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[摘要]近年來，病原微生物引發(fā)的生物安全問題備受社會關(guān)注，也成為各高校重視的實(shí)驗(yàn)室安全問題之一。本文主要結(jié)合本校免疫與病原生物實(shí)驗(yàn)室的具體情況剖析了實(shí)驗(yàn)教學(xué)中存在的危險(xiǎn)因素并提出相應(yīng)的防護(hù)對策，為下一步實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革及實(shí)驗(yàn)室安全管理提供指導(dǎo)方向。

[關(guān)鍵詞]實(shí)驗(yàn)教學(xué)；生物安全；免疫與病原生物學(xué)

為了建設(shè)平安和諧的校園環(huán)境，近年來各高校都普遍加強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)室安全管理工作，但關(guān)注點(diǎn)主要集中在危險(xiǎn)化學(xué)品，易燃、易爆、易制毒藥品的管理方面，對實(shí)驗(yàn)室生物安全關(guān)注較少[1]。實(shí)驗(yàn)室生物安全是在從事病原微生物相關(guān)的實(shí)驗(yàn)活動中，避免病原微生物造成實(shí)驗(yàn)室相關(guān)人員感染和環(huán)境污染，以及對外圍人群帶來危害的意識和措施指防止病原微生物、毒素等生物危險(xiǎn)因子造成實(shí)驗(yàn)室操作人員傷害，或避免其向?qū)嶒?yàn)室外擴(kuò)散而導(dǎo)致環(huán)境污染及公共危害的綜合性措施[2-3]。近年來，實(shí)驗(yàn)室致病性微生物感染的事故感染事件屢有報(bào)道，給社會以及師生健康帶來危害，造成嚴(yán)重后果，也讓相關(guān)主管部門充分認(rèn)識到生物安全的重要性[4]。作為承擔(dān)高校醫(yī)學(xué)生基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)課程病原微生物專業(yè)相關(guān)的教學(xué)實(shí)驗(yàn)室，除了培養(yǎng)學(xué)生掌握本學(xué)科的基本技能外，更有培養(yǎng)學(xué)生樹立實(shí)驗(yàn)室生物安全意識和職業(yè)素養(yǎng)的責(zé)任。本文主要結(jié)合本校免疫與病原微生物實(shí)驗(yàn)室的具體情況分析實(shí)驗(yàn)教學(xué)中存在的危險(xiǎn)因素并提出相應(yīng)的防護(hù)對策，為下一步實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革及實(shí)驗(yàn)室安全管理提供指導(dǎo)方向。

1免疫與病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全現(xiàn)狀

《醫(yī)學(xué)免疫學(xué)》《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》是高校所有醫(yī)學(xué)生必修的基礎(chǔ)課程，也是理論和實(shí)踐緊密聯(lián)系的學(xué)科[5]，其實(shí)驗(yàn)教學(xué)在培養(yǎng)學(xué)生實(shí)踐能力和創(chuàng)新能力方面是非常關(guān)鍵的一環(huán)。基于學(xué)科專業(yè)的特點(diǎn)，對實(shí)驗(yàn)室硬件設(shè)施以及實(shí)驗(yàn)操作人員技能、安全防護(hù)意識有較高的要求。現(xiàn)結(jié)合本校免疫與病原生物學(xué)教學(xué)實(shí)驗(yàn)室的情況分析在生物安全方面存在的隱患，為預(yù)防和規(guī)避風(fēng)險(xiǎn)提供思路。

1.1實(shí)驗(yàn)室生物安全設(shè)施防護(hù)等級低。各類病原微生物以及血清制品(如金黃色葡萄球菌，傷寒沙門氏菌，痢疾志賀氏菌以及乙肝病人陽性血清等)是免疫與病原微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室主要的實(shí)驗(yàn)材料，具有一定的感染風(fēng)險(xiǎn)。根據(jù)國家相關(guān)法規(guī)條例規(guī)定的要求部分實(shí)驗(yàn)材料應(yīng)在BSL-2級水平甚至更高級的實(shí)驗(yàn)室中展開，但因?qū)嶒?yàn)室條件受限此部分的教學(xué)實(shí)驗(yàn)仍在普通實(shí)驗(yàn)室開展，這就存在著很大的安全隱患，此類情況在全國高校醫(yī)學(xué)類教學(xué)實(shí)驗(yàn)室普遍存在[6]。

1.2師生生物安全意識薄弱。近年來，在醫(yī)學(xué)院校新入職的大部分教師沒有醫(yī)學(xué)背景，缺少系統(tǒng)的病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理培訓(xùn)，淡化了對病原實(shí)驗(yàn)室生物安全的意識。盡管學(xué)生進(jìn)實(shí)驗(yàn)室前進(jìn)行過有關(guān)實(shí)驗(yàn)室安全的考試，但無菌觀念不強(qiáng)。通常也只是在首次實(shí)驗(yàn)課上帶教老師講述實(shí)驗(yàn)室規(guī)則和注意事項(xiàng)，未能使學(xué)生充分知曉實(shí)驗(yàn)室所從事的實(shí)驗(yàn)存在哪些潛在危險(xiǎn)因子以及可能被感染的途徑等，導(dǎo)致學(xué)生對潛在的隱患認(rèn)識不足，缺乏自我防護(hù)意識。此外，學(xué)生的日常習(xí)慣很差，比如直接將書包等與實(shí)驗(yàn)無關(guān)物品放在實(shí)驗(yàn)操作臺，更甚者有的直接在書本上面進(jìn)行微生物接種操作等；實(shí)驗(yàn)結(jié)束后沒有及時洗手和消毒，就離開實(shí)驗(yàn)室等問題，都體現(xiàn)了學(xué)生生物安全防護(hù)意識淡薄，更意味著加強(qiáng)學(xué)生病原微生物實(shí)驗(yàn)室安全教育的緊迫性和必要性。

1.3實(shí)驗(yàn)操作不規(guī)范，防范意識淡薄。在學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作過程中，尤其是在做細(xì)菌涂片相關(guān)實(shí)驗(yàn)時(如抗酸染色、玻片凝集實(shí)驗(yàn)等)，細(xì)菌極易形成氣溶膠，在嘈雜的環(huán)境中很容易導(dǎo)致污染周圍環(huán)境或經(jīng)呼吸道吸入氣溶膠而被感染。腸道菌鑒定的生化反應(yīng)穿刺接種時，由于操作不規(guī)范導(dǎo)致砂輪劃傷手指而被感染；乙肝病毒的酶聯(lián)免疫吸附檢測實(shí)驗(yàn)中，廢棄物(酶標(biāo)板、毛紙，槍頭等)沒有按照要求分類放置處理消毒滅殺等，這些常常不被重視的小細(xì)節(jié)都是可能造成實(shí)驗(yàn)室生物感染事故發(fā)生的潛在危險(xiǎn)因素。因此，在實(shí)驗(yàn)課中加強(qiáng)生物安全管理和自我防護(hù)教育是十分必要的[7]。

2免疫與病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全管理的工作方向

據(jù)有關(guān)資料統(tǒng)計(jì)顯示，實(shí)驗(yàn)室安全事故的發(fā)生是人的不安全行為和物的不安全狀態(tài)相互復(fù)雜關(guān)聯(lián)、共同作用的結(jié)果[8]。因此我們主要從人和實(shí)驗(yàn)室兩個方面探討如何加強(qiáng)生物安全管理才能將風(fēng)險(xiǎn)控制到最低。

2.1完善實(shí)驗(yàn)教學(xué)環(huán)境，優(yōu)化實(shí)驗(yàn)教學(xué)材料。為了克服免疫與病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的生物安全防護(hù)級別比較低的現(xiàn)狀，我們可以通過不斷的完善實(shí)驗(yàn)室布局與功能，提升其防護(hù)水平。比如配備獨(dú)立的滅菌消毒間，方便教師講解和示范各類消毒設(shè)備；教室外設(shè)置儲物柜，讓學(xué)生存放與實(shí)驗(yàn)無關(guān)物品；教室內(nèi)配備洗手、消毒設(shè)施、應(yīng)急藥箱以及明確標(biāo)識實(shí)驗(yàn)廢棄物放置區(qū)等。此外，要加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)設(shè)備管理，盡量避免因儀器設(shè)備故障造成實(shí)驗(yàn)室安全事故。如用不銹鋼酒精燈替換玻璃酒精燈；定期檢查高壓蒸汽滅菌鍋、細(xì)菌培養(yǎng)箱、生物凈化工作臺等設(shè)備的穩(wěn)定性及運(yùn)行狀態(tài)；定期對離心機(jī)、振蕩器、酶標(biāo)儀等儀器以及實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行消毒滅菌處理等，保障相對安全的實(shí)驗(yàn)環(huán)境。根據(jù)學(xué)校實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的條件和學(xué)生的實(shí)際操作能力，可以在菌毒株的選擇上下功夫。首先，保證實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中使用的標(biāo)準(zhǔn)菌株獲得途徑正規(guī)；其次，依據(jù)《人間傳染的病原微生物名錄》對實(shí)驗(yàn)室目前使用的菌株進(jìn)行逐一比對，采用符合生物安全要求的微生物菌毒株，依法保障實(shí)驗(yàn)教學(xué)的安全性。比如具有較強(qiáng)致病性且在實(shí)驗(yàn)操作中易發(fā)生生物安全問題的野生型傷寒沙門菌株以及結(jié)核分枝桿菌疫苗株，可以使用對人物無致病性的恥垢分枝桿菌和減毒傷寒沙門菌疫苗株Ty21a替代，這樣可以既保證實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果，又無生物安全風(fēng)險(xiǎn)[6]。

2.2樹立強(qiáng)化生物安全意識，規(guī)范實(shí)驗(yàn)操作技能。有研究指出，實(shí)驗(yàn)人員的安全知識缺乏、安全意識淡薄是導(dǎo)致不安全行為和不規(guī)范操作的直接原因，也是導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室事故發(fā)生的根本原因[9]。而提升實(shí)驗(yàn)操作人員的生物安全意識和規(guī)范操作技能也是生物安全管理的一項(xiàng)重要內(nèi)容[10]。教師在教學(xué)活動起的主導(dǎo)作用，首先要更新教師的生物安全知識體系。實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員以及實(shí)驗(yàn)帶教老師，應(yīng)該認(rèn)真研讀《浙江省病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理辦法》、《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》(WS233-2017)等相關(guān)法規(guī)及文件；定期參加省市衛(wèi)健委部門舉辦的“病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全及技術(shù)”培訓(xùn)班，不斷更新知識系統(tǒng)，強(qiáng)化自身的生物安全觀念。此外，帶教老師應(yīng)該在首次實(shí)驗(yàn)課上增加《病原微生物實(shí)驗(yàn)室安全管理?xiàng)l例》、《人間傳染的病原微生物名錄》等相關(guān)政策法規(guī)的介紹，以及對實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)儀器(如高壓蒸汽滅菌鍋、干烤箱、生物凈化臺等)的功能、實(shí)驗(yàn)室常發(fā)生的意外事件及處置方法的介紹。課上帶教老師應(yīng)該針對不同的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容反復(fù)強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)過程中可能潛在的危險(xiǎn)以及注意事項(xiàng)，進(jìn)一步強(qiáng)化學(xué)生的生物安全觀念；實(shí)驗(yàn)結(jié)束后再次明確實(shí)驗(yàn)廢棄物的分類處置等。再者，通過引入典型的實(shí)驗(yàn)室安全事故案例，讓學(xué)生直觀地切身感覺到事故就發(fā)生在身邊。讓學(xué)生從思想上認(rèn)識到病原微生物實(shí)驗(yàn)與以往的形態(tài)學(xué)、生理學(xué)實(shí)驗(yàn)不同，本學(xué)科實(shí)驗(yàn)環(huán)境存在感染風(fēng)險(xiǎn)從而提高自我防護(hù)意識。學(xué)生是實(shí)驗(yàn)教學(xué)活動中的主宰者參與者，實(shí)驗(yàn)課的生物安全很大程度上取決于學(xué)生的安全意識以及實(shí)驗(yàn)習(xí)慣。學(xué)生可以采取多種途徑學(xué)習(xí)實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)知識，比如通過慕課學(xué)習(xí)或參加學(xué)校舉辦的相關(guān)知識講座、科技社團(tuán)舉辦知識競賽等形式，增強(qiáng)自我防護(hù)意識。此外，在實(shí)驗(yàn)操作中仔細(xì)觀摩老師的示范過程，注意每一步的操作要點(diǎn)及注意事項(xiàng)，規(guī)范自己的操作方法，強(qiáng)化操作技能。對自己實(shí)驗(yàn)過程中遇到突發(fā)事件(比如菌液濺灑、劃破手指等)要及時反饋給老師，及時采取補(bǔ)救措施以降低危害；實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，將實(shí)驗(yàn)臺整理擺放整齊，所有使用過的實(shí)驗(yàn)材料按要求放到指定位置，不得擅自處理或帶出實(shí)驗(yàn)室。因此，只有養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣和掌握標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)技能，提升自我防護(hù)意識才是規(guī)避實(shí)驗(yàn)室安全事故發(fā)生的關(guān)鍵。

3結(jié)束語

高校實(shí)驗(yàn)室的生物安全對學(xué)校教學(xué)、科研事業(yè)的可持續(xù)發(fā)展以及平安和諧至關(guān)重要。涉及病原微生物的教學(xué)實(shí)驗(yàn)室的生物安全風(fēng)險(xiǎn)系數(shù)相對較高，尤其是在承擔(dān)不同專業(yè)、學(xué)生人數(shù)多的情況下，開展有效的實(shí)驗(yàn)室生物安全教育，提升師生自我保護(hù)意識、規(guī)范實(shí)驗(yàn)操作和培養(yǎng)良好的實(shí)驗(yàn)素養(yǎng)等是保障涉危實(shí)驗(yàn)室生物安全的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，也是順應(yīng)時展要求，新形勢下醫(yī)學(xué)人才培養(yǎng)的目標(biāo)之一。

作者:康艷華 蔡玲斐 趙冬久 單位:杭州師范大學(xué)