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簡述微生物檢測技巧

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簡述微生物檢測技巧

一、常用微生物檢測技術(shù)

1.染色技術(shù)

染色技術(shù)則是對微生物細(xì)胞進(jìn)行染色后,對微生物進(jìn)行觀察檢測的一種技術(shù),不過由于染色后微生物標(biāo)準(zhǔn)基本是死的,其形態(tài)和結(jié)構(gòu)會在染色過程中發(fā)生一定變化,無法切實(shí)反應(yīng)出活細(xì)胞的真實(shí)情況,因此通常只作為輔助檢測手段。在實(shí)際操作中,整個流程也較為繁瑣,染色、脫色都需要嚴(yán)格控制,否則將會影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.分離純化技術(shù)

自然環(huán)境中的微生物通常是雜居混生的,在微生物檢測中需要對混生微生物群體進(jìn)行分離純化,以對純微生物進(jìn)行檢測的技術(shù),分離純化技術(shù)常用于菌種鑒定中,分離純化技術(shù)是微生物檢測的一項(xiàng)重要技術(shù),是微生物檢測的重要基礎(chǔ)。

3.其它技術(shù)

在微生物常規(guī)檢測中,通常對微生物進(jìn)行形態(tài)結(jié)構(gòu)、培養(yǎng)特性方面的觀察,再利用化學(xué)反應(yīng)來測定微生物的代謝物,以鑒別一些形態(tài)和其它方面不易區(qū)別的微生物,以更好的進(jìn)行微生物分類鑒定。近年來,在環(huán)境監(jiān)測中,微生物檢測技術(shù)運(yùn)用方法較為廣泛,如運(yùn)用細(xì)菌總數(shù)和糞便污染指示菌監(jiān)測水質(zhì),運(yùn)用發(fā)光細(xì)菌檢測環(huán)境有毒物質(zhì),運(yùn)用水中藻類生長量監(jiān)測水質(zhì)或物質(zhì)霉性等等,這些方法都已經(jīng)有了較為成熟的操作手段和檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn),具有較強(qiáng)的實(shí)踐價值。

二、環(huán)境監(jiān)測中常用微生物檢測技術(shù)

1.微生物群落監(jiān)測

微生物群落監(jiān)測是一種較為經(jīng)濟(jì)、快速、有效的微生物檢測方法,被廣泛應(yīng)用于各種廢水、土壤、空氣監(jiān)測中。如重金屬、農(nóng)業(yè)、石油、化工、冶煉、食品加工、制藥、綿紡、化肥、生活污水等方面,即大量運(yùn)用了微生物群落監(jiān)測技術(shù)。由于環(huán)境污染物的含量會隨著時間變化而變化,會隨著其它環(huán)境條件的變化而且變化,因此對一定區(qū)域內(nèi)的微生物群落進(jìn)行監(jiān)測,能更好的將一定時間范圍內(nèi)環(huán)境污染的變化情況、環(huán)境污染歷史情況更好的描述出來。目前,急需運(yùn)用現(xiàn)代微生物群落監(jiān)測技術(shù),對微生物群落的群落生態(tài)、個體生態(tài)進(jìn)行監(jiān)測,對微生物進(jìn)行毒性測定、致突變測定,對微生物進(jìn)行生理、生化指標(biāo)測定等等。

2.環(huán)境污染細(xì)菌學(xué)監(jiān)測

環(huán)境污染對硅藻生物、叢生植物等生物的影響較為明顯,對細(xì)菌等異養(yǎng)生物的影響不太生長感。不過環(huán)境污染依然會對細(xì)菌等異養(yǎng)生物造成巨大的影響,在環(huán)境監(jiān)測中進(jìn)行細(xì)菌學(xué)監(jiān)測,也能獲得豐富的數(shù)據(jù)。在實(shí)際環(huán)境監(jiān)測中,通常會利用檢驗(yàn)細(xì)菌總數(shù)的方法,來間接判斷環(huán)境污染程度,為水污染、土壤污染提供細(xì)菌學(xué)指標(biāo),如通過檢驗(yàn)總大腸菌群、烘大腸菌群、糞鏈球菌、腸道病毒等,能有效判斷出水的衛(wèi)生學(xué)質(zhì)量。雖然空氣并非是菌群生長繁殖的天然環(huán)境,不存在固定的菌落群,但隨著土壤、水、人體等進(jìn)入空氣中,依然可以對空氣中的菌落群進(jìn)行檢測以獲得環(huán)境污染的監(jiān)測數(shù)據(jù)。在空氣污染監(jiān)測中,也可以通過對細(xì)菌的分布、生長狀況、變異特性、生理生化指標(biāo)、細(xì)菌群落系統(tǒng)變化等來研究空氣污染情況,測定空氣中的污染物毒性。包括如敏感菌群的消失、抗性強(qiáng)菌群的保留和發(fā)展、菌群個體的發(fā)育狀況、菌群適應(yīng)性的變化、菌群生化反應(yīng)等等。

3.微生物毒理學(xué)監(jiān)測及其它檢測技術(shù)

環(huán)境污染物除了對人體、動植物造成影響外,對微生物也會造成影響,通過監(jiān)測微生物對環(huán)境污染物的生物效應(yīng),進(jìn)行污染物毒理性質(zhì)、作用機(jī)理、損壞現(xiàn)象等檢測,用以探明環(huán)境污染物對微生物造成的影響,把握環(huán)境中污染物各項(xiàng)指標(biāo)情況,為環(huán)境監(jiān)測提供早期敏感性指標(biāo),判斷環(huán)境狀況和尋求治理路徑。此外,還有其它一些近兩年得到迅速發(fā)展的微生物檢測技術(shù),如生物傳感器技術(shù)、PCR技術(shù)、酶免疫技術(shù)、核酸探針技術(shù)等。生物傳感器技術(shù)利用微生物傳感器,如甲烷生物傳感器、氨生物傳感器、菌濃度檢測器等對環(huán)境進(jìn)行自動、連續(xù)檢測,能準(zhǔn)確及時的獲取環(huán)境污染信息,具有極高的時效性和靈敏度。PCR技術(shù)利用微生物異性DN段,對微生物進(jìn)行序列分析、基因克隆等獲取環(huán)境污染信息。

三、微生物檢測技術(shù)和化學(xué)、物理分析法的對比

傳統(tǒng)的化學(xué)、物理檢測方法大多集中針對環(huán)境污染物的性質(zhì)、來源、含量、分布狀態(tài)等進(jìn)行檢測,所需儀器和設(shè)備通常較為復(fù)雜,并且部分檢測方法存在缺陷,如重量法在環(huán)境污染物濃度較低時會產(chǎn)生較大誤差,容量法雖然操作方法但靈敏度不高,光學(xué)分析法多適用于水和液體試樣的分析,在實(shí)際應(yīng)用中,這些方法存在不少不足和缺陷,無法較全面的把握環(huán)境污染數(shù)據(jù)。

微生物檢測技術(shù)針對微生物對環(huán)境污染或環(huán)境變化的反應(yīng)進(jìn)行監(jiān)測,所需儀器設(shè)備相對物理、化學(xué)檢測更易操作,且樣本受污染影響較小,具有較高的靈敏度、可靠性、穩(wěn)定性、實(shí)時性,并能廣泛應(yīng)用于各種環(huán)境的監(jiān)測之中,從生物學(xué)的角度反應(yīng)出環(huán)境污染的情況和歷史背景,獲取豐富的數(shù)據(jù)。

作者:楊艷 單位:山東省日照市五蓮縣環(huán)保局

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