⅳ組顯著高于對照組（P＜0.05）。其他時間各添加組之間以及與對照組之間差異均不顯著。從表中我們還可以看出，隨著日齡的不斷增長，對照組的NDV效價是先降低后升高降低的，這是因為7日齡和21日齡對雞進行了新城疫滴鼻點眼免疫，7日齡免疫完之后，NDV效價應該是逐漸上升，14日齡之后有下降的趨勢，到21日齡時，又加強了免疫，NDV效價逐漸上升，35日齡之后出現下降的趨勢。各植物乳桿菌的添加組，則是隨著日齡的增長，一直處于上升的趨勢，35日齡之后趨于穩定，并且各添加組在任意時刻的NDV效價均高于對照組，尤其以Ⅲ組和Ⅱ組的效果最好。   3討論   3.1植物乳桿菌對肉雞血清總蛋白含量和IgG的影響   乳酸菌能通過淋巴循環活化全身的免疫防御系統，激發機體的體液免疫和細胞免疫，誘導干擾素、白細胞介素等細胞因子的產生，刺激腸道產生黏膜抗體，增強機體抑制癌細胞增殖的能力，從而提高機體局部免疫功能力，抵御感染。Huang［4］等研究發現，添加無活性嗜酸性乳酸桿菌可顯著提高肉仔雞30日齡血清IgA和IgG水平。王晶［5］等也得出同樣的。本試驗中血清總蛋白含量的測定結果表明，各添加組在任何時期的清總蛋白含量均高于對照組，在整個過程中以Ⅱ組的效果最好；IgG含量的測定結果表明，以Ⅱ組和Ⅲ組效果最好，尤其在28日齡之前均顯著高于對照組（P＜0.05）。#p#分頁標題#e#   3.2植物乳桿菌對肉雞新城疫疫苗免疫后NDV效價的影響   張七斤等[6]利用兩株乳酸桿菌L.casei.zhang和MG2-1制成乳酸菌液和發酵乳以不同的劑量灌服給雛雞，在10、28日齡進行兩次新城疫疫苗免疫，在二免后的第7天和14天檢測血凝抑制效價，發現與對照組相比，試驗各組抗體水平均達到顯著或極顯著水平。司振書等[7]報道，飼喂微生態制劑后，350日齡及380日齡時試驗組血清中新城疫血凝抑制抗體效價分別高出對照組25.81%和25.42%。李路勝[8]等研究發現，55日齡乳酸菌發酵組較抗生素組的新城疫抗體效價有顯著的提高。本試驗結果表明，各植物乳桿菌的添加組隨著日齡的增長，新城疫抗體效價一直處于上升的趨勢，35日齡之后趨于穩定，并且各添加組在任意時刻的NDV效價均高于對照組，尤其以Ⅲ組和Ⅱ組的效果最好。植物乳桿菌之所以能提高肉雞循環血液中的抗體水平，并且能長時間的保持較高水平，延緩抗體水平下降，這可能是因為乳酸菌制劑中的細菌本身或細胞壁成分刺激宿主細胞，激活免疫系統，使機體的免疫功能始終處在較高的活性狀態，有更多的淋巴細胞發育成漿細胞產生抗體，從而提高機體抗體水平，增強抵抗力[9]。   4結論   各添加水平的植物乳桿菌均能不同程度地提高肉雞的免疫性能，但并非添加量越多越好，綜合考慮，以Ⅱ組和Ⅲ組（2.0‰-4.0‰）的植物乳桿菌添加組效果最好。