前言：尋找寫作靈感？中文期刊網(wǎng)用心挑選的保健食品及五味子顆的功效成分，希望能為您的閱讀和創(chuàng)作帶來靈感，歡迎大家閱讀并分享。

摘要：基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接篩選辨識(shí)白及五味子顆粒中保胃護(hù)肝的功效成分及作用機(jī)制，并利用HPLC-DAD建立含量測(cè)定方法。該研究遵循多個(gè)功效成分共同測(cè)定取代總成分測(cè)定以提升保健食品質(zhì)量控制總體思路，采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法對(duì)功效成分進(jìn)行篩選。基于TCMSP、GEO和Genecards等數(shù)據(jù)庫共收集白及五味子顆粒的59個(gè)目標(biāo)成分和74個(gè)疾病與成分的共同作用靶點(diǎn)，采用PPI平臺(tái)及“成分-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)篩選得到包括AKT1、JUN等11個(gè)核心靶點(diǎn)與橙皮苷、芒柄花素、川陳皮素、五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素共6個(gè)功效成分。通過對(duì)共同作用靶點(diǎn)進(jìn)行GO和KEGG富集分析可知，白及五味子顆粒保胃護(hù)肝功能的發(fā)揮涉及對(duì)化學(xué)應(yīng)激的反應(yīng)，類固醇代謝過程，對(duì)酒精的反應(yīng)，脂質(zhì)和動(dòng)脈粥樣硬化通路，IL-17信號(hào)通路等關(guān)于脂質(zhì)代謝、氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)的通路。提示了白及五味子顆粒發(fā)揮保胃護(hù)肝功能是通過多成分、多靶點(diǎn)、多通路的協(xié)同作用實(shí)現(xiàn)的。對(duì)篩選得到的功效成分與核心靶點(diǎn)的結(jié)合能力進(jìn)行預(yù)測(cè)分析，結(jié)果顯示，所有成分均與核心靶點(diǎn)結(jié)合情況良好，結(jié)合活性綜合排名前3位分別是橙皮苷、五味子醇甲與五味子甲素。此外，對(duì)功效成分建立含量測(cè)定方法完成對(duì)白及五味子顆粒中功效成分的含量測(cè)定。該研究結(jié)果為保健食品白及五味子顆粒中保胃護(hù)肝功效成分的發(fā)現(xiàn)和作用機(jī)制的闡明提供了思路，建立的功效成分含量測(cè)定方法準(zhǔn)確、穩(wěn)定，為實(shí)際生產(chǎn)中質(zhì)量控制環(huán)節(jié)提供參考。

關(guān)鍵詞：保健食品；功效成分；白及；網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)；分子對(duì)接

中藥類保健食品是我國(guó)保健食品的重要組成部分，其原料主要來源于“藥食同源”類中藥，具有食品屬性。原料中藥的成分復(fù)雜多樣及多功能活性給中藥類保健食品質(zhì)量的有效控制帶來了巨大挑戰(zhàn)[1]。中藥類保健食品的質(zhì)量控制現(xiàn)多借鑒中藥復(fù)方質(zhì)量控制方法體系和思路。但鑒于其食品屬性，在質(zhì)量控制上的關(guān)注點(diǎn)應(yīng)著重于其功能相關(guān)的成分以保證核心功能的有效性。若對(duì)產(chǎn)品中大多數(shù)或全部功效成分進(jìn)行監(jiān)測(cè)控制，在實(shí)際生產(chǎn)中又存在檢測(cè)難度大，成本高等問題。通過對(duì)少量特征性強(qiáng)、功能明確的成分進(jìn)行檢測(cè)和評(píng)價(jià)，可規(guī)避現(xiàn)有許多保健食品僅以總黃酮、總皂苷等總成分含量作為代表評(píng)價(jià)，從而造成產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定的現(xiàn)象[2-3]。為了保證保健食品的功效，亟需建立一套穩(wěn)定、適用于生產(chǎn)且符合產(chǎn)品自身功能等特點(diǎn)的質(zhì)量控制體系。通過對(duì)多個(gè)功效成分整體的控制可以在保證質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)在實(shí)際生產(chǎn)中可行性的基礎(chǔ)上，更全面地監(jiān)控產(chǎn)品質(zhì)量。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是近年來常應(yīng)用于中藥及中藥復(fù)方研究中的一個(gè)探究核心成分與功能的方法，可通過對(duì)“成分-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)的多層次網(wǎng)絡(luò)聯(lián)系完成對(duì)中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及機(jī)制探尋[4]。分子對(duì)接通過聯(lián)系成分和作用靶點(diǎn)，建立其相互作用關(guān)系，廣泛應(yīng)用于藥物發(fā)現(xiàn)與評(píng)價(jià)領(lǐng)域，是對(duì)“成分-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)預(yù)測(cè)結(jié)果的一種驗(yàn)證方式[5]。白及五味子顆粒是由白及、黃芪、五味子和陳皮組成的一個(gè)具有保胃護(hù)肝雙功能的一個(gè)中藥類保健食品。本研究以白及五味子顆粒為例，從網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的角度切入，篩選得到白及五味子顆粒功效成分和其保胃護(hù)肝核心靶點(diǎn)，并利用分子對(duì)接的方法進(jìn)行驗(yàn)證，建立多成分含量測(cè)定方法。研究白及五味子顆粒中具有保胃護(hù)肝雙功能的功效成分，探索中藥類保健食品功效成分辨別和功能機(jī)制闡述的新途徑，為白及五味子顆粒與中藥類保健食品的質(zhì)量控制提供思路。

1材料與方法

1.1儀器與資料

AcchormS6000高效液相色譜儀，配備在線脫氣機(jī)、四元泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、DAD檢測(cè)器，華譜科儀；BT25S十萬分之一電子天平，北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司；KQ-250DE超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司。

1.2試劑與材料

白及五味子顆粒中所用藥材白及（批號(hào)：201001）、黃芪（批號(hào)：190801）、五味子（批號(hào)：191001）和陳皮（批號(hào)：200901），均由禹州市凱旋藥業(yè)有限公司提供。橙皮苷對(duì)照品（批號(hào)110721-202019，質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98%）、五味子醇甲對(duì)照品（批號(hào)110857-201815，質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98%）、五味子甲素對(duì)照品（批號(hào)110764-201915，質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98%）、五味子乙素對(duì)照品（批號(hào)110765-201813，質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98%），購自中國(guó)食品藥品檢定研究院；川陳皮素對(duì)照品（批號(hào)AF20032911，質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98%）、芒柄花素對(duì)照品（批號(hào)AF20052952，質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98%），購自成都埃法生物科技有限公司。乙腈為色譜級(jí)，美國(guó)FisherScientific公司；其余試劑均為分析純。水為娃哈哈水（批號(hào)：20210820），杭州娃哈哈集團(tuán)有限公司。

1.3網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析

1.3.1白及五味子顆粒目標(biāo)成分和疾病作用靶點(diǎn)相關(guān)數(shù)據(jù)集的建立。以“gastricmucosainjury”和“l(fā)iverdisease”為關(guān)鍵詞、實(shí)驗(yàn)以人源作為樣本對(duì)胃黏膜損傷和肝損傷的條件在GEO數(shù)據(jù)庫和Genecards數(shù)據(jù)庫中對(duì)疾病作用靶點(diǎn)進(jìn)行搜集。使用R進(jìn)行數(shù)據(jù)處理獲取正常組與患病組差異表達(dá)基因。對(duì)GEO和Genecards數(shù)據(jù)庫的靶點(diǎn)信息取并集，去重后得到疾病基因靶點(diǎn)并建立肝損傷和胃黏膜損傷疾病作用靶點(diǎn)數(shù)據(jù)集。利用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)平臺(tái)TCMSP數(shù)據(jù)庫檢索白及五味子顆粒中黃芪、白及、五味子和陳皮的成分，并將藥動(dòng)學(xué)參數(shù)中的口服生物利用度（oralbioavailability,OB）≥30%和類藥性（drug-likeness,DL）≥0.18作為篩選條件。數(shù)據(jù)集的建立還參考并查找國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)中記錄的具有活性且未包含在數(shù)據(jù)庫內(nèi)的成分，得到符合條件的目標(biāo)成分，形成白及五味子顆粒目標(biāo)成分?jǐn)?shù)據(jù)集。通過檢索TCMSP數(shù)據(jù)庫和Drugbank數(shù)據(jù)庫對(duì)成分對(duì)應(yīng)靶點(diǎn)進(jìn)行注釋，得到目標(biāo)成分作用靶點(diǎn)數(shù)據(jù)集。1.3.2功效成分與共同作用靶點(diǎn)的獲取。對(duì)疾病作用靶點(diǎn)及目標(biāo)成分作用靶點(diǎn)信息進(jìn)行韋恩圖分析，取交集后，得到白及五味子顆粒發(fā)揮保胃護(hù)肝功效的共同作用靶點(diǎn)。利用PPI網(wǎng)絡(luò)對(duì)上述靶點(diǎn)進(jìn)行篩選，將其信息導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫，設(shè)置物種為人（homosapines），獲取靶點(diǎn)蛋白的最高置信度＞0.9的交互作用關(guān)系。根據(jù)STRING數(shù)據(jù)庫獲得蛋白互作關(guān)系，在Cytoscape3.8.2軟件中構(gòu)建靶點(diǎn)蛋白的交互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)。使用“cytoHubba”和“CytoNCA”插件進(jìn)行分析，并根據(jù)度值（Degree）、中介中心性（betweennesscentrality，BC）、接近中心性（closenesscentrality，CC）等信息篩選核心靶點(diǎn)[6]。Degree值、BC值和CC值進(jìn)行分析、排序。