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骨科與中醫骨傷科區別范文1

中國中醫科學院望京醫院創傷一科，他們始終堅持突出中醫特色治療骨傷，在減輕患者因骨折帶來痛苦的同時，也贏得了廣大患者的信任和尊重。周三的上午，記者跟隨該科主任程灝一起，跟診了他的全程。

做該做的手術

“我今年60多歲了，半年前，我的手腕骨折了。到了望京醫院創傷一科，是程主任為我看的病，當時，我心里非常害怕做手術，后來程主任瞧了我的片子說可以保守治療，先用小夾板固定一下看看。”一位來自朝陽區的老大爺告訴記者，現在他的手已經好得差不多了，非常感謝程主任，讓他減少了不必要的痛苦。

“我們的原則就是做該做的手術，即便是采取手術，也多數采取微創手術，盡可能不破壞骨折的血液循環。”程灝說，也有一些需要趕緊手術治療的，比如急性開放性骨折的、需要盡早下地活動的或者活動關節的。選擇保守治療，還是手術治療，主要是看哪個手段更適合病人。

中醫的手術要比西醫早幾千年，早就有麻藥和開顱、刮骨療毒等手術方法記載，但是受各種文化、習俗等多種因素限制，手術學發展不是很快。從手術學科來說，幾百年前，隨著外國人的物和技術發展以及抗菌藥的出現，使得西醫的手術發展非常快。

在創傷一科，他們有著這樣一個理念：做該做的手術，給病人提供一個最好的方法。什么是最好的方法呢？因人而異，每個病人的治療方法不一定都是一樣的，根據每個病人不同情況，選擇采取最恰當的治療方法才是最好的方法。作為醫生就應為病人提供這樣的服務。

在程灝的門診，他的出診臺上放著一疊小宣傳冊子，上面寫著，“在我們的醫學幫助下，您能早日康復，我比您更高興。”這是程灝發自內心的感言。

“我作為醫生只是利用醫學知識和經驗幫助病人選擇治病的方法，但是，治療的好壞，什么時候能好，主要還是在于病人本身。”程灝解釋說，實際上，醫生是在幫助沒有醫學知識的患者選擇和實施恰當的方法，達到康復的目的。

行家看門道

在門診，有一位來自江蘇的患者，鎖骨骨折，做完手術已經半年多了，骨折仍然沒有愈合跡象，仍有一些不舒服的地方，疼痛難忍。

程灝主任在看了他的片子之后，說道：“你這個手術應該不是在我們醫院做的。”該患者說：“是在當地一家醫院做的。”讓記者覺得好奇的是，看片子就知道這么多信息。

事后，程灝告訴記者：“從鋼板螺絲釘的選擇和打法來看，首先肯定不是我們醫院做的，至少不是我本人做的手術。該患者所做的手術，叫鋼板堅強內固定，50年代從歐洲開始興起，也叫做AO理念，它要求骨折鋼板堅強內固定，打的鋼板，螺絲越多越好，越堅強越結實越好。”

程灝說，現在治療這種骨折，已經改成鋼板局部彈性固定。這個患者所使用的鋼板，在鎖骨骨折處，兩端各有三個釘子，復位效果很好，表面上看符合現代鋼板內固定的BO理念。但是如果骨折中間再又加上兩枚螺絲，捆上鋼絲，這就不屬于微創，也不屬于相對固定了，所以就不能叫做生物學固定了，仍然是堅強固定，屬于AO理念。

程灝說，現在AO理念，雖然不能說是被了，但是在逐漸向BO理念轉變。像該患者這樣一個手術，至少是在一家沒有跟進現代治療理念的醫院做的。

過于堅強，為了復位效果滿意，其中多加了一些螺絲釘，再加上鋼絲加強固定，就需要把周圍的軟組織給全部剝開了，這樣既破壞了骨折周圍組織的血液循環，不利于骨折的愈合。從表面影像上來看，好像挺結實，但是由于破壞了血液供應，產生應力遮擋（代替自身生物力）可能愈合則更加緩慢，甚至鋼板斷裂、骨折不愈合。

從AO理論到BO理論

程灝解釋，中醫創傷科，現在主要的理念：突出中醫特色，西醫也不落后，中西并存。以前講都是中西結合，現在中西醫結合的概念也有一些轉變，不是一個簡單的，西醫的就是西醫，中醫的就是中醫，兩種方法都有各自的優勢，看用哪一種方法更加適合。

西醫不是所有問題都能夠解決，當然，中醫也有一些不足。中醫骨傷科是老祖宗留下來的，幾千年的辯證唯物主義的產物，有許多非常科學的東西。我們在工作中，必須要汲取一些優秀的東西，加以繼承和發揚。

中醫骨傷科早就有一套原則和方法。現在西醫的一些治療方法和理念，回過頭來看，逐漸地在向中醫的理念上靠攏。

比如，AO理論到BO理論的轉變。AO理論，強調的是堅強內固定；BO理念，強調是生物學內固定，從這一點來看，非常符合中醫功能復位和相對固定理念。包括傷口軟組織愈合，中醫幾千年就開始講“渨膿長肉”，傷口愈合在有分泌物的情況下，才能夠長得更快一些。過去，西醫一直認為傷口愈合一定要清潔干燥，只是從最近不過十年才剛剛提出“濕性愈合理念”，認識到濕性愈合的重要性。

其實，嚴格意義上來說，中醫和西醫應該是不能夠分家的，只不過從理論體系上有一些區別，所研究的對象都是人類，可能有注重宏觀與微觀的不同。不論是中醫也好，還是西醫也好，怎么樣對病人更合適，那么，我們就采取什么樣的方法，必要的時候，我們中西醫一起都要用上。

我們比西醫來說，多了一些閉合復位手法，小夾板外固定治療骨折等，另外，骨折中醫三期辨證施治，中藥藥配合骨折治療等都是目前西醫無法攀比的有效手段。

理論創新

程灝說，下一步骨傷科要進一步突出中醫特色，特別是把傳統小夾板治療骨折，發揚下去。尚天裕老先生是國內著名骨傷科前輩，是小夾板治療骨折的創始人，小夾板已經使用了幾十年了，上世紀中期深受廣大患者和醫務人員青睞，然而在當今使用的過程中，受年代社會狀況、經濟體制，材料等影響，遇到很多困難，使用上受到夾板設計本身和多方面客觀因素的限制，有些年輕醫生都不會使用了，甚至到了瀕于失傳的境地。

目前，程灝剛剛申請了一個實用新型專利，把尚天裕老先生的夾板，加了一些新的元素在里面，進行了一些改進和技術創新。程灝說，把原來一些弊病，不合理因素，固定不穩妥的地方，糾正過來，彌補了原先的一些缺陷。

而在門診當天，適逢一位30多歲的女性患者，正在使用新型小夾板治療。原來，該患者在一次摔倒的過程中，胳膊著地，整個重力都壓在胳膊上了，導致非常嚴重的粉碎性骨質。經過程灝主任用夾板兩個多月的治療，恢復情況很好。程灝建議該患者，可以間斷地拿掉夾板，做一些功能鍛煉。

還有一個女患者前來復查，當時是脛骨平臺粉碎塌陷性骨折，程灝說“這是一例非常嚴重的粉碎性骨折，關節面已經被壓碎了，按當今的診斷說法可以稱為“復雜難治性骨折”，當時是選擇手術治療。她這個手術在做之前，想象的應該沒有那么好，都碎成了那樣，經過醫生仔細的手術，結果手術后效果比預期要好很多。程灝說，從目前來看，治療效果還是不錯的。

很多人認為，中醫治療骨傷相對便宜，西醫手術治療比較昂貴，一個手術少則幾千元，多則幾萬元。程灝認為，對于醫療方法的評估，不在于價格，關鍵是選擇哪個手術能真正給病人解決和解決多少問題。所以，能夠獲得理想的效果，就是好療法。

程灝

中國中醫科學院望京醫院創傷一科主任，主任醫師，北京中醫藥大學教授。畢業于天津中醫藥大學，對四肢各部位骨折的治療經驗豐富。

骨科與中醫骨傷科區別范文2

[關鍵詞] 肩周炎;針刀療法;關節腔

[中圖分類號] R274.9 [文獻標識碼] A[文章編號]1673-7210(2010)02(b)-083-02

肩周炎是一種常見多發病,以往治療采用手法松動及局部痛點注射等多可收效,但有些病程較長的頑固性病例,使用原有方法見效緩慢,近年我科采用針刀療法配合關節腔注射治療此病收到較好效果,現報道如下:

1資料與方法

1.1一般資料

2000年8月～2008年10月,共收治本病194例,其中,男64例,女130例;年齡28～72歲,平均52.7歲;病程3個月～2年,以上病例隨機分為觀察組110例和對照組84例。

1.2 治療方法

1.2.1觀察組

1.2.1.1針刀松解:患者可取坐位或臥位,暴露患肩,術者在患肩處仔細尋找壓痛點,必要時可活動患肩以找出牽拉疼痛處,一般常見痛點可見于肩前方的肱二頭肌長頭腱鞘處,肩外側的肩峰下、三角肌下滑囊處,肩后的岡上、下肌與大小圓肌附著處等。采用朱氏針刀依操作常規消毒鋪巾,切開剝離病變處的粘連[1]。術后可局部由原針孔注入藥物:曲安奈德注射液10 mg(昆明積大生產同息通、下同),2%利多卡因注射液2 ml、Vit B12注射液0.5 mg,壓迫針眼片刻,貼上創可貼。每次可做2個痛點,同一點施術間隔5～7 d,每點最多做3次治療。

1.2.1.2關節腔注射:可與針刀松解同時進行,耐受差者也可隔日進行。選用藥物為曲安奈德注射液10 mg,2%利多卡因注射液3 ml,Vit B12注射液0.5 mg,加生理鹽水至15 ml。取肩鎖關節內下方1 cm處關節間隙進針,深度3～4 cm,回抽無血,緩慢推注,注藥時阻力應較小。患者可有酸脹感,但不應有上肢麻木感[2]。此法除止痛消炎外,也可利用藥物容積沖擊來解除部分關節囊粘連。術后可接做各方向關節活動,在患者達不到的角度醫者稍加力,有時可聽到粘連處的撕裂聲。此法每周1次,3次為1個療程,療程結束后評定療效。

1.2.2對照組

1.2.2.1 痛點注射:痛點選擇及藥物同觀察組針刀療法,區別僅為未做針刀松解。每次可選擇2～3點注射,同一點注射間隔1周,最多注射3次。

1.2.2.2 傳統手法:包括點按局部穴位,一指禪撥痛點,云手旋轉,各方向關節活動,手法前后均以按、揉、推、抖等手法進行放松。每日施行1次,20 d為1個療程[3]。

1.3療效評定標準

治愈:疼痛消失,肩功能恢復正常;顯效:疼痛明顯減輕,前舉、外展提高30°,后伸提高10°,內外旋提高10°;好轉:疼痛減輕,前舉、外展提高10°,后伸提高5°,內外旋提高5°;無效:與治療前相比無明顯改善。總有效=治愈+顯效+好轉。

1.4統計學方法

兩組總有效率及治愈率比較采用χ2檢驗,以P

2結果

兩組總有效率及治愈率比較,均有非常顯著性差異(P

表1 兩組結果治愈率對比[n(%)]

3討論

肩周炎雖為一種自愈性疾病,但其病程往往較長,嚴重影響患者的生活質量。肩周炎的病變機制,一般認為是機體組織退變、內分泌失調、外傷勞損、感受寒濕等因素,導致關節囊及周圍的肌肉、肌腱、滑囊等軟組織發生慢性無菌性炎癥,引起肩周疼痛、活動受限。現在有許多學者認識到,“肩周炎”是一種古老而不確切的稱呼,沒有指明確切的病理變化,只是臨床習慣的叫法[4]。實際上,在診斷為“肩周炎”的病例中,大多是可以明確定位診斷的,如有近一半的病例是由于肱二頭肌長頭腱鞘炎所引起,另外多見的病變還有岡上、下肌腱炎,肩峰下、三角肌下滑囊炎,肩撞擊綜合征等,真正單純由于關節囊粘連導致的“凍結肩”大概不到十分之一[5]。當然,上述各具體病變有時會在同一位患者身上發生,這就需要我們仔細檢查,區別對待,做好鑒別診斷,尤其是其他原因導致的肩痛,如頸椎病產生的肩、臂部放射痛。筆者體會到,早期病例多以局部炎癥改變為主,這時用局部痛點注射及手法按摩可消炎、解痙、止痛,也有的作者采取臭氧注射的療法[6-8]。但許多患者病程較長,已在炎癥基礎上產生了局部粘連,這時就需要區分患者情況選用針刀松解及關節腔注射法,并配合術后的松動手法,即使不用臂叢麻醉或硬膜外麻醉,只要手法輕巧準確,同樣能起到迅速而徹底的解除關節內外粘連的作用,兩組數據的對比說明此法的效果是明顯的,但是對發病機制及局部解剖要熟悉,才能避免造成多余的損傷。

[參考文獻]

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骨科與中醫骨傷科區別范文3

與西醫院校不同，中醫院校外科學分為西醫外科學和中醫外科學兩門學科，相應存在西醫外科學教研室和中醫外科學教研室。因此，中醫院校內西醫外科學的教學從學科設置、師資、教材選擇及學生興趣等方面與西醫院校存在差別。茲淺析如下，以找出存在的問題，提出解決方案，促進教學改革和創新，增強教學效果。

1西醫外科學學科設置

在中醫院校中，中醫外科學由于突出了中醫特色而占有優勢，西醫外科學相對處于弱勢，位置比較尷尬。比較西醫院校的外科學組成，中醫院校西醫外科學中的骨科部分單獨劃分出為骨傷科學，加上肛腸疾病和脈管疾病等具有中醫特色的內容在中醫外科學中講述，西醫外科學不再重復或將內容刪減，造成西醫外科學在內容量上顯得更加單薄，在教學體系中的比重下降。然而，外科在任何一家醫院中都占有舉足輕重的地位，無論在業務量還是醫療收入，都占有較大的比重。而且，無論中醫醫院還是西醫醫院，外科仍采用的是以現代醫學為主的治療手段，這樣就凸顯了中醫院校西醫外科學教學與臨床需要嚴重失衡的矛盾。目前，醫院的外科科室仍然是按傳統劃分:普通外科、骨科、神經外科、心胸外科、泌尿外科、整形(燒傷)外科及小兒外科，醫療力量雄厚的醫院更加細化為甲(狀腺)乳(腺)科、肝膽外科、胃腸外科、血管外科及脊柱外科等。與醫院外科發展日益壯大相對的是，中醫院校西醫外科學發展的滯后。這種情況使西醫外科教學不能滿足臨床需要的問題日益突出。中醫院校西醫外科學的教學規劃在內容編排、課時分配及實踐操作安排等方面都與西醫院校外科學有差距。西醫院校外科學為主干學科，而中醫院校只有中西醫結合專業和部分七年制學習西醫外科學，而絕大多數專業只開設外科學總論。西醫院校外科學理論教學往往是總論部分在學校講授，各論部分在學生見習期間臨床學習，這樣能夠加深學生的印象，取得更好的教學效果。西醫院校開設動物外科課程，可以更好的幫助學生熟悉和掌握無菌操作及一些基本的外科技術，讓學生體會在活體操作的感覺，增強學生動手操作能力，鍛煉了臨床工作中必備的心理素質。但目前絕大多數中醫院校仍然未開設動物外科學。我們認為，西醫外科學在中醫院校的重視程度應逐步提高，各專業的教學時數應增加。效仿西醫院校在見習前，安排開設動物外科學，增強學生實踐操作能力。開設床邊教學，在外科學各論部分進行臨床實踐代教，可以更好的實現理論與實踐相結合，增強教學效果，滿足臨床需要，實現教學目標。

2師資建設

中醫院校外科學教研室分為西醫外科學教研室和中醫外科學教研室。對比中醫外科學教研室，西醫外科學教研室在師資人數、教研室規模上都相形見絀。教學課時的完成需依靠大量臨床教師。但由于臨床教師主要工作重心在臨床，加之目前政策的導向是以科研成果作為晉升職稱的硬指標，所以造成了教師工作以醫、研、教的排序，對教育教學的重視程度不夠。我們認為，兩種師資體制應取長補短，發揮各自的優勢。學院編制教師的主要優勢是教學質量保障和教學經驗豐富，教學意識更強;臨床教師的優勢在于臨床經驗，豐富。學院編制教師應加強臨床工作，豐富臨床經驗;臨床教師應定期參加教育教學培訓，定期考核，提高自己的教學水平。這樣就可以培養一大批既有豐富臨床經驗，又具備較高教學水平的臨床教師，有效擴大了西醫外科學的師資力量。同時，有關主管部門可以在職稱評定方面，適當增加對教學貢獻的傾斜，這樣適度的政策引導有利于教師對教學的重視，提高教學質量。

3教材選擇

目前，中醫院校的西醫外科學教材選擇比較單一，主要以新世紀全國高等中醫藥院校規劃教材《西醫外科學》(李乃卿主編，中國中醫藥出版社出版)為主要的教材。同西醫院校外科學教材相比，具有突出中醫藥特色的優勢及特點，但存在內容偏少，且新進展不足的缺點。以心肺復蘇為例，2005年美國心臟協會(AHA)心肺復蘇及心血管急救指南新標準已改為:現場急救胸外按壓與人工呼吸的比例為30︰2，以≥100次/min的頻率進行胸外按壓，而現有教材胸外按壓與人工呼吸比例仍為15︰2，胸外按壓頻率為80～100次/min［1］。目前，臨床上普遍應用的手術衣是包背式手術衣，同教材的交叉式手術衣在穿衣方法上有所區別，這就造成學生的困惑，增加了教師教授的難度［2］。與此相對，西醫院校的外科學教材更加注重因材施教，有五年制、七年制、八年制及研究生教材，可以根據學生的不同層次選擇教材種類，而且教材內容更加翔實，分章更加清晰，更貼近于臨床，易于學生理解。同時，現代外科治療方法突飛猛進，新技術、新進展、微創治療等新的知識應體現在西醫外科學的教材之中。教師可根據實際情況，不斷將臨床上的治療進展補充講授，必要時可自編教材，增開選修課時(如外科學進展)，豐富教學內容，擴展學生的思維，提高學生的興趣，減少因教材內容更新不及時帶來的不足。

4學生學習興趣

良好的興趣是成功的前提。我們觀察發現，西醫院校男學生比較熱衷于外科的學習，臨床見習、實習時對外科比較偏重，就業方向選擇上也是如此。與之相比，中醫院校由于突出了辨證施治等中醫臨床思維，學生更加偏重于內科疾病的學習，而對外科這種偏重技能的學科興趣較小。另外，現行就業政策也對研究生階段的志愿選擇有很大影響。我們曾調查7年制中西醫結合專業學生的選報志愿，大部分為中醫內科、中醫婦科及中醫皮膚科等學科，主要原因則是對中醫內科感興趣，少數對外科有興趣的學生也因就業受影響(中醫和中西醫結合專業在西醫院外科不允許執業)而放棄外科方向。這種情況在歷年研究生選擇專業時已得到證實:中西醫結合外科及中醫外科學報考學生的比例明顯少于中醫內科、中醫婦科及中醫兒科。以南京中醫藥大學研究生院為例，2009年報考中醫內科331人，上線149人，而報考中醫外科87人，上線47人;2012年中醫內科上線人數149人，中醫外科和中西醫結合外科共上線31人。而我院外科每年招收的新職工90%以上來源于西醫院校。長此以往，必將造成中醫院校培養的具有中醫知識的外科人才逐漸減少，中醫醫院的外科更多是西醫院校的畢業生，使中醫醫院外科逐漸失去中醫特色，影響了中醫院校外科教育，阻礙了中醫院校外科學的發展。在教學過程中，應多結合臨床病例，配合使用多媒體，切實讓學生感受到西醫外科治療在醫學中的重要性，提高學生的重視程度。舉辦一些西醫外科技能操作比賽，從比賽中可以發現一些心理素質好、手法靈活的學生給予嘉獎鼓勵，來引導一些適合外科工作的學生關注外科學。也鼓勵學生利用業余時間到臨床中實習、見習，體會外科工作的性質和對疾病的功效，吸引有志投身外科工作的學生，堅定他們的信心。

5教學及教學方法改進

骨科與中醫骨傷科區別范文4

蛋白質作為細胞中的活性大分子，其表達水平的改變與疾病、藥物作用或毒素作用直接相關。蛋白質組學的理論和技術的發展與完善使人們從組織或細胞的蛋白質整體水平去認識疾病成為可能。這一技術將是發現疾病標志物、鑒定和評價藥物靶蛋白等十分有用的工具。

1 蛋白質組學的概念及研究意義

蛋白質組(Proteome)與蛋白質組學(Proteomics)的提出至今已有10年左右的時間。蛋白質組一詞，源于蛋白質(protein)與基因組(genome)兩個詞的雜合，意指“一種基因組所表達的全套蛋白質”，即包括一種細胞乃至一種生物所表達的全部蛋白質。蛋白質組是一個動態的概念，在同一個機體的不同組織和細胞中不相同，在同一機體的不同發育階段，不同的生理狀態下，乃至不同的外界環境下也不相同。各種復雜的生命活動，都是特定蛋白質群體在不同時間和空間不同組合的結果。

蛋白質組學則是大規模、系統地在蛋白質組整體水平進行研究的一門新興學科［1］，包括研究細胞內動態變化的蛋白質組成成分、表達水平和翻譯后修飾狀態、蛋白質之間的相互作用和聯系。蛋白質組學可分為比較蛋白質組學和表達蛋白質組學［2］。前者通過比較分析不同生理、病理條件下細胞、組織或體液中表達的蛋白質異同，篩選出許多具有臨床標志意義的蛋白質關鍵分子。后者目的在于建立蛋白質表達譜和修飾譜的數據庫、細胞定位圖、蛋白質作用連鎖圖，探索和闡明生命現象的本質。將蛋白質組表達信息與基因組信息有效結合，這既可顯示蛋白質翻譯后加工修飾方式，又可克服分離蛋白質與理論蛋白質不一致的局限，從而使病理生理機制的解釋更為完全和準確。

2 骨關節疾病的蛋白質組學研究

各類骨關節疾病，包括退行性關節炎、滑囊炎、滑膜炎、肩周炎、風濕性關節炎、類風濕性關節炎、股骨頭壞死等，都是較難治愈的慢性疾患，患病后關節腫、痛、積液、僵直、增生、骨刺，活動艱難甚至導致殘疾!蛋白質組學的發展將極大的促進骨關節疾病的研究，雖然目前還處于起步階段，但從基因組向蛋白質組方向轉變不失為今后骨關節疾病研究的一種新模式。

2.1 骨細胞水平的蛋白質組研究 間充質干細胞(mesenchymal stem cells，MSCs)是一群具有向成骨細胞、軟骨細胞和脂肪細胞分化能力的干細胞，為骨組織的修復與替代提供了一個嶄新的領域，但有關MSCs定向分化的分子機制尚不清楚。Seshi［3］應用熒光差異凝膠電泳(difference gel electrophoresis，DIGE)對正常與白血病患者的骨髓間充質干細胞進行研究，在pH 4.6～7.0范圍內檢測出約5000個蛋白質斑點，隨后應用基質輔助激光解析電離串聯質譜(matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometry，MALDI-MS／MS)鑒定出128個差異蛋白，其中72個差異蛋白在白血病患者的骨髓間充質干細胞中表達增高或降低1.25倍以上。Foster等［4］運用MS方法比較得出人MSCs定向成骨細胞分化前、后的463個蛋白，包括已知的人MSCs細胞表面抗原(CD71、CDl05、CDl66等)，膜相關蛋白，細胞黏附分子和受體等。其中成骨細胞分化前有83個蛋白表達增高2倍以上，有21個蛋白表達下降2倍以上。劉元林等［5］采用定向成骨分化誘導培養體系誘導MSCs定向成骨細胞分化，對未分化與分化后的MSCs細胞總蛋白進行提取，經雙向凝膠電泳(two-dimensional gel electrophoresis，2-DE)找到38個蛋白差異點，基質輔助激光解析電離飛行時間串聯質譜技術(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry，MALDI-TOF-MS)鑒定出23個差異蛋白分子表達。Zhang等［6］經一系列培養誘導hMSC分化為成骨細胞，在前3～7 d hMSC與成骨細胞的蛋白表譜類似，運用2-DE檢測出102個表達改變2倍以上的蛋白斑點，MALDI-TOF-MS鑒定出52個差異表達蛋白。涉及新陳代謝、信號轉換、核酸復制、鈣結合蛋白、蛋白折疊等。這一研究為闡明成骨細胞分化的整個蛋白表達情況提供了很好的基礎。可見，蛋白質組學方法可用于高通量篩選、研究MSCs定向分化過程中細胞內可能具有調控作用的重要蛋白分子。另有研究者［7］對滑膜細胞進行原代培養，鑒定滑膜細胞類型后提取蛋白進行2-DE分離，比較類風濕性關節炎(rheumatoid arthritis，RA)與骨關節炎(osteoarthritis，OA)成纖維樣滑膜細胞(fibroblast-like synoviocytes，FLS)蛋白酪氨酸磷酸化狀態的差異。結果顯示FLS蛋白酪氨酸磷酸化在RA較OA明顯增多，其中以相對分子質量42×103～95×103間蛋白酪氨酸磷酸化位點居多，兩者具有非常顯著性差異。Dasuri等［8］也對RA患者滑膜液中的FLS進行研究，通過2-DE和MS已識別鑒定出254種蛋白質。Dotzlaw等［9］通過比較健康人和RA患者的外周血單核細胞的蛋白質2-DE圖譜發現，18種蛋白質在RA患者中表達高于健康人2倍或更多。同時發現11種蛋白質在健康人(對照組)中表達高于RA患者2倍或更多。這些表達不同的蛋白質經MALDI-TOF-MS法鑒定，其中有一些過去已被顯示在RA的發病機制有潛在的作用，因而認為這樣的蛋白質表達圖譜的比較可能具有診斷學價值。Catterall［10］發現軟骨細胞分泌的蛋白聚糖(proteoglycans，PGs)和葡萄糖胺聚糖(glycosaminoglycan，GAG)對2DE聚焦有明顯的干擾，在運用不同方法去除GAG影響后，行2DE并結合電噴霧電離質譜(electrospray ionization mass spectrometry， ESI-MS)，對IL-1和制瘤素M刺激軟骨細胞分泌蛋白的改變進行研究，鑒定出8個有意義的蛋白。該研究者認為蛋白質組學方法為研究軟骨細胞分泌蛋白提供了更有價值的蛋白質加工相關信息。

2.2 血清和骨關節液的蛋白質組研究 血液樣本信息含量十分豐富，標本易于采集，是蛋白組學主要的研究對象。因此，利用血液標本作骨關節相關疾病的研究較多。Xiang等［11］對OA和RA血清蛋白質組進行比較，找到19個差異蛋白質，其中一個被鑒定為磷酸丙糖異構酶(triose phosphate isomerase，TPl)，認為對TPI的自身抗體有可能被用作為OA的診斷標志物。Tan等［12］應用2-DE結合MALDI-TOFMS分析方法，對股骨頭壞死(osteonecrosis of the femoral head，ONFH)和正常人血清蛋白質組學進行了比較，找到7個差異表達蛋白質，然后進一步應用酶聯免疫技術測定6個差異蛋白在ONFH，OA、RA和骨折病人血清中的表達，結果發現有4個差異蛋白在ONFH與其他3種病例中的表達有區別。Saulot等［13］應用2-DE和MS及免疫印跡方法(其所用抗原為重組蛋白)研究255例患有早期關節炎的患者(145例RA患者、70例非RA風濕性疾病患者和40例未定性關節炎患者)的血清，發現抗11-烯醇化酶的自身抗體存在于早期RA患者的血清，此抗體對RA可能具有診斷和預后價值。對于關節軟骨損傷性疾病，由于任何軟骨源性標志物分子在血清中的濃度不可能客觀地反映某個指定關節軟骨損傷的改變，因此關節軟骨標志物血清濃度與特定關節間存在嚴重的局限性，而檢測指定關節滑液將可能解決這一問題。Sinz等［14］應用2-DE和MS研究RA、反應性關節炎和OA患者的血漿及滑膜液的蛋白質表達情況，結果顯示鈣粒蛋白B僅在RA患者的滑膜液中表達，血清淀粉樣A蛋白在RA患者的滑膜液和血漿中均可檢測到，但在OA患者中未檢測到。Robinson等［15］用蛋白質芯片技術比較RA和OA患者的滑膜液蛋白質圖譜，發現許多可用于鑒別診斷的候選生物標志物，其中，相對分子質量為10 850的蛋白質峰是RA中表達比較明顯的標志物。Drynaa等［16］應用2-DE結合MS分析方法分析和鑒定了RA患者和OA患者的血漿及滑膜液的蛋白質，結果是鈣結合蛋白A9(S100Ag)被鑒定為滑膜液中明顯的標志蛋白。隨后通過應用酶聯免疫技術測定了RA、OA及其他炎癥性關節疾病患者的血漿和滑膜液中鈣結合蛋白A8／A9(S100A8／A9)雜絡物的水平，結果發現S100A8／A9雜絡物的血漿水平和滑膜液中的水平相關性很好。因此，測定血漿中的S100A8／A9雜絡物可以用來區分RA患者與其他炎癥性關節病患者(包括OA患者及正常對照組)。楊波等［17］建立了正常組、牛II型膠原與完全弗氏佐劑誘導的膠原誘導性關節炎(collagen induced arthritis，CIA)模型組大鼠關節滑膜的的2DE圖譜，平均點數為(10 204±40)個蛋白質點。應用MALDI-TOF-MS鑒定兩組滑膜差異表達大于2倍的蛋白質點35個。這些差異表達蛋白質的功能涉及物質代謝、能量產生、物質轉運、抗氧化、信號轉導及細胞骨架蛋白，它們可能以不同的方式參與了病變過程，為揭示CIA滑膜病變的機制及RA的發病機制提供了新的線索。而且用蛋白免疫印跡法(western blotting)進行膜聯蛋白I(annexin l)、醛縮酶A(aldolase A)的表達驗證與2-DE結果一致，表明Annexin l aldolase A可能與CIA的關節滑膜病變有關。

血液標本易獲取，但其中蛋白質組成成分異常復雜，并且高、低豐度蛋白質含量的動態范圍非常寬(可達到1010數量級)。在如此復雜的血液蛋白質組中，必須采用合理步驟盡量去除白蛋白和免疫球蛋白等高豐度蛋白質，這樣才可以實現富集低豐度蛋白質，發現低豐度蛋白質中的候選標志物。骨關節液體如滑液，其標志物分子比血清標志物更能客觀地反映所檢測關節的病變情況，但是滑液難獲取且濃度也受諸多因素的影響，如改變同時出現在炎癥或關節運動之后，故難以得到精確的數據。每種標本各有利弊，在臨床實踐中到底采取哪種方法進行相關研究應根據實際情況而定。

2.3 骨組織水平的蛋白質組學研究 劉建仁等［18］建立大鼠激素性骨壞死模型，分別提取正常組、激素性骨壞死組和中藥治療組的大鼠股骨和肱骨組織的總蛋白，進行2-DE和MALDI-TOF-MS質譜分析，鑒定出3個差異蛋白，分別為阻凝蛋白重鏈ⅡB、磷脂谷胱甘肽過氧分酶及泛素化酶E2(MW：17 kd)，初步認為這三種蛋白質在激素性骨壞死的發病及中藥治療過程中發揮著重要調控作用。骨組織是一種比較特殊的生物標本，又是研究骨關節疾病必不可少的實驗材料，因此，骨組織蛋白提取方法的優化對于骨組織蛋白質組學研究具有重要意義。Jiang［19］等首先將狗顱骨組織用鹽酸溶液溶解，然后通過3種不同提取液提取蛋白，將鹽酸溶液與提取液中的蛋白收集起來行二維液相色譜串聯質譜(two-dimensional，high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry，2D-LC-MS／MS)，鑒定出2 479個蛋白質點，其中包括40種骨特有蛋白和15種潛在的蛋白生物標志物。這一方法大大提高了骨組織蛋白的提取效率。然而目前以骨組織為樣本進行蛋白質組學研究的相關報道仍較少，而對于軟骨組織的研究則相對較多。Hermgansson等［20］對12個OA患者不同關節(膝、髖、肩)和14個非OA者的軟骨組織進行培養，在對軟骨細胞分泌的PGs運用沉淀法去除后進行2-DE，50～100個結合了放射性標記物的蛋白點被檢測，MS鑒定出的19個差異蛋白。其中H型膠原復合物在OA軟骨組織中表達明顯上調，相對于嬰兒和青少年，成人非OA軟骨組織中該蛋白幾乎無表達。研究者認為H型膠原復合物在成熟骨骼中表達下調，而當發生骨關節炎時將被再活化起到修復軟骨的作用。Frederic等［21］將3名關節置換者捐獻的新鮮軟骨組織，經過切割、絞碎后用無血清培養基培養，48 h后收集培養物進行2-DE和串聯質譜，鑒定出43個蛋白，部分是已有報道的軟骨細胞分泌蛋白，如YKL-39、骨保護素等；部分未在軟骨細胞相關研究中報道，如血清淀粉樣P物質，維生素D結合蛋白，血小板生成素，纖維蛋白素原，血管生成因子，肌動蛋白等。該研究者認為對于系統研究人骨關節炎軟骨分泌或釋放的蛋白，尋找到新的診斷標記物，蛋白質組學方法無疑提供了一種有力工具。軟骨組織中豐富的PGs和膠原等細胞外基質，對2-DE聚焦和小分子蛋白的檢測有影響。Vincourt等［22］利用基質的生物學特性改進傳統方法進行軟骨組織蛋白提取，實驗過程中盡量保持基質的原始狀態避免機械浸出，將軟骨組織在低溫(-30℃)切片機上切割成10 μm左右大小，同時在提取液中加入高濃度氯化鈉(不超過500 mmol/L)，在膠原交聯狀態下促使軟骨組織其他組分溶解，并且采用環丙基甲醇(cyclopropyl-carbinol，CPC)選擇性沉降法去除PGs。但因CPC是離子型去垢劑，也會影響聚焦，因此最后用甲醇／氯仿在室溫下沉淀純化提取物中的CPC，同時也去除了核酸和脂質。在采用改進方法提取軟骨組織蛋白后進行2-DE和銀染，獲得了600多個蛋白斑點，經MALDI-TOF-MS鑒定出127種不同功能蛋白質。由此可見，通過改進獲得快速、有效、恰當的軟骨及骨組織蛋白提取方法，將有利于骨組織蛋白質組學研究。

3 結語

蛋白質組學研究平臺的建立為骨關節疾病的研究提供了一個新的契機。但由于病因不清、病程緩解與復發交替的動態變化過程和復雜的臨床分型，給研究增加了難度。因此，該技術在這一領域的應用目前還處于比較膚淺的階段，主要用于蛋白質組表達模式分析，真正涉及功能蛋白質組的研究還很少，與實際應用的差距則更遠。相信在骨關節疾病專家與基礎和應用基礎科學家的共同努力下，蛋白質組學在骨關節疾病研究領域將有十分廣闊的應用前景。可以預見，隨著方法的不斷改進與研究的不斷深入，今后將能借助作為骨關節疾病診斷的一組或一群蛋白質標志物，來進行臨床的協助診斷。

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