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遺傳學(xué)研究范文1

【關(guān)鍵詞】白癜風(fēng)；遺傳

【中圖分類號(hào)】R758 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1004-7484（2013）04-00124-02

1 白癜風(fēng)遺傳流行病學(xué)研究和遺傳模式

白癜風(fēng)在不同的地區(qū)和種族的流行率為：埃及1%，瑞士0.39%，俄羅斯0.14%，倫敦0.24%，美國(guó)1%，中國(guó)0.12%-2.7%[23]。許多研究表明白癜風(fēng)具有家族聚集性[1]。高加索人群約15-20%的白癜風(fēng)患者有至少一個(gè)患病的一級(jí)親屬[2]。中國(guó)約15.7%的白癜風(fēng)患者有家族史，其中1.8%的患者有至少一個(gè)一級(jí)親屬患白癜風(fēng)。在一級(jí)和二級(jí)親屬中白癜風(fēng)的遺傳率分別為59.6% 和55.2%[5]。相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)度遞減提示距離先證者親緣關(guān)系越近，患白癜風(fēng)的可能性越大。同胞對(duì)的研究為白癜風(fēng)病因?qū)W中的遺傳因素提供了更有力的證據(jù)：先證者同胞患病率為6.1%，是總?cè)丝诨疾÷实?8倍，這提示遺傳起著重要的作用[1]。白癜風(fēng)患者其他一級(jí)親屬患病風(fēng)險(xiǎn)在不同國(guó)家也非常相近：高加索人群7.1%，印度巴基斯坦人群6.1%，西班牙裔4.8%，中國(guó)1.8%[1]。孿生子研究發(fā)現(xiàn)同卵雙生子的同病率為23%[1]。此外散發(fā)高加索人群平均發(fā)病年齡是24.2歲[1]；而有家族史患者為21.5歲[15]。雖然白癜風(fēng)具有家族聚集性，但僅少部分以常染色體顯性或者隱性方式遺傳，而大部分的病例是無家族史的散發(fā)病例[10]。同卵雙胞胎具有完全相同的基因，但其白癜風(fēng)的同病率卻有限。這些研究提示：遺傳學(xué)和非遺傳學(xué)的成分都起到了重要作用。多基因多因素遺傳以及遺傳和環(huán)境交互作用導(dǎo)致了黑素細(xì)胞自我破壞，從而導(dǎo)致白癜風(fēng)皮損色素脫失[2，5，15]。

2 白癜風(fēng)與HLA

有研究表明患有自身免疫疾病，如自身免疫性甲狀腺疾病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病、成年糖尿病、惡性貧血和SLE等更易患白癜風(fēng)[1]。白癜風(fēng)與自身免疫性疾病的密切聯(lián)系引發(fā)了關(guān)于HLA與白癜風(fēng)之間關(guān)系的研究。 HLA位點(diǎn)與6號(hào)染色體上其他的主要組織相容區(qū)域緊密連鎖。白癜風(fēng)與HLA等位基因的相關(guān)研究在不同人群的結(jié)果并不一致。但其中一些MHC多態(tài)性在不同人群中被明確證實(shí)跟白癜風(fēng)有關(guān)，HLA-A1，A2，A3，A10，A*2501，A30，A31，B13，B15，B21，B27，B46，Cw4，Cw6，Cw*0602，DR1，DR3，DR4，DR6，DR7，DR12，DR53，DQ3，DRB1*0701，DRB1*0303，DRB1*04，DRB1*07，DRB4*0101，DQA1*0302，DQA1*0601，DQB1*0201，DQB1*0303，DQB1*0503，DBP1*1601等。但這些研究中大都未發(fā)現(xiàn)在特定的HLA等位基因和白癜風(fēng)一致的關(guān)聯(lián)[23]。也有一些研究明確了與白癜風(fēng)有關(guān)的位點(diǎn)，如A2，DR4，DR7，DRB4和DQB1*0303。在高加索人群，MHCII單倍型HLA-DRB1A*04-（DQA1*0302）-DQB1*0301不僅跟白癜風(fēng)高發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)，也與其相對(duì)發(fā)病年齡較早相關(guān)[6]；而單倍型HLA-A25-Cw*0602-DQA1*0302則與中國(guó)漢族人群白癜風(fēng)有關(guān)[18]。在患有與白癜風(fēng)相關(guān)的自身免疫性疾病的個(gè)體及家族中，MHC等位基因與白癜風(fēng)的相關(guān)性高于僅患白癜風(fēng)的個(gè)體和家族。也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，這些自身免疫病本身也與MHC區(qū)域內(nèi)等位基因相關(guān)。

3 白癜風(fēng)與功能候選基因

候選基因策略用來研究白癜風(fēng)與其他染色體上的等位基因的相關(guān)性。主要有功能候選法和定位克隆法。功能候選法主要研究與白癜風(fēng)發(fā)病相關(guān)的基因，如表達(dá)參與免疫和黑色細(xì)胞功能障礙的基因。1）MHC I 類和II類等位基因位于HLA位點(diǎn)上，這個(gè)高度多態(tài)性的區(qū)域包含參與免疫系統(tǒng)中抗原呈遞和表達(dá)的基因，如TAP1基因，該基因與一些自身免疫病相關(guān)，如幼年類風(fēng)濕、強(qiáng)直性脊柱炎和多部位硬化。同時(shí)也與高加索人早發(fā)白癜風(fēng)有關(guān)[7]。2）PTPN22基因編碼淋巴樣蛋白酪氨酸磷酸酶，是淋巴細(xì)胞特異性的細(xì)胞磷酸酶。有研究發(fā)現(xiàn)PTPN22基因多態(tài)性（R620W，1858C/T）可能與I型糖尿病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、毒性彌漫性甲狀腺腫和SLE等自身免疫性疾病相關(guān)。但一個(gè)印度古吉拉特邦的研究發(fā)現(xiàn)其與R620W不相關(guān)[16]。此外，其他候選基因如GCH1，CAT，ACE，ESR1，COMT，VDR，MBL2[20]等被發(fā)現(xiàn)與白癜風(fēng)有關(guān)。但是上述基因還未在不同群體中得到驗(yàn)證。3）CTLA-4基因編碼T細(xì)胞受體，參與控制T細(xì)胞增殖，調(diào)節(jié)T細(xì)胞凋亡以及反向調(diào)節(jié)T細(xì)胞活性。在局限性白癜風(fēng)患者中未發(fā)現(xiàn)關(guān)聯(lián)，但在同時(shí)患其他自身免疫病的患者中發(fā)現(xiàn)了較強(qiáng)的關(guān)聯(lián)[6]。也有學(xué)者通過META分析研究發(fā)現(xiàn)CTLA-4與白癜風(fēng)的相關(guān)性很弱，而與患有自身免疫性疾病的白癜風(fēng)患者的相關(guān)性更強(qiáng)[6]。

4 白癜風(fēng)與基因連鎖分析

基因組連鎖掃描致力于復(fù)雜疾病易感基因搜尋，包括掃描全基因組，以發(fā)現(xiàn)可能包含易感基因的染色體區(qū)域。跟候選基因策略不同，此方法不依賴于任何先前已有的基因研究結(jié)果來規(guī)劃研究途徑。近年來基因組連鎖分析方法發(fā)現(xiàn)了許多白癜風(fēng)的易感位點(diǎn)。SLEV1：2001年Nath等對(duì)16個(gè)患SLE的歐美家系進(jìn)行研究，這些家系中至少有一個(gè)成員同時(shí)患有白癜風(fēng)。他們?cè)?7p13上發(fā)現(xiàn)了一個(gè)重要連鎖，此連鎖的隔離行為提示這16個(gè)家系中有均等的遺傳效應(yīng)。這些結(jié)果證實(shí)了一個(gè)假說：SLE和白癜風(fēng)可能有共同的遺傳效應(yīng)[19]。在這個(gè)區(qū)域他們進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)了NALP1基因上的遺傳變異，這個(gè)變異跟家族白癜風(fēng)、自身免疫病以及散發(fā)白癜風(fēng)患者病情發(fā)展有聯(lián)系[14]。AIS1：Spritz等人研究了一個(gè)大的高加索家系，家系中許多成員同時(shí)患白癜風(fēng)和橋本式甲狀腺炎。全基因組掃描發(fā)現(xiàn)在1p31.3-p32.2（AIS1）上的顯著的寡基因自身免疫病易感位點(diǎn)。隨后他們對(duì)另外70個(gè)高加索家系進(jìn)行了全基因組連鎖分析，結(jié)果證實(shí)了此發(fā)現(xiàn)，還在1，7，8，11，19，22號(hào)染色體上發(fā)現(xiàn)了關(guān)聯(lián)證據(jù)[9]。Alkhateeb等在這個(gè)區(qū)域發(fā)現(xiàn)了在FOXD3啟動(dòng)區(qū)域的FOXD3-639G>T的變異，與常染色體顯性遺傳模式的白癜風(fēng)有關(guān)，在功能分析中證實(shí)了這些結(jié)果[3]。然而白癜風(fēng)與1p染色體上FOXD3區(qū)域的連鎖迄今為止僅在這一個(gè)家系中發(fā)現(xiàn)，未被在其他人群中證實(shí)。AIS2與AIS3：2004年Spritz等人對(duì)102個(gè)患有白癜風(fēng)的高加索家系進(jìn)行了連鎖分析，證實(shí)了位點(diǎn)17p13和發(fā)現(xiàn)了兩個(gè)新的易感位點(diǎn)7q22（AIS2）和8p12（AIS3）[24]。AIS4：2005年張等對(duì)106個(gè)中國(guó)漢族人群家系進(jìn)行了全基因組連鎖分析，發(fā)現(xiàn)4q13-q21含有白癜風(fēng)易感基因（肯定連鎖）。同時(shí)其他的位點(diǎn)也可能包含白癜風(fēng)的易感基因，包括1p36，6p21-p22，6q24-q25，14q12-q13（支持連鎖）[8]。6p21-p22和22q12：在2007年，張的研究組針對(duì)先前這些中國(guó)漢族人群可能存在的易感位點(diǎn)設(shè)計(jì)了后續(xù)的連鎖分析，加入了37個(gè)中國(guó)白癜風(fēng)的家系。最終精細(xì)定位：在6p21-p22和22q12的連鎖信號(hào)達(dá)到了顯著連鎖的閾值[17]。接下來又對(duì)22q12區(qū)域進(jìn)行研究，此區(qū)域中XBP1基因編碼一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子，其對(duì)于白癜風(fēng)的病情發(fā)展有著影響[22]。此外先前在高加索人群中發(fā)現(xiàn)的AIS1，2，3的強(qiáng)連鎖證據(jù)，在中國(guó)人群中均未被證實(shí)。這提示白癜風(fēng)有著很強(qiáng)的遺傳異質(zhì)性；同時(shí)提示在不同的種族中可能包含不同的基因風(fēng)險(xiǎn)因素。

5 白癜風(fēng)與全基因組關(guān)聯(lián)分析

GWAS是目前研究復(fù)雜疾病遺傳易感基因最熱門的方法。此研究分兩個(gè)步驟：第一步是發(fā)現(xiàn)步驟，成千上萬的位于全基因組的SNP被測(cè)試其與性狀的關(guān)聯(lián)，其中顯示出與表型相關(guān)聯(lián)的最高水平的SNP被用來做后續(xù)研究；第二步是在新的人群中，再次驗(yàn)證這些SNP與性狀的關(guān)聯(lián)，比較理想的是相同的規(guī)模和設(shè)計(jì)。兩階段的關(guān)聯(lián)分析結(jié)果再進(jìn)行meta分析。這種研究方法是對(duì)全基因組范圍的SNP進(jìn)行總體分析，這樣更容易發(fā)現(xiàn)與疾病發(fā)生有關(guān)聯(lián)的基因。在歐洲和中國(guó)有兩個(gè)研究組應(yīng)用了GWAS的研究方法。1）2010年Spritz等首先對(duì)孤立的羅馬尼亞人群中的32個(gè)白癜風(fēng)病例和50個(gè)對(duì)照采用GWAS研究，發(fā)現(xiàn)白癜風(fēng)與遠(yuǎn)端染色體6q27顯著相關(guān)，同時(shí)發(fā)現(xiàn)在SMOC附近與Ⅰ型糖尿病和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎有連鎖和關(guān)聯(lián)信號(hào)[4]。隨后他們進(jìn)行了一項(xiàng)大規(guī)模GWAS發(fā)現(xiàn)白癜風(fēng)與已發(fā)現(xiàn)的一些與自身免疫病相關(guān)的基因有顯著關(guān)聯(lián)性。這些基因包括：基因編碼MHCⅠ、Ⅱ類分子，PTPN22，LPP，IL2RA，UBASH3A，C1QTNF6以及兩個(gè)跟免疫相關(guān)的位點(diǎn)：RERE和GZMB，以及酪氨酸酶基因（TYR）[12]。更深層的高加索人群GWAS研究數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)了與其他候選基因TSLP，XBP1，F(xiàn)OXP3，F(xiàn)OXP1也有關(guān)聯(lián)，以及在6q27上CCR6的變異。在6p21.33上的MHC內(nèi)部，與TAP1-PSMB8的關(guān)聯(lián)似乎源于在MHC一類和二類區(qū)域的連鎖不平衡[5]。 在2012年此研究組進(jìn)行了后續(xù)的GWAS和一項(xiàng)獨(dú)立的驗(yàn)證試驗(yàn)。同時(shí)他們還完成了包含3187個(gè)病例和6723個(gè)對(duì)照的meta分析，并發(fā)現(xiàn)13個(gè)跟白癜風(fēng)有關(guān)的位點(diǎn)，包括OCA2-HERC2，MC1R，TYR附近的一個(gè)區(qū)域，IFIH1，CD80，CLNK，BACH2，SLA，CASP7，CD44，IKZF4，SH2B3和TOB2[11]。2）另一項(xiàng)重要的白癜風(fēng)GWAS研究是源自中國(guó)漢族人群的。張等人主持了一項(xiàng)中國(guó)人群白癜風(fēng)GWAS，發(fā)現(xiàn)位于MHC區(qū)域的兩個(gè)獨(dú)立的強(qiáng)關(guān)聯(lián)信號(hào)：rs11966200和rs9468925。其中rs11966200反映了與HLA-A*3001，HLA-B*1302，HLA-C*0602，HLA-DRB1*0701等位基因的關(guān)聯(lián)，而rs9468925代表了一個(gè)先前未知的HLA易感等位基因。同時(shí)他們還發(fā)現(xiàn)先前的研究中未描述過的位點(diǎn)位于6q27區(qū)域，包含三個(gè)基因RNASET2，F(xiàn)GFR1OP和CCR6[21]。2012年唐等進(jìn)行了一項(xiàng)關(guān)聯(lián)分析研究，發(fā)現(xiàn)了3個(gè)白癜風(fēng)易感位點(diǎn)： 12q13.2的rs10876864，11q23.3的rs638893和10q22.1的rs1417210。同時(shí)證實(shí)了3個(gè)先前已經(jīng)報(bào)道的位點(diǎn)3q28，10p15.1和22q12.3。其中12q13.2和 11q23.3還被證實(shí)與其他自身免疫病如Ⅰ型糖尿病和系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)。這些結(jié)果為白癜風(fēng)發(fā)病機(jī)制提供了新視野，同時(shí)也強(qiáng)調(diào)了在基因水平上中國(guó)人群與高加索人群的相同與不同[25]。Spritz的研究組報(bào)道了一個(gè)以發(fā)病年齡為研究點(diǎn)的白癜風(fēng)GWAS，發(fā)現(xiàn)位于MHC2類區(qū)域的數(shù)量性狀基因座與發(fā)病年齡相關(guān)，鄰近c(diǎn)6orf10-BTNL2（另一個(gè)與泛發(fā)型白癜風(fēng)易感性相關(guān)的區(qū)域）。相反在其他與白癜風(fēng)易感性相關(guān)的MHC或非MHC位點(diǎn)，均未發(fā)現(xiàn)與發(fā)病年齡相關(guān)。這些研究強(qiáng)調(diào)了基因在參與白癜風(fēng)易感性與發(fā)病年齡方面扮演的不同的角色[13]。GWAS方法已經(jīng)發(fā)現(xiàn)許多參與白癜風(fēng)發(fā)病的基因，特別是6p21.3上MHC區(qū)域內(nèi)，在高加索人群中Ⅰ類區(qū)域中的HLA-A*02和Ⅱ類區(qū)域中的HLA-DRB1*04[12]最為顯著，但在中國(guó)漢族人群中，與之相關(guān)聯(lián)的信號(hào)位于Ⅲ類區(qū)域 [21]。

綜上，白癜風(fēng)的遺傳學(xué)研究已進(jìn)入了一個(gè)新階段，各種易感基因的發(fā)現(xiàn)為白癜風(fēng)發(fā)病機(jī)制的闡明奠定了基礎(chǔ)，也為白癜風(fēng)的預(yù)防和治療指引了方向。然而上述的途徑只是發(fā)現(xiàn)一些白癜風(fēng)的易感基因，仍需利用更先進(jìn)的技術(shù)和途徑來進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)更多的基因及探尋其與白癜風(fēng)發(fā)病的關(guān)系。

參考文獻(xiàn)：

[1] Alkhateeb A等.高加索人群白癜風(fēng)和相關(guān)自身免疫疾病的流行病學(xué)[J].色素細(xì)胞研究，2003；16：208-14

[2] Alkhateeb A等.自身免疫性疾病的易感基因定位于染色體1p31.3-p32.2[J].坎摩爾遺傳學(xué)，2002；11：661-7

[3] Alkhateeb A等.常染色體顯性遺傳白癜風(fēng)在FOXD3黑色素母細(xì)胞發(fā)育調(diào)控基因候選功能啟動(dòng)子變異[J].皮膚病研究，2005；125，388-391

[4] Birlea SA等.孤立的歐洲人群白癜風(fēng)全基因組關(guān)聯(lián)分析發(fā)現(xiàn)IDDM8附近的SMOC2[J].皮膚病研究，2010；130：798-803

[5] Birlea SA等.尋常型白癜風(fēng)候選基因綜合關(guān)聯(lián)分析發(fā)現(xiàn)XBP1，F(xiàn)OXP3和TSLP[J].皮膚病研究，2011；131：371-381

[6] Birlea SA等.CTLA4和尋常型白癜風(fēng)：兩個(gè)遺傳關(guān)聯(lián)研究和meta分析[J].色素細(xì)胞與黑色素瘤研究，2009；22：230-234

[7] Casp CB等.LMP/TAP基因群與自身免疫疾病相關(guān)的白癜風(fēng)相關(guān)[J].基因免疫，2003；4：492-9

[8] Chen JJ等.中國(guó)人群全基因組基因連鎖分析在4q13-q21區(qū)域發(fā)現(xiàn)白癜風(fēng)易感基因[J].美國(guó)人類遺傳學(xué)，2005；76：1057-1065

[9] Fain PR等.尋常型白癜風(fēng)全基因組掃描：證實(shí)1p31上的AIS1同時(shí)發(fā)現(xiàn)其他易感基因[J]. 美國(guó)人類遺傳學(xué)，2003；72：1560-4

遺傳學(xué)研究范文2

關(guān)鍵詞：表觀遺傳學(xué)；中醫(yī)藥；DNA甲基化；組蛋白修飾；miRNA調(diào)控；綜述

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2016.01.035

中圖分類號(hào)：R2-05 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1005-5304（2016）01-0134-03

Application of Epigenetics in TCM Research CHENG Xi-hua， RAO Chun-mei， YU Rong， REN Ting （Hunan University of Chinese Medicine， Changsha 410208， China）

Abstract： Epigenetics change has been considered to be the most promising new strategy for disease control and prevention. TCM regulates gene expression through epigenetics， participating in pathological and physiological process including cell apoptosis， proliferation， differentiation， cell cycle regulation， immunity， inflammation， and metabolism. This article reviewed the application of DNA methylation， histone modification and the miRNA regulation in TCM research.

Key words： epigenetics； TCM； DNA methylation； histone modification； miRNA regulation； review

表觀遺傳學(xué)由Waddington CH[1]于1942年作為后生論和遺傳學(xué)的合詞而提出。1975年，Holliday R對(duì)表觀遺傳學(xué)進(jìn)行了較為準(zhǔn)確地描述，認(rèn)為表觀遺傳學(xué)不僅在發(fā)育過程中，還在成體階段研究可遺傳的基因表達(dá)改變，這些信息可經(jīng)有絲分裂、減數(shù)分裂在細(xì)胞和個(gè)體間世代傳遞[2]。2008年的冷泉港會(huì)議達(dá)成了關(guān)于表觀遺傳學(xué)的共識(shí)，即“染色體的改變所引起的穩(wěn)定的可遺傳的表現(xiàn)型，而非DNA序列改變”[2]。表觀遺傳學(xué)研究?jī)?nèi)容主要包括兩類：一類為基因選擇性轉(zhuǎn)錄表達(dá)的調(diào)控，有DNA甲基化、基因印記、組蛋

白共價(jià)修飾和染色質(zhì)重塑；另一類為基因轉(zhuǎn)錄后的調(diào)控，包括基因組中非編碼RNA、miRNA、反義RNA、內(nèi)含子及核糖開關(guān)等。表觀遺傳學(xué)應(yīng)用于中醫(yī)藥研究，則集中于DNA甲基化、組蛋白共價(jià)修飾和miRNA領(lǐng)域。茲將近年來的相關(guān)研究總結(jié)如下。

1 表觀遺傳學(xué)與中醫(yī)證候

表觀遺傳學(xué)是中醫(yī)證候多樣性的部分物質(zhì)基礎(chǔ)。牟氏等[3]對(duì)糖尿病腎病人群不同體質(zhì)類型、不同證候及其與轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF）-β1基因T869C多態(tài)性的內(nèi)在關(guān)聯(lián)及其交互作用進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)糖尿病腎病的部分體質(zhì)和TGF-β1基因T869C多態(tài)性有相關(guān)性。對(duì)糖尿病腎病患者的證候與TGF-β1基因T869C多態(tài)性進(jìn)行二分類logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，無相關(guān)證候進(jìn)入回歸模型。說明與證候的動(dòng)態(tài)性和受后天環(huán)境因素影

響較大有關(guān)，因此認(rèn)為表觀遺傳學(xué)在探究中醫(yī)證候?qū)嵸|(zhì)中應(yīng)具有重要地位[4]。劉氏等[5]研究了急性髓系白血病各證型患者ID4基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化陽性率，由低到高依次為氣陰兩虛證、瘀血痰結(jié)證和毒熱熾盛證，表明證型與表觀遺傳學(xué)變化存在一定聯(lián)系。曾氏等[6]發(fā)現(xiàn)，腎陽虛組血漿中免疫相關(guān)基因FHIT、MAP2K6基因CpG島甲基化水平高于健康組，WNT5B、FRAT2、CSNK1D基因CpG島甲基化水平低于健康組，說明以上基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)與腎陽虛證相關(guān)。顏氏等[7]報(bào)道，hsa-miR-18a上調(diào)和hsa-miR-99b下調(diào)可能與陰虛火旺型口腔扁平苔蘚發(fā)生相關(guān)。

2 DNA甲基化

DNA的甲基化是基因組DNA的一種主要表觀遺傳修飾形式。在脊椎動(dòng)物中，DNA啟動(dòng)子區(qū)CpG島成簇狀存在，是DNA發(fā)生甲基化的主要位點(diǎn)，所以，研究DNA甲基化常與CpG島相關(guān)聯(lián)，目前對(duì)DNA啟動(dòng)子區(qū)CpG島異常甲基化的研究是表觀遺傳學(xué)的一個(gè)熱點(diǎn)。血府逐瘀膠囊、四季三黃膠囊及其聯(lián)合應(yīng)用均具有降低血清三酰甘油水平、穩(wěn)定動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的作用，其機(jī)制可能與提高血清中DNA甲基化水平和DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶（DNMTs）水平有關(guān)[8]。納米脂質(zhì)體槲皮素下調(diào)DNMTs1和組蛋白脫乙酰化酶1表達(dá)，降低p16INK4α甲基化水平，通過表觀遺傳核因子κB（NF-κB）信號(hào)途徑而下調(diào)角質(zhì)形成細(xì)胞增殖的NF-κB和白細(xì)胞介素（IL）-6炎癥因子的表達(dá)[9]。黃氏等[10]用不同濃度白藜蘆醇孵育體外培養(yǎng)的人胃癌SGC-7901細(xì)胞，結(jié)果白藜蘆醇能以劑量依賴性方式抑制SGC-7901細(xì)胞增殖，隨著濃度的增加，RASSF1A甲基化的水平逐漸減弱，非甲基化水平逐漸增多；同時(shí)，RASSF1A的mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯上調(diào)。提示白藜蘆醇對(duì)甲基化水平的調(diào)節(jié)可能是其抗癌的重要因素。郭氏[11]研究表明，消痰散結(jié)方能有效抑制胃癌細(xì)胞系及裸鼠原位移植瘤生長(zhǎng)，其機(jī)制與逆轉(zhuǎn)抑癌基因p16甲基化水平、增加p16 mRNA表達(dá)水平有關(guān)。林氏等[12]采用8.4%的益腎方劑和15.2%的健脾方劑處理生理性腎虛小鼠，顯示益腎健脾方劑能明顯提高生理性腎虛小鼠肝細(xì)胞DNA甲基化酶的活力，具有延緩衰老的作用，為從分子生物的角度探討中醫(yī)益腎健脾延緩衰老的機(jī)理提供了客觀依據(jù)。多數(shù)研究表明，中藥調(diào)節(jié)DNA甲基化，治法多屬于補(bǔ)腎填精、益氣健脾活血、化痰散結(jié)等方面[12]。

3 組蛋白修飾

組蛋白的去乙酰化與基因的失活相關(guān)，乙酰化轉(zhuǎn)移酶主要是在組蛋白H3、H4的N端尾上的賴氨酸加上乙酰基，去乙酰化酶則相反，不同位置的修飾均需要特定的酶來完成。乙酰化酶家族可作為輔激活因子調(diào)控轉(zhuǎn)錄，調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，參與DNA損傷修復(fù)，還可作為DNA結(jié)合蛋白。去乙酰化酶家族則和染色體易位、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、基因沉默、細(xì)胞周期、細(xì)胞分化和增殖及細(xì)胞凋亡相關(guān)[13]。白藜蘆醇及其衍生物能直接激活去乙酰化酶SIRT1，促使轉(zhuǎn)錄因子FOXO3a與過氧化物酶體增殖活化受體γ共激活因子-1α（PGC-1α）活化[14]。在小鼠動(dòng)物模型中，白藜蘆醇誘導(dǎo)SIRT1活化，激活PGC-1α與蛋白激酶AMPK，減少類胰島素1增長(zhǎng)因子表達(dá)與提高機(jī)體對(duì)胰島素的敏感性，通過增強(qiáng)線粒體氧化磷酸化和有氧代謝能力，增加機(jī)體的能量消耗，延長(zhǎng)小鼠壽命。提示白藜蘆醇起著類似減少熱量飲食或節(jié)食的功效[15]。姜黃素處理新牛鼠心肌細(xì)胞后，姜黃素抑制GATA4、肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2C和Nkx2.5表達(dá)，可能機(jī)制是這些基因啟動(dòng)子區(qū)域組蛋白乙酰化修飾狀態(tài)降低導(dǎo)致染色質(zhì)構(gòu)型緊密，不利于轉(zhuǎn)錄因子及其他相關(guān)元件與啟動(dòng)子的結(jié)合，從而抑制了基因的表達(dá)[16]。有研究者用文獻(xiàn)信息學(xué)方法，發(fā)現(xiàn)在眾多方藥中，補(bǔ)藥主要針對(duì)組蛋白修飾發(fā)揮功效[17]。

4 miRNA調(diào)控

miRNAs（MicroRNAs）是在真核生物中發(fā)現(xiàn)的一類內(nèi)源性的具有調(diào)控功能的非編碼RNA，其大小長(zhǎng)約20～25個(gè)核苷酸[18]。Ma YN等[19]對(duì)益髓生血顆粒一些純化的組分進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)大黃素能促進(jìn)K562細(xì)胞內(nèi)CD235a和CD71及α-、ε-和γ-珠蛋白的表達(dá)，并能通過下調(diào)miR-221和miR-222的表達(dá)水平調(diào)控紅細(xì)胞分化。說明地中海貧血相關(guān)miRNA的研究能從一個(gè)側(cè)面揭示中醫(yī)藥治療相關(guān)疾病的分子機(jī)制。白藜蘆醇具有抗癌活性，基因芯片分析非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇處理后71個(gè)miRNAs表達(dá)異常，其潛在靶基因分別參與細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期、細(xì)胞增殖和分化的調(diào)控[20]。白藜蘆醇也能上調(diào)免疫細(xì)胞如THP-1單核細(xì)胞miR-663的表達(dá)，通過miRNA起著抗炎的作用[21]。迄今為止，中醫(yī)藥調(diào)控miRNA及其相關(guān)基因多局限于姜黃素、白藜蘆醇、大豆異黃酮、丹參酮ⅡA、人參皂苷、延胡索總生物堿等中藥活性成分，而復(fù)方研究尚少。鑒于miRNA在中醫(yī)藥研究中的重要地位，其為中醫(yī)藥理論的發(fā)展提供了新的切入點(diǎn)[22]。

5 其他

盧氏等[23]認(rèn)為，開展DNA甲基化、組蛋白修飾等表觀遺傳學(xué)調(diào)控及其相應(yīng)調(diào)控蛋白酶研究，對(duì)于深入闡述針灸“理、法、方、穴、術(shù)”的物質(zhì)基礎(chǔ)具有積極意義。miRNA與靶基因之間的動(dòng)態(tài)平衡關(guān)系與中醫(yī)的陰陽平衡思想不謀而合。以miRNA及其調(diào)控網(wǎng)絡(luò)為切入點(diǎn)，結(jié)合病證結(jié)合、方證對(duì)應(yīng)的臨床研究模式，獲取相關(guān)證候及方劑起效前后的miRNA表達(dá)譜，進(jìn)而尋找相關(guān)靶基因及其細(xì)胞分子網(wǎng)絡(luò)，將為闡明中醫(yī)治病求本的機(jī)制提供新的視角，對(duì)中醫(yī)理論的發(fā)展具有重要意義[24]。

6 展望

表觀遺傳學(xué)的改變已被認(rèn)為是最有前途的疾病防治新戰(zhàn)略。中醫(yī)藥通過表觀遺傳學(xué)調(diào)控基因表達(dá)，參與細(xì)胞凋亡、增殖、分化、細(xì)胞周期調(diào)控、免疫、炎癥及代謝等病理生理過程。但中醫(yī)藥調(diào)控表觀遺傳學(xué)的研究尚處于初期和不完善階段。目前研究主要集中在腫瘤領(lǐng)域，且多為甲基/去甲基化酶、乙酰/去乙酰化酶表達(dá)差異，基因的啟動(dòng)子甲基化、乙酰化調(diào)控，miRNA表達(dá)差異等方面，研究深度和系統(tǒng)性待提高。

表觀遺傳學(xué)DNA序列不變而功能可變與中醫(yī)“同病異治”“異病同治”有很強(qiáng)的結(jié)合點(diǎn)。同一疾病的發(fā)生可能與不同甲基化或乙酰化調(diào)控相關(guān)，而不同疾病的發(fā)生可能受同一甲基化或乙酰化調(diào)控。另外，中醫(yī)整體觀念強(qiáng)調(diào)自然環(huán)境對(duì)機(jī)體的不可分割性與表觀遺傳受環(huán)境影響、陰陽相互轉(zhuǎn)化與表觀遺傳抗逆性均有高度一致性。

表觀遺傳學(xué)具有可遺傳、可逆性的特點(diǎn)，可通過相互作用，多途徑、多層次影響和調(diào)控遺傳基因的功能和特性。該特點(diǎn)與中醫(yī)藥治療疾病的整體性、綜合性、多靶點(diǎn)性等具有很大相似性。表觀遺傳學(xué)方法的出現(xiàn)，將為中藥有效性的研究提供新方法，進(jìn)一步豐富中醫(yī)藥理論，促進(jìn)中西醫(yī)結(jié)合理論的發(fā)展。

參考文獻(xiàn)：

[1] WADDINGTON C H. The epigenotype[J]. Endeavour，1942，1：18-20.

[2] LEDFORD H. Language：Disputed definitions[J]. Nature，2008， 455（7216）：1023-1028.

[3] 牟新，趙進(jìn)喜，劉文洪，等.試論糖尿病腎病中醫(yī)體質(zhì)易感性和證候多樣性[J].中華中醫(yī)藥雜志，2010，25（11）：1771-1773.

[4] MOU XIN， LIU WEN-HONG， ZHOU DAN-YANG， et al. Association of Chinese medicine constitution susceptibility to diabetic nephropathy and TGF-β1（T869C） gene polymorphism[J]. Chinese Journal of Integrative Medicine，2011，17（9）：680-684.

[5] 劉菲，徐瑞榮.急性髓系白血病中醫(yī)證型與ID4基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化相關(guān)性研究[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2012，32（4）：471-473.

[6] 曾躍琴，李煒弘，張?zhí)於穑?腎陽虛證免疫相關(guān)基因CPG島調(diào)控機(jī)制研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2013，24（6）：1515-1517.

[7] 顏家渝，曾潔萍，黃映紅.陰虛火旺型口腔扁平苔蘚差異表達(dá)miRNAs靶基因分析[J].成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，34（2）：77-79.

[8] 趙偉峰，周明學(xué)，王綠婭，等.活血解毒中藥對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化小鼠斑塊穩(wěn)定性、血脂及DNA甲基化水平的影響[J].北京中醫(yī)藥，2014，33（3）：215-218.

[9] 郭曉瑞，李紅文，鄭乃剛，等.槲皮素下調(diào)人角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)NF-κB和IL-6表達(dá)的表觀遺傳學(xué)修飾效應(yīng)[J].中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志，2013， 27（10）：977-981.

[10] 黃明明，蔡衛(wèi)東，劉永輝.白藜蘆醇對(duì)胃癌細(xì)胞Ras相關(guān)結(jié)構(gòu)域家族1A基因甲基化及表達(dá)的影響[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2011，17（18）：21-22.

[11] 郭維.消痰散結(jié)方對(duì)胃癌P16基因甲基化的影響[D].上海：第二軍醫(yī)大學(xué)醫(yī)院，2010.

[12] 林一萍，陳比特，陳玉春.DNA甲基化酶與中醫(yī)抗衰老機(jī)理的關(guān)系[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，1999，6（6）：18-19.

[13] PHAM T X， LEE J. Dietary regulation of histone acetylases and deacetylases for the prevention of metabolic diseases[J]. Nutrients，2012，4（12）：1868-1886.

[14] HUBBARD B P， GOMES A P， DAI H， et al. Evidence for a common mechanism of SIRT1 regulation by allosteric activators[J]. Science，2013，339（6124）：1216-1219.

[15] BAUR J A， PEARSON K J， PRICE N L， et al. Resveratrol improves health and survival of mice on a high-calorie diet[J]. Nature，2006，444（7117）：337-342.

[16] 孫慧超，朱靜，呂鐵偉，等.姜黃素對(duì)小鼠心臟發(fā)育相關(guān)基因表達(dá)的影響及其表觀遺傳調(diào)控機(jī)制[J].基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床，2011，31（9）：959-964.

[17] HSIEH H Y， CHIU P H， WANG S C. Epigenetics in traditional Chinese pharmacy：a bioinformatic study at pharmacopoeia scale[J]. Evid Based Complement Alternat Med，2011，2011：816714.

[18] KALA R， PEEK G W， HARDY T M， et al. MicroRNAs：an emerging science in cancer epigenetics[J]. J Clin Bioinforma，2013，3（1）：6-11.

[19] MA Y N， CHEN M T， WU Z K， et al. Emodin can induce K562 cells to erythroid differentiation and improve the expression of globin genes[J]. Mol Cell Biochem，2013，382（1/2）：127-136.

[20] BAE S， LEE E M， CHA H J， et al. Resveratrol alters microRNA expression profiles in A549 human non-small cell lung cancer cells[J]. Mol Cells，2011，32（3）：243-249.

[21] TILI E， MICHAILLE J J， ADAIR B， et al. Resveratrol decreases the levels of miR-155 by upregulating miR-663， a microRNA targeting JunB and JunD[J]. Carcinogenesis，2010，31（9）：1561-1566.

[22] 鄭思道，吳紅金，劉宇娜.microRNA在現(xiàn)代中醫(yī)藥研究中的作用和意義[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2012，10（7）：857-860.

[23] 盧圣烽，徐斌，于美玲，等.表觀遺傳學(xué)在中醫(yī)針灸研究中的應(yīng)用探討[J].南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，29（2）：105-108.

[24] 虞桂，王階.miRNA及其調(diào)控網(wǎng)絡(luò)與中醫(yī)治病求本機(jī)制研究[J].中華中醫(yī)藥雜志，2012，27（11）：2789-2791.

遺傳學(xué)研究范文3

[關(guān)鍵詞] 馬方綜合征；分子遺傳學(xué)；基因檢測(cè)；研究進(jìn)展

[中圖分類號(hào)] R596 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2016）04（c）-0015-04

Recent molecular genetics research progress in Marfan syndrome

LI Bao-zhu SHU Xiao-rong CHEN Ren-hua WANG Jing-feng

Department of Cardiology，Sun Yat-Sen Memorial Hospital of Sun Yat-Sen University，Guangzhou 510120，China

[Abstract] Marfan syndrome（MFS） is an autosomal dominantly inherited connective tissue disorder characterized by ocular，skeletal manifestations and cardiovascular.The severe cardiovascular complications are the main lethal factors in patients with MFS.The study found that original fibrin（FBN） and transforming growth factor beta receptor（TGFBR） gene families are the main mutations in MFS.This paper reviews the main mutant genes，detection methods of mutation，correlation of genotype and phenotype，diagnosis and therapy of MFS in the future.

[Key words] Marfan syndrome；Molecular genetics；Gene detection；Research progress

馬方綜合征（Marfan syndrome，MFS）亦稱為先天性中胚層發(fā)育不良、蜘蛛指征、肢體細(xì)長(zhǎng)癥、Marchesani綜合征，是一種以結(jié)締組織為基本缺陷的遺傳性疾病，具有基因多態(tài)性和多種臨床表征，發(fā)病率為0.2‰～0.3‰。MFS主要表現(xiàn)為周圍結(jié)締組織營(yíng)養(yǎng)不良、內(nèi)眼疾病、骨骼異常和心血管異常[1]，病變有時(shí)也累及皮膚、肺部及硬腦脊膜等器官[2-5]，癥狀主要有骨骼過長(zhǎng)，晶狀體異位，主動(dòng)脈瓣反流和較嚴(yán)重的新生兒馬方綜合征等。現(xiàn)就MFS的突變基因家族、突變基因的檢測(cè)方法、基因型與表型的相關(guān)性及后續(xù)展望作如下綜述。

1 突變基因家族

現(xiàn)如今已發(fā)現(xiàn)8種涉及MFS的基因，共3843種基因突變體（表1）。目前，研究最多的和引起MFS發(fā)病的主要突變基因家族是原纖維蛋白（the original fibrin，F(xiàn)BN）基因家族和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體（transforming growth factor beta receptor，TGFBR）基因家族。

1.1 FBN基因家族與MFS

1986年，Sakai等[6-7]發(fā)現(xiàn)一種作為微纖維蛋白重要組成部分的細(xì)胞外基質(zhì)糖蛋白，將其命名為FBN。其在細(xì)胞外基質(zhì)以聚合體形式形成微纖維蛋白，存在于骨骼、眼睛、血管壁等人體彈性和非彈性組織中。1990年，Hollister等[8]通過FBN單克隆抗體，發(fā)現(xiàn)了MFS患者微纖維蛋白系統(tǒng)的異常。1991年，Magenis等[9]應(yīng)用原位雜交技術(shù)，成功定位并克隆了FBN基因，并首次檢測(cè)到2例MFS患者的原纖維蛋白基因1（the original fibrin 1，F(xiàn)BN1）基因突變。

MFS患者常伴有彈性組織中無定形基質(zhì)聚集和彈性纖維斷裂現(xiàn)象，研究發(fā)現(xiàn)，基質(zhì)原纖維蛋白-1（fibrillin-1，F(xiàn)BN-1）是參與這一發(fā)病機(jī)制的重要因素[6]，F(xiàn)BN1是最早發(fā)現(xiàn)、最常見且突變體最多的MFS致病基因。FBN1位于15號(hào)染色體長(zhǎng)臂（15q15-q21.1），含有65個(gè)外顯子，長(zhǎng)230 kb，轉(zhuǎn)錄大小為10 kb的mRNA，翻譯為2871個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)（表2）[9]。

表2 FBN1基因的突變類型及數(shù)量

目前為止，已發(fā)現(xiàn)FBN1基因突變3077種，記錄于FBN1 mutations databate（http：//umd.be/FBN1/）。FBN1突變可發(fā)生于基因的任何區(qū)域，無明顯突變熱點(diǎn)，只有約12%的突變基因有可重現(xiàn)性，由此給基因篩查突變?cè)黾恿穗y度[10]。基因分為編碼區(qū)和非編碼區(qū)，F(xiàn)BN1基因編碼區(qū)突變約占總突變的80%，非編碼區(qū)突變約占總突變的20%。常見編碼區(qū)突變有移碼突變、錯(cuò)義突變和無義突變，移碼突變和錯(cuò)義突變約占編碼突變的80%，無義突變約占編碼突變的20%。無義突變導(dǎo)致的終止密碼子的提前出現(xiàn)，使得突變轉(zhuǎn)錄子被一種RNA監(jiān)視機(jī)制所降解，進(jìn)而導(dǎo)致翻譯的蛋白量?jī)H為正常的50%，且翻譯所得異常蛋白單體干擾正常蛋白單體的聚合[11-12]。這些無義突變可以導(dǎo)致MASS癥狀，包括近視、二尖瓣脫垂、主動(dòng)脈根部膨大、骨骼皮膚異常等[13]。非編碼區(qū)突變主要發(fā)生在剪接位點(diǎn)，保守區(qū)剪接位點(diǎn)突變約占20%。剪接位點(diǎn)突變易引起內(nèi)含子內(nèi)假外顯子的出現(xiàn)、內(nèi)含子保留、隱蔽剪接位點(diǎn)激活和外顯子跳躍等剪接錯(cuò)誤，蛋白結(jié)構(gòu)域的錯(cuò)誤和缺失會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的臨床病癥出現(xiàn)[14]。

FBN1突變雖然沒有區(qū)域特異性，但外顯子57和65發(fā)生突變較少，外顯子13、26和27發(fā)生突變較多[15]。FBN1基因突變最常見的類型是點(diǎn)突變，約占所有突變的73%，其中，錯(cuò)義突變約占59%，無義突變約占14%。FBN1的突變可引起多組織器官的病變，如心血管、顱面部、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、肺部、眼部、骨骼和皮膚等。

1.2 TGFBR基因家族與MFS

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）家族介導(dǎo)的信息傳遞控制著細(xì)胞繁殖、分化和凋亡等多種程序。2004年，一個(gè)具有與MFS部分相似臨床癥狀的患者，在排除FBN1和FBN2基因變異后，發(fā)現(xiàn)其家系中編碼轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體2（transforming growth factor β receptor 2，TGFBR2）的基因染色體發(fā)生斷裂[16]。具有與MFS相似的骨骼和心血管表現(xiàn)，且TGFBR基因家族發(fā)生突變的綜合征被稱為MFS 2型[17]。此類MFS具有與細(xì)胞外基質(zhì)TGF-β信息傳遞相關(guān)的結(jié)締組織疾病，從而導(dǎo)致致命的主動(dòng)脈并發(fā)癥。通過新型藥物對(duì)MFS患者TGF-β信息傳遞功能進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整，也許可以維持患者的健康心血管狀態(tài)或者延遲致命病變[18-19]。

2 突變基因的檢測(cè)方法

MFS患者癥狀表現(xiàn)呈多樣性，主要表現(xiàn)為晶狀體異位、骨骼過長(zhǎng)、主動(dòng)脈瓣反流等。目前，MFS的臨床診斷依然主要依據(jù)1996年制定的Ghent診斷標(biāo)準(zhǔn)，該診斷包括對(duì)骨骼、眼部和心血管三個(gè)主要系統(tǒng)的診斷以及皮膚、肺和硬腦脊膜等次要系統(tǒng)的診斷。由于MFS發(fā)病癥狀與年齡密切相關(guān)，有些患者嬰兒和（或）兒童時(shí)期并未表現(xiàn)出癥狀，且很多患者并不符合診斷標(biāo)準(zhǔn)，因此，MFS基因診斷在輔助臨床診斷方面起到至關(guān)重要的作用。MFS檢出率主要受其臨床診斷正確性、基因突變類型、臨床基因檢測(cè)方法和水平的影響。臨床基因檢測(cè)MFS時(shí)，通常檢測(cè)FBN1基因序列的突變情況，MFS患者FBN1基因突變檢出率占73%～90%。

目前，突變基因的常用檢測(cè)方法有變性高效液相色譜分析（denaturing high performance liquid chromatograph，DHPLC）、變性梯度凝膠電泳（denaturing gradi-ent gel electrophoresis，DGGE）、限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析（restriction fragment length polymorphism，RFLP）、構(gòu)象敏感凝膠電泳（conformation sensitive gel electrophoresis，CSGE）、單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析（single-strand conformation polymorphism，SSCP）、高分辨率溶解曲線（high resolution melting cure，HRM）、多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)（multiplex ligation-dependent probe amplification，MLPA）和直接測(cè)序等。

DHPLC檢測(cè)具有自動(dòng)化、高通量、高靈敏度、高特異性、檢測(cè)速度快和價(jià)格低廉等特點(diǎn)，適用于基因突變的大規(guī)模篩查，檢測(cè)未知單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism，SNP）可達(dá)到95%以上。DGGE法檢測(cè)對(duì)各種突變特別是點(diǎn)突變較敏感，檢測(cè)時(shí)無需標(biāo)記，并且?guī)缀蹩梢詸z測(cè)出所有突變，但無法確定突變位置，DN段大小限制在100～500 bp，需要專門設(shè)備檢測(cè)且需要計(jì)算機(jī)對(duì)序列進(jìn)行分析。RFLP法可用于證實(shí)患者的突變位點(diǎn)，為產(chǎn)前診斷提供確切診斷依據(jù)。DGGE、RFLP、CSGE和SSCP等方法的基因突變檢出率為60%～90%，且檢測(cè)過程相對(duì)繁瑣。HRM檢測(cè)無需基因序列特異性探針，不受堿基位點(diǎn)的局限，可以同時(shí)檢出已知或未知突變與SNP，靈敏度和精確度高達(dá)100%。但是HRM需專業(yè)儀器，技術(shù)要求高，反應(yīng)條件摸索費(fèi)時(shí)費(fèi)力。MLPA法可以用于拷貝數(shù)異常的檢測(cè)。直接測(cè)序法價(jià)格相對(duì)較貴，不適合大樣本基因突變篩查，但可以確定突變基因位點(diǎn)和類型，是突變檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)。

基因cDNA序列篩查突變基因，不僅可以檢測(cè)整個(gè)編碼區(qū)基因突變，還可以檢測(cè)基因剪接位點(diǎn)的突變。cDNA篩查方法檢測(cè)FBN1基因突變的檢出率達(dá)90%。應(yīng)用CSGE、DHPLC和直接測(cè)序等方法不僅可以檢測(cè)基因組DNA（genomic DNA，gDNA）中的突變基因，還可以檢測(cè)導(dǎo)致RNA快速降解的基因。gDNA篩查方法檢測(cè)FBN1基因突變的檢出率達(dá)70%～93%[15]。MFS基因突變體具有多樣性，作為常規(guī)檢測(cè)MFS的FBN1基因外顯子多、基因大、沒有突變熱點(diǎn)，給突變篩查帶來難度，且突變篩查可能存在假陽性[20-21]。

3 基因型與表型的相關(guān)性

由FBN1基因突變與心血管表型特征相關(guān)性可知，F(xiàn)BN1基因突變主要引起主動(dòng)脈和二尖瓣病變，如主動(dòng)脈擴(kuò)張、主動(dòng)脈夾層、主動(dòng)脈閉鎖不全、二尖瓣反流和二尖瓣脫垂等。而FBN1等位基因的完全缺失并不預(yù)示著溫和表型的出現(xiàn)，且單倍基因劑量不足也可導(dǎo)致典型MFS表型[22]。研究表明，MFS患者的預(yù)后取決于疾病的臨床表現(xiàn)和治療，而不是簡(jiǎn)單地取決于TGFBR2突變的存在與否[23]。TGFBR2基因發(fā)生突變的MFS患者臨床癥狀表現(xiàn)傾向于肢體細(xì)長(zhǎng)和具有心血管疾病，但沒有眼部病癥[17]。MFS表現(xiàn)型復(fù)雜多變，即使同一家系同一等位基因的突變，也會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重程度不同的表型，因此，到目前為止，通過某一特定突變基因推測(cè)其表型還不可能。由此可見，除了突變基因，MFS患者的表型還可能受環(huán)境等其他因素的影響。

4 MFS的主要致死病變及新生兒MFS

患者的致死病變主要在心血管系統(tǒng)，且死亡年齡與心血管病變程度有關(guān)。MFS的心血管疾病病癥主要表現(xiàn)為二尖瓣脫垂、二尖瓣反流、主動(dòng)脈根部擴(kuò)張和主動(dòng)脈瓣反流等，主要危及生命的心血管并發(fā)癥是主動(dòng)脈和主動(dòng)脈夾層動(dòng)脈瘤，約1/3的MFS患者有二尖瓣脫垂和（或）主動(dòng)脈根部擴(kuò)張的并發(fā)癥[24-26]。若不提前干預(yù)治療，病程發(fā)展快且易危及生命。

新生兒MFS病癥往往表現(xiàn)最嚴(yán)重，主要包括指細(xì)長(zhǎng)、手指屈曲性痙攣、胸部畸形、早衰面容、心臟瓣膜反流和鄰近主動(dòng)脈擴(kuò)張等，易導(dǎo)致新生兒因心力衰竭致死[27-28]。FBN1基因24～32外顯子突變被認(rèn)為是導(dǎo)致新生兒MFS的主要突變基因[29]。MFS患者有正常的生育能力，因此，對(duì)家族遺傳性MFS患者及家系成員進(jìn)行基因檢測(cè)，確定突變基因位點(diǎn)，對(duì)于指導(dǎo)患者及其家屬婚育和對(duì)其后代進(jìn)行產(chǎn)前診斷具有十分重要的意義。

5 展望

MFS的發(fā)病機(jī)制尚未清晰，其基因型和表型之間的差異表明環(huán)境等因素可能影響其表型。基因組學(xué)、后基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和環(huán)境基因組學(xué)的研究表明，大多數(shù)疾病由基因突變和環(huán)境因素共同影響所致。因此，通過分子生物學(xué)、遺傳學(xué)和生物信息學(xué)等技術(shù)的應(yīng)用，從基因、蛋白、細(xì)胞、組織、器官、家系和環(huán)境等方面進(jìn)行研究，利于進(jìn)一步確定MFS的發(fā)病機(jī)制和遺傳特征。對(duì)MFS先證者家屬進(jìn)行突變基因單倍型分析和基因檢測(cè)，提前對(duì)MFS患者進(jìn)行干預(yù)治療，不僅可以進(jìn)行提前診斷、減緩病程發(fā)展，還可以為后續(xù)基因治療、藥物靶點(diǎn)治療和組織工程修復(fù)等奠定研究基礎(chǔ)，為臨床新藥應(yīng)用、生物療法和基因療法等提供科學(xué)依據(jù)。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Pyeritz RE，McKusick VA.The Marfan syndrome：diagnosis and management[J].N Engl J Med，1979，300（14）：772-777.

[2] Weir B.Leptomeningeal cysts in congenital ectopia lentis：case report[J].J Neurosurg，1973，38（5）：650-654.

[3] Newman PK，Tilley PJ.Myelopathy in Marfan′s syndrome[J].J Neurol Neurosurg Psychiatry，1979，42（2）：176-178.

[4] Cilluffo JM，Gomez MR，Reese DF，et al.Idiopathic（"congenital"）spinal arachnoid diverticula.Clinical diagnosis and surgical results[J].Mayo Clin Proc，1981，56（2）：93-101.

[5] Yellin A，Shiner RJ，Lieberman Y.Familial multiple bilateral pneumothorax associated with Marfan syndrome[J].Chest，1991，100（2）：577-578.

[6] Sakai LY，Keene DR，Engvall E.Fibrillin，a new 350-kD glycoprotein is a component of extraeellular mierofibrils[J].J Cell Biol，1986，103（6）：2499-2509.

[7] Zhang H，Apfelroth S，Hu W，et al.Structure and expression of fibrillin-2 novel microfibrillar component preferentially located in elastic matrices[J].J Cell Biol，1994，124（5）：855-863.

[8] Hollister DW，Godfrey M，Sakai LY，et al.Immunohistologic abnormalities of the microfibrillar-fiber system in the Marfan syndrome[J].N Engl J Med，1990，323（3）：152-159.

[9] Magenis RE，Maslen CL，Smith L，et al.Localization of the fibrillin（FBN） gene to chromosome 15，band q21.1[J].Genomics，1991，11（2）：346-351.

[10] Collod-Béroud G，Le Bourdelles S，Ades L，et al.Update of the UMD-FBN1 mutation database and creation of an FBN1 polymorphism database[J].Hum Mutat，2003，22（3）：199-208.

[11] Thermann R，Neu-Yilik G，Deters A，et al.Binary specification of nonsense codons by splicing and cytoplasmic translation[J].Embo J，1998，17（12）：3484-3494.

[12] Collod-Béroud G，Boileau C.Marfan syndrome in the third millennium[J].Eur J Hum Genet，2002， 10（11）：673-681.

[13] Dietz HC，McIntosh I，Sakai LY，et al.Four novel FBN1 mutations：significance for mutant transcript level and genotype-phenotype correlation of FBN1 mutations 159 EGF-like domain calcium binding in the pathogenesis of Marfan syndrome[J].Genomics，1993，17（2）：468-475.

[14] Smallridge RS，whiteman P，Werner JM，et al.Solution structure and dynamics of a calcium binding epidermal growth factor-like domain pair from the neonatal region of human fibrillin-1[J].J Biol Chem，2003，278（14），12199-12206.

[15] 崔婉婷，金春蓮.馬方綜合征的基因突變篩查及其應(yīng)用研究[A]//第八次全國(guó)醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議（中華醫(yī)學(xué)會(huì)2009年醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)年會(huì)）論文摘要匯編[C].北京：中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)，2009.

[16] Mizuguchi T，Collod-Béroud G，Akiyama T，et al.Heterozygous TGFBR2 mutations in Marfan syndrome[J].Nat Genet，2004，36（8）：855-860.

[17] Boileau C，Jondeau G，Babron MC，et al.Autosomal dominant Marfan-like connective-tissue disorder with aortic dilat ion and skeletal anomalies not linked to the fibrillin genes[J].Am J Hum Genet，1993，53（1）：46-54.

[18] 方凱，陳玉成，曾智.馬方綜合征分子基因研究進(jìn)展[J].華西醫(yī)學(xué)，2007，22（1）：191-192.

[19] 王雪濤.漢族馬方綜合征患者基因突變及臨床特征的研究[D].福州：福建醫(yī)科大學(xué)，2012.

[20] Mátyás G，De Paepe A，Halliday D，et al.Evaluation and application of denaturing HPLC for mutation detection in Marfan syndrome：Identification of 20 novel mutations and two novel polymorphisms in the FBN1 gene[J].Hum Mutat，2002，19（4）：443-456.

[21] K■rkk■ J，Kaitila I，L■nnqvist L，et al.Sensitivity of conformation sensitive gel electrophoresis in detecting mutations in Marfan syndrome and related conditions[J].J Med Genet，2002，39（1）：34-41.

[22] Hilhorst-Hofstee Y，Hamel BC，Verheij JB，et al.The clinical spectrum of complete FBN1 allele deletions[J].Eur J Hum Genet，2011，19（3）：247-252.

[23] Attias D，Stheneur C，Roy C，et parison of clinical presentations and outcomes between patients with TGFBR2 and FBN1 mutations in Marfan syndrome and related disorders[J].Circulation，2009，120（25）：2541-2549.

[24] Brown OR，DeMots H，Kloster FE，et al.Aortic root dilatation and mitral valve prolapse in Marfan′s syndrome：an ECHOCARDIOgraphic study[J].Circulation，1975，52（4）：651-657.

[25] Pyeritz RE，McKusick VA.The Marfan syndrome：diagnosis and management[J].N Engl J Med，1979，300（14）：772-777.

[26] 高凌根.馬方綜合征與Liddle綜合征分子遺傳學(xué)與臨床研究[D].北京：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院，2011.

[27] Buntinx IM，Willems PJ，Spitaels SE，et al.Neonatal Marfan syndrome with congenital arachnodactyly，flexion contractures，and severe cardiac valve insufficiency[J].J Med Genet，1991，28（4）：267-273.

[28] 牛子儒.馬方綜合征植入前遺傳學(xué)診斷技術(shù)初步研究[D].北京：中國(guó)人民醫(yī)學(xué)院，2013.

遺傳學(xué)研究范文4

[關(guān)鍵詞]先天性小耳畸形；家系；遺傳學(xué)研究

先天性小耳畸形是繼唇、腭裂之后最為常見的面部畸形，也是導(dǎo)致面部不對(duì)稱的最常見先天性畸形。先天性小耳畸形病因尚不明確，遺傳是發(fā)病因素之一，家系是研究遺傳因素的重要資源。我們于2005年9月～2007年3月，通過對(duì)中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院整形外科醫(yī)院住院患者及其家屬家族史的詢問調(diào)查，收集了先天性小耳畸形家系7個(gè)，并進(jìn)行了相關(guān)的遺傳學(xué)研究。

1　材料和方法

1．1　家系收集

1．1．1　先證者一級(jí)親屬中(包括父母、同胞及子代)至少有一人為先天性小耳畸形患者，即家系中至少兩人為先天性小耳畸形患者；對(duì)于所有接受檢查的家系成員告知對(duì)本研究的知情，并在自愿的情況下簽寫知情同意書。

1．1．2　從先證者出發(fā)，追溯家庭成員的親緣關(guān)系，應(yīng)用Cyrillic2.1軟件繪制家系圖譜。

1．1．3　對(duì)于簽寫知情同意書的人員抽取外周血約5ml，用于進(jìn)行細(xì)胞遺傳學(xué)檢測(cè)和制備DNA。

1．2　染色體顯帶檢測(cè)

1．2．1　細(xì)胞培養(yǎng)：取0.3ml肝素鈉抗凝靜脈全血接種于15％小牛血清、適量抗生素和PHA的RPMll640培養(yǎng)基中，放37℃恒溫箱中培養(yǎng)，至36h后加入終濃度為7.3×10mol／ml的秋水仙素，繼續(xù)培養(yǎng)至48h。

1．2．2　染色體制備：用0.075mol／L的Kcl低滲處理兩次，每次10min，3:1甲醇、冰醋酸固定，第1次10min，第2次15～20min，空氣干燥制片。

1．2．3　G顯帶：將制備出的標(biāo)本放于37℃恒溫箱中5～7天，然后用0.025％的胰酶37℃條件下處理15～20s，8％Giemsa常溫下染色20min后鏡檢。

1．3　vrk1基因突變篩查

1．3．1　外周血DNA的提取：常規(guī)苯酚、氯仿抽提DNA。

1．3．2　PCR反應(yīng)：vrkl基因設(shè)計(jì)引物覆蓋了vrkl所有編碼區(qū)和外顯子和內(nèi)含子交界處的引物11對(duì)(外顯子1為非編碼區(qū)故未設(shè)計(jì)引物檢測(cè))。應(yīng)用25μ1的PCR反應(yīng)體系，包含基因組DNA0.5μ1，5U／μ1Ampli Taq polymerase0.5μ1，10xPCR緩沖液2.5μ1，10mmol／L dNTPs1μ1，primer0.5μ1，雙蒸去離子水補(bǔ)足致25μ1。PCR反應(yīng)條件如下：95℃預(yù)變性15min；94℃ 30s，60℃ 30s，72℃ 55s，10個(gè)循環(huán)；94℃ 30s，56℃ 30s，72℃ 45s，22個(gè)循環(huán)；72℃充分延伸5min；4℃保存。取2μ1PCR擴(kuò)增產(chǎn)物用6％聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)擴(kuò)增效果。

1．3．3　測(cè)序：PCR產(chǎn)物經(jīng)純化回收后，進(jìn)行雙向DNA測(cè)序，測(cè)序由TaKaRa寶生物工程(大連)有限公司完成。將測(cè)序結(jié)果與基因庫(kù)中的正常序列進(jìn)行對(duì)比分析。

2　結(jié)果

2．1　先天性小耳畸形家系收集：我們共收集了7個(gè)先天性小耳畸形家系。

2．2　染色體核型檢測(cè)：對(duì)7個(gè)家系的先證者(5男2女)經(jīng)過染色體顯帶技術(shù)的檢查，結(jié)果核型正常，為46XY或46XX，且未發(fā)現(xiàn)有染色體的異常。

2．3　vrk1基因突變檢測(cè)：對(duì)7個(gè)家系先證者的vrk1基因檢測(cè)未發(fā)現(xiàn)存在基因突變。

3　討論

家系在遺傳因素的研究中具有重要作用。目前業(yè)內(nèi)普遍認(rèn)為，找到某一復(fù)雜性狀相似呈單基因遺傳的家系，是克隆復(fù)雜性狀的相關(guān)基因的最佳途徑。正是如此，國(guó)內(nèi)外學(xué)者以及國(guó)內(nèi)外較高級(jí)別的研究資助機(jī)構(gòu)普遍認(rèn)同一個(gè)觀點(diǎn)：找到大家系，即找到人類遺傳的全部所在。疾病家系就是“基因資源”，成為各國(guó)保護(hù)和爭(zhēng)奪的對(duì)象。我國(guó)是一個(gè)擁有豐富的先天性小耳畸形病種資源的大國(guó)，因此，保護(hù)、利用和研究我國(guó)寶貴的遺傳家系是迫在眉睫的工作。

我們利用收集的家系進(jìn)行了細(xì)胞遺傳學(xué)和分子遺傳學(xué)檢測(cè)。絕大多數(shù)先天性小耳畸形的染色體核型檢測(cè)是正常的，但少數(shù)患者出現(xiàn)染色體畸形，目前報(bào)道的包括：5p染色體缺失，6q單體性染色體，8q染色體缺失，18三體，21環(huán)狀染色體，22q缺失，22三體，47XXY。除此以外，還有報(bào)道染色體鑲嵌現(xiàn)象，包括7三體鑲嵌，9三體鑲嵌。我們針對(duì)收集的7個(gè)家系的先證者進(jìn)行的染色體核型檢測(cè)未發(fā)現(xiàn)核型和染色體的異常。

侯選基因(candidate gene approach)結(jié)合基因定位的方法進(jìn)行分子遺傳學(xué)研究，是近幾年隨著人類疾病基因研究的進(jìn)展而發(fā)展起來的一種基因鑒定的方法，是根據(jù)某種遺傳病和特定基因分別定位于染色體的同一區(qū)域，而發(fā)現(xiàn)并鑒定其基因突變，由此定位和克隆基因；也可從疾病的表型出發(fā)，選取表型相似的已知基因，對(duì)其突變進(jìn)行檢測(cè)，研究其致病基因。如在分子遺傳學(xué)研究中能夠靈活運(yùn)用候選基因法，可能會(huì)獲得意想不到的成果。

遺傳學(xué)研究范文5

關(guān)鍵詞：表觀遺傳學(xué) 教學(xué) 研究生

中圖分類號(hào)研究生教育是高等教育的重要組成部分，是培養(yǎng)高素質(zhì)、高層次人才的重要手段。今天的社會(huì)對(duì)研究生的全面素質(zhì)和創(chuàng)新能力提出更高的要求，而專業(yè)課教學(xué)是研究生教育的最基本部分，是提高研究生專業(yè)素質(zhì)和創(chuàng)新能力的直接途徑，因此，提高專業(yè)課教學(xué)水平對(duì)研究生的培養(yǎng)具有十分重要的意義[1]。隨著生物技術(shù)和醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展，知識(shí)更新速度加快，學(xué)科之間相互交叉、相互滲透，邊緣學(xué)科和新興學(xué)科不斷涌現(xiàn)。表觀遺傳學(xué)是近幾年來生命科學(xué)迅速發(fā)展的前沿學(xué)科之一，其理論與技術(shù)已經(jīng)廣泛滲透至生物學(xué)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)及預(yù)防醫(yī)學(xué)的各個(gè)學(xué)科。表觀遺傳學(xué)是我們學(xué)院學(xué)術(shù)型碩士研究生專業(yè)課程和專業(yè)學(xué)位碩士研究生專業(yè)知識(shí)模塊的主干課程。如何適應(yīng)新形勢(shì)下研究生培養(yǎng)的需要，筆者主要針對(duì)研究生表觀遺傳學(xué)教學(xué)談一些自己的看法及建議。

1 教師業(yè)務(wù)素質(zhì)的提高

生物醫(yī)學(xué)模式的轉(zhuǎn)變對(duì)教師的業(yè)務(wù)素質(zhì)和能力提出了相應(yīng)的更高要求。不僅要求教師有生命科學(xué)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)的專業(yè)知識(shí)，而且還要有生物醫(yī)學(xué)理論方面的知識(shí)，同時(shí)要求教師的技術(shù)知識(shí)層次能跟上生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)推廣周期不斷縮短的趨勢(shì)。我們?cè)谘芯可谋碛^遺傳學(xué)教學(xué)中，隨時(shí)進(jìn)行文獻(xiàn)調(diào)研，密切關(guān)注最新高水平期刊和學(xué)術(shù)會(huì)議的相關(guān)信息，不斷補(bǔ)充傳達(dá)的最新知識(shí)。引導(dǎo)學(xué)生關(guān)注當(dāng)前研究活躍的腫瘤、衰老、心血管疾病、感染性疾病與表觀遺傳學(xué)的最新研究進(jìn)展情況，著重介紹營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境、應(yīng)激、細(xì)胞代謝在表觀遺傳變化中的重要作用機(jī)制。這些新知識(shí)非常受研究生的歡迎，引起他們濃厚的興趣。通過這些新知識(shí)的學(xué)習(xí)，不僅開闊了研究生的學(xué)習(xí)視野，啟發(fā)了他們的創(chuàng)新思維，同時(shí)使他們形成良好的文獻(xiàn)調(diào)研和學(xué)術(shù)研討的習(xí)慣，逐步形成和掌握正確的科研方法，為即將開展的課題研究工作奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。在教學(xué)過程中反過來能進(jìn)一步促進(jìn)教師知識(shí)結(jié)構(gòu)的不斷更新，達(dá)到教學(xué)相長(zhǎng)的目的。

2 改革教學(xué)內(nèi)容，形成完整的表觀遺傳學(xué)知識(shí)結(jié)構(gòu)體系

與經(jīng)典遺傳學(xué)以研究基因序列決定生物學(xué)功能為核心相比，表觀遺傳學(xué)主要研究基于染色質(zhì)事件對(duì)于這些“表觀遺傳密碼”的建立和維持的機(jī)制，及其如何決定細(xì)胞的表型和個(gè)體的發(fā)育。在表觀遺傳學(xué)研究生課堂教學(xué)過程中必須具有一定的前瞻性，引導(dǎo)研究生關(guān)注表觀遺傳學(xué)學(xué)科的發(fā)展動(dòng)態(tài)，密切注意學(xué)科的交叉和延伸，緊跟表觀遺傳學(xué)的發(fā)展方向和學(xué)科發(fā)展的突破點(diǎn)。課堂教學(xué)過程中把最主要的精力放在表觀遺傳學(xué)學(xué)科領(lǐng)域發(fā)展最活躍最富潛力的研究方向上，例如表觀遺傳機(jī)制在癌癥等疾病中的作用機(jī)制，細(xì)胞代謝與表觀遺傳變化的關(guān)系等。表觀遺傳學(xué)是生命科學(xué)中一個(gè)普遍而又十分重要的新研究領(lǐng)域。它不僅對(duì)基因表達(dá)、調(diào)控、遺傳有重要作用，而且在腫瘤、免疫、病毒感染復(fù)制等許多疾病的發(fā)生和防治中亦具有十分重要的意義。在教學(xué)過程中主要內(nèi)容包括：表觀遺傳學(xué)概論，DNA甲基化，組蛋白修飾，染色質(zhì)重塑，基因組印記，X染色體失活，siRNA與miRNA介導(dǎo)的調(diào)控，表觀遺傳學(xué)與疾病，表觀遺傳學(xué)與癌癥，天然產(chǎn)物及中草藥的發(fā)展對(duì)表觀遺傳學(xué)的展望，表觀遺傳學(xué)的治療進(jìn)展。上述內(nèi)容形成完整的表觀遺傳學(xué)知識(shí)結(jié)構(gòu)體系。在教學(xué)過程中，通過有選擇地插入一些小型專題講座及相關(guān)的研究歷史背景資料的方式，介紹和強(qiáng)調(diào)學(xué)習(xí)和掌握表觀遺傳學(xué)的重要性，既活躍了課堂，又把課程從枯燥的理論講解中解放出來，同時(shí)激發(fā)了研究生的學(xué)習(xí)積極性，拓寬相關(guān)的知識(shí)面[2]。同時(shí)在教學(xué)過程中注重前沿進(jìn)展內(nèi)容的加入，如代謝、營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境等影響因素與表觀遺傳學(xué)的相關(guān)進(jìn)展。

3 改革教學(xué)方法，培養(yǎng)研究生的創(chuàng)新能力

本課程所授課的對(duì)象是已具備一定自學(xué)能力和學(xué)習(xí)主動(dòng)性的研究生，最重要的是培養(yǎng)他們科學(xué)地發(fā)現(xiàn)并解決問題的能力、準(zhǔn)確表達(dá)個(gè)人思想見解的能力以及科研創(chuàng)新能力。本課堂選課人數(shù)一般在十人左右，因此課堂教學(xué)的特點(diǎn)在于小班授課。由于是小班教學(xué)，增加了教學(xué)的靈活性和增強(qiáng)了師生之間互動(dòng)的可能性，師生之間的交流與溝通增多。因此在教學(xué)過程中采用教師課堂授課、學(xué)生參與研討、學(xué)生講授等多種教學(xué)方式，強(qiáng)調(diào)講授、研論、文獻(xiàn)調(diào)研、學(xué)術(shù)講座、論文報(bào)告、文獻(xiàn)綜述等多種方式并重的原則。在教學(xué)過程中，合理安排時(shí)間，讓研究生充分參與到教學(xué)的研討，結(jié)合自己的研究方向發(fā)表自己獨(dú)特的見解，闡述自己的學(xué)術(shù)觀點(diǎn)，這種教學(xué)方式為研究生迅速進(jìn)入科研工作的角色奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)，增強(qiáng)了研究生創(chuàng)新能力的培養(yǎng)。發(fā)揮現(xiàn)代多媒體技術(shù)在教學(xué)中的重要作用，電子課件與板書相結(jié)合，同時(shí)采用圖片、視頻播放、動(dòng)畫等多種方式的應(yīng)用。倡導(dǎo)啟發(fā)式教育，摒棄灌輸式教學(xué)方法，講授基本理論知識(shí)的同時(shí)注意結(jié)合科研最新進(jìn)展情況拓寬學(xué)生知識(shí)面，加強(qiáng)學(xué)生創(chuàng)新能力的培養(yǎng)，使學(xué)生的理論基礎(chǔ)和實(shí)踐應(yīng)用能力同步得到提高，取得了較好的教學(xué)效果。對(duì)由于受學(xué)時(shí)限制而不能在課堂上詳細(xì)介紹的前沿內(nèi)容可使用討論法，安排學(xué)生課后自學(xué)，啟發(fā)學(xué)生提出問題，通過課堂討論得到解決。還可以在部分單元結(jié)束后，要求研究生根據(jù)自己的專業(yè)方向，結(jié)合查閱最新的文獻(xiàn)資料，撰寫小專題報(bào)告，組織交流討論，以便鞏固學(xué)生所學(xué)知識(shí)，并進(jìn)一步拓寬知識(shí)面。研究生不同于本科生，他們有強(qiáng)烈的求知欲孥，有較高的學(xué)習(xí)熱情，有較強(qiáng)的自學(xué)能力，所以在教學(xué)中倡導(dǎo)自學(xué)，組織討論，是因材施教、培養(yǎng)研究生創(chuàng)新能力的好方法。

4 多種考核方式結(jié)合，檢驗(yàn)教學(xué)效果。

在研究生的考核方面，不僅僅局限于對(duì)課內(nèi)授課內(nèi)容的掌握程度，還可以采用綜述、專題小報(bào)告、PPT匯報(bào)、模擬課題設(shè)計(jì)等綜合考核方式，注重知識(shí)的活學(xué)活用和創(chuàng)新意識(shí)的培養(yǎng)，這樣才有利于研究生即打好廣博、堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)，又能其重組知識(shí)框架，只有這樣，研究生的創(chuàng)新意識(shí)才能夠得到增強(qiáng)。

研究生創(chuàng)新能力培養(yǎng)是受多因素復(fù)雜交錯(cuò)影響的，要提升研究生的創(chuàng)新能力，既要保證培養(yǎng)研究生的客觀條件充足，又要發(fā)揮研究生的主觀能動(dòng)性。研究生教育只有適應(yīng)知識(shí)經(jīng)濟(jì)時(shí)代的要求，才能不斷培養(yǎng)出符合社會(huì)需要的高層次創(chuàng)新型人才。表觀遺傳學(xué)既是目前迅速發(fā)展的學(xué)科和熱點(diǎn)領(lǐng)域，在生物醫(yī)學(xué)各種學(xué)科存在著千絲萬縷的聯(lián)系。它也是我們學(xué)院研究生重要的專業(yè)基礎(chǔ)課，對(duì)于培養(yǎng)研究生的創(chuàng)新意識(shí)，培養(yǎng)研究生發(fā)現(xiàn)問題、解決問題的能力具有重要的作用。只有在教學(xué)實(shí)踐中不斷地提高教師自身素質(zhì)，調(diào)整教學(xué)內(nèi)容，改進(jìn)教學(xué)方法，才能達(dá)到預(yù)期目的。

參考文獻(xiàn)

遺傳學(xué)研究范文6

【關(guān)鍵詞】TBL教學(xué)法 醫(yī)學(xué)遺傳學(xué) 教學(xué)改革

【中圖分類號(hào)】 G 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】0450-9889（2014）07C-0135-02

醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)是目前醫(yī)學(xué)中最前沿的學(xué)科之一，其利用DNA技術(shù)研究遺傳性疾病的發(fā)生機(jī)制、傳遞方式、診斷、治療、預(yù)后、再發(fā)風(fēng)險(xiǎn)和預(yù)防方法，從而達(dá)到控制遺傳性疾病的再發(fā)，降低其在人群中的危害，提高人類健康水平之目的。醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)既是一門綜合性很強(qiáng)的基礎(chǔ)課程，又與臨床醫(yī)學(xué)緊密相連，其課程知識(shí)點(diǎn)繁多，覆蓋面廣，更新速度快，與其他學(xué)科交叉緊密，因此，在傳統(tǒng)教學(xué)模式下，學(xué)生容易出現(xiàn)學(xué)科體系不清晰、重點(diǎn)內(nèi)容不易消化、感覺教學(xué)內(nèi)容枯燥乏味、學(xué)習(xí)缺乏積極性等問題。顯然傳統(tǒng)的教學(xué)模式已經(jīng)無法滿足新的教育環(huán)境下對(duì)醫(yī)學(xué)生綜合素質(zhì)全面提高的要求了，這就需要新穎、高效、優(yōu)質(zhì)的教學(xué)模式加入，并逐步完善。以團(tuán)隊(duì)為基礎(chǔ)的教學(xué)模式（team-based learning，TBL）是以團(tuán)隊(duì)為基礎(chǔ)，通過將教師講授和學(xué)生討論有機(jī)結(jié)合而形成的教學(xué)模式，它是美國(guó)Oklahoma大學(xué) Larry Michaelsen教授在優(yōu)化改進(jìn)以問題為基礎(chǔ)的教學(xué)模式（problem-based learning，PBL）后，于2002年提出的一種新的教學(xué)理念。該教學(xué)模式體現(xiàn)了以學(xué)生為主體的教學(xué)思路，鼓勵(lì)學(xué)生通過團(tuán)隊(duì)協(xié)作的方式分析問題、解決問題，有效的提高了學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性、主動(dòng)性和團(tuán)隊(duì)合作精神，也帶來了很好的教學(xué)效果。現(xiàn)將TBL教學(xué)法引入醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)教學(xué)中，通過積極的實(shí)踐和優(yōu)化，爭(zhēng)取不斷提高醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)的教學(xué)質(zhì)量。

一、對(duì)象與方法

（一）研究對(duì)象。選取廣西衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院2012級(jí)檢驗(yàn)1班和檢驗(yàn)2班作為研究對(duì)象。檢驗(yàn)1班58人作為實(shí)驗(yàn)組，檢驗(yàn)2班58人作為對(duì)照組。兩組年齡、綜合素質(zhì)等比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

（二）研究方法。對(duì)照組采用傳統(tǒng)的講授式教學(xué)方式。實(shí)驗(yàn)組采用TBL教學(xué)模式：授課前，教師要提前一周將與課程內(nèi)容相關(guān)的預(yù)習(xí)資料發(fā)放給學(xué)生，供學(xué)生預(yù)習(xí)；對(duì)學(xué)生進(jìn)行分組，每組5-7人，分組的原則是成績(jī)優(yōu)異的學(xué)生和成績(jī)一般的學(xué)生搭配，積極主動(dòng)的學(xué)生和消極被動(dòng)的學(xué)生搭檔，做到組內(nèi)異質(zhì)、組間同質(zhì)。課堂內(nèi)容包括4個(gè)部分：（1）個(gè)人測(cè)驗(yàn)（10min），先發(fā)放試題和答題卡對(duì)學(xué)生進(jìn)行一次基礎(chǔ)知識(shí)測(cè)驗(yàn)，由每個(gè)學(xué)生獨(dú)立完成，檢查學(xué)生的預(yù)習(xí)效果；（2）團(tuán)隊(duì)測(cè)驗(yàn)（20min），再次發(fā)放試題和答題卡給學(xué)生進(jìn)行測(cè)試，但這次允許小組內(nèi)的成員進(jìn)行討論，最后得出組內(nèi)統(tǒng)一的意見；（3）匯報(bào)討論（45min），各小組選派一名代表匯報(bào)組內(nèi)討論的結(jié)果，并針對(duì)問題提出相關(guān)理由，持有異議的其他小組成員可以通過相互辯論的方式發(fā)言；（4）評(píng)價(jià)總結(jié)（15min），教師點(diǎn)評(píng)、總結(jié)討論發(fā)言和團(tuán)隊(duì)協(xié)作情況，解釋同學(xué)們討論中出現(xiàn)的疑問，總結(jié)知識(shí)點(diǎn)并提出改進(jìn)意見。

（三）評(píng)價(jià)方法。包括：（1）學(xué)期末進(jìn)行醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)閉卷期末考試進(jìn)行比較；（2）發(fā)放教學(xué)調(diào)查表，統(tǒng)計(jì)學(xué)生對(duì)TBL教學(xué)模式的滿意度。相應(yīng)數(shù)據(jù)使用SPSS 13.0軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用x2檢驗(yàn)，比較兩組教學(xué)效果。

二、結(jié)果

（一）兩組學(xué)生醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)考試成績(jī)比較（見表1）。從表1可以知道，兩組學(xué)生在醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)考試成績(jī)上存在顯著差異，t=8.397，P

（二）兩組學(xué)生醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)教學(xué)滿意度調(diào)查表（見表2）。在醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)教學(xué)課程結(jié)束后，發(fā)放教學(xué)調(diào)查表，分別調(diào)查學(xué)生對(duì)傳統(tǒng)教學(xué)模式（對(duì)照組）和TBL教學(xué)模式（實(shí)驗(yàn)組）的滿意度，發(fā)放調(diào)查表116分，回收116份，回收率100%。實(shí)驗(yàn)組滿意率與對(duì)照組滿意率存在差異，P

三、討論

（一）TBL教學(xué)模式能有效激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性和主動(dòng)性。TBL教學(xué)模式改變了傳統(tǒng)教學(xué)模式以教師為中心的教育思路，真正體現(xiàn)了以“以生為本”的理念。在上新課前，學(xué)生會(huì)通過查閱醫(yī)學(xué)雜志、搜索互聯(lián)網(wǎng)等方式提前準(zhǔn)備教師布置的預(yù)習(xí)資料，一方面提高他們的自學(xué)能力、信息檢索分析能力，另一方面也增強(qiáng)他們的學(xué)習(xí)積極性。在TBL教學(xué)過程中，以往灌輸式的講授方式被學(xué)生分組討論和教師指導(dǎo)取代，使得枯燥乏味的醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)知識(shí)更容易被學(xué)生接受，在不斷討論學(xué)習(xí)的過程中他們會(huì)用這些知識(shí)點(diǎn)去分析問題、解決問題，因此知識(shí)點(diǎn)也更容易被記住、記牢。這在一定程度上會(huì)促使學(xué)生變被動(dòng)為主動(dòng)，激發(fā)他們的學(xué)習(xí)動(dòng)力。

（二）TBL教學(xué)模式能培養(yǎng)學(xué)生團(tuán)隊(duì)協(xié)作能力。TBL教學(xué)本質(zhì)上是一種以小組為單位的集體學(xué)習(xí)，它以團(tuán)隊(duì)為基礎(chǔ)，團(tuán)隊(duì)中的成員都有不同的任務(wù)，如果一個(gè)成員不能完成他的任務(wù)，那么就會(huì)影響到整個(gè)團(tuán)隊(duì)的成績(jī)，這就要求這個(gè)團(tuán)隊(duì)分工明確、管理合理、責(zé)任清晰才能能高效運(yùn)作。學(xué)生在收集相關(guān)資料、討論分析的過程中，就要與小組其他成員不斷進(jìn)行交流、學(xué)習(xí)、互助，在互動(dòng)過程中就會(huì)逐漸拉近與他人的距離，培養(yǎng)了團(tuán)隊(duì)協(xié)作能力，有利于以點(diǎn)帶面、以面帶片，最終實(shí)現(xiàn)組內(nèi)、組間及全班學(xué)生的共同進(jìn)步。

（三）TBL教學(xué)模式能提高教師教學(xué)能力和水平。與以往的傳統(tǒng)講授式教學(xué)模式不同，TBL改變了教師為中心的模式，這也對(duì)教師的教學(xué)能力和水平有了更高的要求。在TBL教學(xué)模式中，教學(xué)的主體已由教師轉(zhuǎn)變?yōu)榱藢W(xué)生，教師在教學(xué)過程中主要的作用是組織課堂、激勵(lì)團(tuán)隊(duì)學(xué)習(xí)、引導(dǎo)討論等，這就要求教師具備更加全面、廣博的知識(shí)，豐富的教學(xué)經(jīng)驗(yàn)，而且具有較強(qiáng)的組織溝通能力。另外，醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)是一門跨專業(yè)、融合性很強(qiáng)的前沿學(xué)科，知識(shí)更新快，需要教師在TBL教學(xué)前，不斷的通過自學(xué)、進(jìn)修、網(wǎng)絡(luò)等方式了解本學(xué)科及相關(guān)學(xué)科的前沿知識(shí)和技術(shù)，這樣才能更好地準(zhǔn)備教案，將醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)這門學(xué)科上好，同時(shí)也能不斷提高教師教學(xué)能力和水平。

TBL教學(xué)模式是一種新穎的教學(xué)方法，它克服了傳統(tǒng)教學(xué)模式的部分缺陷，在引入醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)教學(xué)中后，我們發(fā)現(xiàn)它能有效提高學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性和主動(dòng)性、增強(qiáng)學(xué)生團(tuán)隊(duì)協(xié)作能力，并且有利于提高教師的教學(xué)能力和水平。隨著TBL教學(xué)模式不斷完善和改進(jìn)，這種先進(jìn)的教學(xué)方法必定會(huì)對(duì)醫(yī)學(xué)教育改革起到推動(dòng)促進(jìn)作用。

【參考文獻(xiàn)】

[1]傅松濱. 醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)[M].北京：北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社，2009

[2]郭艷紅，黃文君，辛敏，等. TBL教學(xué)模式在地方醫(yī)學(xué)院校生理學(xué)教學(xué)中的應(yīng)用[J].基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教育，2013 （2）

[3]譚波濤，潘麗萍，梁紅，等. TBL結(jié)合LBL模式在生理學(xué)教學(xué)中的應(yīng)用研究[J].中國(guó)高等醫(yī)學(xué)教育，2012（11）

[4]萬能章. TBL教學(xué)法對(duì)病理學(xué)教學(xué)效果的影響[J].中國(guó)高等醫(yī)學(xué)教育，2011（8）