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食物聯系是海洋生態系統結構與功能的基本表達形式,初級生產的能量通過食物鏈—食物網轉化為各營養層次生物生產力,形成生態系統資源產量,并對生態系統的服務和產出及其資源種群的動態產生影響;東黃海生物資源以多種類為特征,同時,又有明顯的優勢種。因此,關鍵資源種群食物網能量流動是認識東黃海生態系統資源生產及其動態的關鍵生物過程[1]。 浮游動物中華哲水蚤作為從基礎生產者到高層捕食者的中間環節,在海洋生態系統能量轉換和物質流動中起著承上啟下的關鍵作用。它下行控制初級生產,上行控制上層捕食者,其種群變動在一定程度上決定著漁業資源的補充。國家重大基礎研究規劃項目“東、黃海生態系統動力學與生物資源可持續利用”確定中華哲水蚤為研究海區生態系統的主要關鍵種,將中華哲水蚤種群動力學和它的補充機制作為重點解決的關科學問題。 用GC-MS分析氨基酸的國內報道很少,采用三氟醋酸酐與酸性正丁醇作為氨基酸的衍生化試劑,對衍生化條件和色譜操作條件進行了優選,建立了樣品中氨基酸的分離及定性定量分析方法,該法分析速度快,樣品處理簡單,分離效果好,定量準確。 1材料與方法 1.1材料 Agilent6890N氣相色譜儀,5973N質譜儀(GC-MS)。L-谷氨酸,L-蘇氨酸,L-苯丙氨酸,L-甘氨酸,分析純;鹽酸HCl,優級純;正丁醇,色譜純;乙酰氯CH3COCl,分析純;二氯甲烷,色譜純;三氟乙酸酐(CH3CO)2O,色譜純,購自美國SigmaChemical公司。色譜柱:HP-5MS,30m×0.25mmID×0.25μm。氣相色譜操作條件:氣化室溫度,250℃;傳輸線溫度:280℃;色譜柱升溫程序:初溫50℃,以20℃/min升至220℃,以10℃/min升至280℃并保持3min。進樣方式:不分流進樣。進樣量:1μl。質譜:EI離子源,倍增器電壓1200V,離子源溫度:230℃,四極桿溫度:150℃,全掃描(SCAN)質量范圍為33~600mau,各組分的峰面積是從全掃描的總離子流色譜圖中積分得到。 1.2方法 氨基酸屬非揮發性物質,GC-MS分析測定氨基酸須經衍生化反應使之成為易于氣化的物質,試驗采用生成三氟乙酰氨基酸正丁酯的方法對氨基酸進行了衍生化。將所得的16種標準氨基酸的混合物衍生物的譜圖與GC-MS分析測定出的樣品譜圖進行比較,根據保留時間、結合分子式、分子量通過計算機檢索和人工解析相結合的方法進行鑒定,并使用外標法定量分析[2]。 2結果與分析 2.1中華哲水蚤氨基酸的相對含量 測定中共確證出樣品的15種氨基酸及各自的含量分別為:丙氨酸ALA5.50%,甘氨酸GLY4.89%,蘇氨酸THR5.98%,絲氨酸SER3.68%,纈氨酸VAL5.18%,亮氨酸LEU5.25%,異亮氨酸LIE4.55%,脯氨酸PRO2.27%,蛋氨酸MET0.61%,天冬氨酸ASP6.43%,苯丙氨酸PHE2.31%,組氨酸HIS1.65%,酪氨酸TYR5.93%,賴氨酸LYS2.10%,谷氨酸GLU8.85%。 2.2中華哲水蚤氨基酸相對含量的比較(圖1) 由圖1可知,天冬氨酸、酪氨酸、谷氨酸含量都很高。丙氨酸、甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸在中華哲水蚤中的組成相對變化比較大必需氨基酸蛋氨酸在中華哲水蚤中含量偏低,蛋氨酸與天冬氨酸相比,蛋氨酸也只有天冬氨酸的10%左右。 3討論 由文獻可知動物對其他氨基酸的需要量的比值越低,說明其缺乏的程度越大,對其他氨基酸的限制程度越強,苯丙氨酸、組氨酸、賴氨酸在中華哲水蚤中相對含量也偏低,可能對上行動物造成與蛋氨酸相類似的限制作用,從而影響食物鏈的營養質量,而亮氨酸在中華哲水蚤中的含量比較高。