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干細(xì)胞在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用范文1

[關(guān)鍵詞] 骨組織工程；臍帶；間充質(zhì)干細(xì)胞

[中圖分類號(hào)] R329 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2014）10（c）-0195-02

骨折及骨科疾病是臨床中較為常見的病癥，為患者帶來了一定身體痛苦與經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。目前臨床中針對骨折與骨科疾病的治療，主要采用自體移植、人工植入及異體移植等，但上述方式均存在一定缺陷。MSCs具強(qiáng)大的多向分化功能，能夠誘導(dǎo)分化成骨細(xì)胞，幫助提升骨折或骨科疾病的治療效果。在此背景下，對骨組織工程中臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的應(yīng)用進(jìn)展進(jìn)行分析具一定現(xiàn)實(shí)意義。

1 MSCs的分離與培養(yǎng)

1.1 MSCs的分離

吉林大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)院的楊晨[1]對MSCs的分離進(jìn)行了研究，首先在手術(shù)室收集得到足月分娩的、健康的、新鮮的胎兒臍帶，將其放于融入了濃度為0.1%雙抗的氯化鈉溶液中，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)對臍帶進(jìn)行間充質(zhì)干細(xì)胞分離。其次，將臍帶取出，浸泡于酒精內(nèi)約5 min，后以碘酒進(jìn)行充分擦拭消毒，置于氯化鈉溶液下反復(fù)清洗，直至血塊完全沖掉。將臍帶剪至2 cm/段的大小，以鑷子固定住臍帶邊緣，用剪刀小心剔除臍帶外膜，將內(nèi)含的華氏膠組織分離出來。取膠完成后接著剔除臍帶內(nèi)的血管，再次以氯化鈉溶液沖洗，或直接在融入了濃度為0.1%雙抗的氯化鈉溶液中進(jìn)行，以保證操作的無菌性。

1.2 MSCs的培養(yǎng)

武漢大學(xué)中南醫(yī)院的胡培[2]等人對MSCs的分離、培養(yǎng)進(jìn)行了研究，其MSCs分離操作與楊晨基本相同，華氏膠組織成功分離后，將其放入α-MEM培養(yǎng)液（內(nèi)涵100 U/mL鏈霉素與青霉素、10%胎牛血清）中，在CO2濃度為5%、箱內(nèi)溫度為37℃的培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，根據(jù)細(xì)胞生長情況，以0.25%胰蛋白酶進(jìn)行傳代培養(yǎng)。北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院的李鐸[3]選擇將切成管狀的臍帶繼續(xù)切片，再將片狀臍帶組織切割致2～3 mm3，利用吸管逐一將碎狀臍帶組織植入T75培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)瓶已預(yù)先由D/F12培養(yǎng)基（內(nèi)含有濃度為20%的FBS）包被完成，植入密度為每瓶20～25塊碎狀臍帶組織；再將培養(yǎng)瓶置于溫度為37℃，CO2濃度為5%的溫箱中，定時(shí)向箱內(nèi)補(bǔ)充培養(yǎng)基（1 mL/d），每隔3 d全量換液。

哈爾濱第五醫(yī)院手外科分院的聶廣辰[4]等人對臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞生長曲線的繪制進(jìn)行了研究，在細(xì)胞傳代培養(yǎng)至第3代時(shí)將其分別種植于6孔板的其中4孔中持續(xù)培養(yǎng)8 d，按MTT法對細(xì)胞的增值情況進(jìn)行測定，當(dāng)細(xì)胞增值密度飽和，細(xì)胞進(jìn)入平頂期時(shí)停測。卓峰等人[5]在細(xì)胞增殖特定于曲線繪制的研究中提出，現(xiàn)階段培養(yǎng)MSCs普遍采用的方法包括酶消化法與培養(yǎng)法，對MSCs細(xì)胞進(jìn)行初代培養(yǎng)，該過程消耗約2 w，當(dāng)細(xì)胞融合率致80%時(shí)開始傳代培養(yǎng)，在細(xì)胞種植2～4 d時(shí)增殖趨勢最盛，傳至第15代時(shí)增殖速度開始減慢，至20代時(shí)增殖基本結(jié)束。早期的細(xì)胞增殖的潛伏期在植入后的36 h內(nèi)，之后開始了成對增長（5～6 d），增殖密度達(dá)到飽和后進(jìn)入到平頂期，綜上可知細(xì)胞增殖曲線呈“S”型。

2 MSCs的特征

2.1 細(xì)胞形態(tài)與生長特征

第二軍醫(yī)大學(xué)的胡凱猛[6]在顯微鏡下對MSCs的形態(tài)進(jìn)行觀察，按貼塊法獲取初代細(xì)胞后對其進(jìn)行種植，4～5 d后即可在貼塊下方觀察到沿瓶底生長的hUMSCs，種植7 d后能夠觀察到細(xì)胞數(shù)量不斷增多，主要呈小梭形及小三角形，繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞漸成集落狀生長，且生長狀態(tài)較為均衡，邊界清晰，伴有生長暈。酶消化法培養(yǎng)下初代細(xì)胞生長速度較培養(yǎng)法快，通常2～3 d后即在瓶底出現(xiàn)細(xì)胞，7 d后由小梭形及小三角形變?yōu)槎嘟切巍⒓忓N形，且生長迅速，集落生長呈緊靠型。14～15 d后達(dá)到約85%的融合。MSCs胞漿較少，小梭形的形態(tài)較為顯著，細(xì)胞核周的顆粒物質(zhì)較少，消化傳代完成后細(xì)胞解除集落樣生長，且分布均勻。

2.2 細(xì)胞免疫學(xué)特征

呂鵬飛等人[7]在關(guān)于細(xì)胞免疫學(xué)特征的研究中提出，MSCs的免疫學(xué)優(yōu)勢顯著，主要表現(xiàn)在其可以脫離免疫抑制作用而沖破MHC屏障，將細(xì)胞植入遠(yuǎn)交動(dòng)物體內(nèi)。在UCMSC的免疫學(xué)特征分析中，證實(shí)其對人外周血單核細(xì)胞、鼠脾細(xì)胞及純化T細(xì)胞等免疫細(xì)胞具有抑制作用，從而減緩其增殖速度。毛希宏[8]的相關(guān)研究證明MSCs表面的抗原存在非專一性，主要包括細(xì)胞因子與生長因子受體類、粘附分子類、整和素家族成員類與其他分子類等四大類，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明UCMSCs中，CD29、CD73、CD44、CD13、CD105的陽性率超過90%，而CD134、CD45、CD11b則為陰性，在23代內(nèi)的傳代培養(yǎng)中，各類細(xì)胞因子無明顯差異，證明UCMSCs在經(jīng)過多代培養(yǎng)之后免疫學(xué)性質(zhì)較為穩(wěn)定。

2.3 細(xì)胞的誘導(dǎo)分化特征

hUCMSC的誘導(dǎo)分化能力較強(qiáng)，能夠?qū)崿F(xiàn)多向分化，包括內(nèi)胚層、中胚層與外胚層。在張亞斌等人[9]的細(xì)胞誘導(dǎo)分化體內(nèi)研究中，證實(shí)hUCMSC能夠分化成為內(nèi)皮細(xì)胞、心肌細(xì)胞、骨骼細(xì)胞、多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等，而在細(xì)胞誘導(dǎo)分化體外研究中，還發(fā)現(xiàn)hUCMSC可分化為成骨細(xì)胞、肝細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、胰島樣細(xì)胞、生殖細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞等，在研究hUCMSC分化成為成骨細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)在誘導(dǎo)過程中hUCMSC的ALP活性提升，且鈣結(jié)節(jié)與鈣沉積現(xiàn)象明顯，證明其具成骨細(xì)胞的誘導(dǎo)潛能。上述研究結(jié)果表明，hUCMSC誘導(dǎo)分化功能強(qiáng)大，在臨床中的應(yīng)用價(jià)值與應(yīng)用范圍明顯優(yōu)于造血干細(xì)胞。

3 討論

骨組織工程是近年來臨床新興的學(xué)科，其中胚胎干細(xì)胞作為骨組織工程研究的熱點(diǎn)與重點(diǎn)，受到了臨床醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注。通過上述研究可知，MSCs分化潛能較高，在軟骨、成骨、韌帶、肌腱、肌肉、神經(jīng)、心肌、肝等組織中均具誘導(dǎo)分化潛能，臨床應(yīng)用前景廣闊。李素萍等人[10]相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，在標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境下，MSCs能夠沿培養(yǎng)瓶進(jìn)行增值，可以表達(dá)CD44、CD105及CD90，但不能表達(dá)HLA-DR、CD34及CD45，在體外培養(yǎng)時(shí)表現(xiàn)出成骨細(xì)胞的誘導(dǎo)分化潛能。

在此背景下通過改進(jìn)現(xiàn)有MSCs誘導(dǎo)分化為成骨或軟成骨細(xì)胞的培養(yǎng)方式，或在已知干細(xì)胞的基礎(chǔ)上找尋新型干細(xì)胞，以提升胚胎細(xì)胞在骨組織工程研究中的合適度，成為目前國內(nèi)外相關(guān)研究的探索目標(biāo)。在現(xiàn)代生物科技快速發(fā)展的時(shí)代背景下，學(xué)者們一定可以尋找到理想的培養(yǎng)途徑或干細(xì)胞類型，不斷推動(dòng)骨組織工程的發(fā)展前進(jìn)。

[參考文獻(xiàn)]

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干細(xì)胞在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用范文2

【關(guān)鍵詞】流式細(xì)胞術(shù)；臨床；進(jìn)展

流式細(xì)胞術(shù)(flowcytometry,FCM)是20世紀(jì)70年展起來的對單細(xì)胞定量分析的一種新技術(shù)。它借鑒了熒光標(biāo)記技術(shù)、激光技術(shù)、單抗技術(shù)和計(jì)算機(jī)技術(shù),具有極高的檢測速度與統(tǒng)計(jì)精確性,而且從單一細(xì)胞可以測得多個(gè)參數(shù),為生物醫(yī)學(xué)與臨床檢驗(yàn)提供了全新視角和強(qiáng)有力手段[1]。目前,隨著單克隆抗體技術(shù)的發(fā)展,流式細(xì)胞儀檢測技術(shù)已經(jīng)廣泛使用在基礎(chǔ)研究和臨床實(shí)踐的各個(gè)方面,發(fā)揮著重要作用。本文就其在臨床上的應(yīng)用綜述如下。

1 流式細(xì)胞術(shù)在免疫學(xué)中的應(yīng)用

FCM可以進(jìn)行淋巴細(xì)胞亞群分析,可同時(shí)檢測出一種或幾種淋巴細(xì)胞表面亞群分析,將不同的淋巴細(xì)胞亞群區(qū)分開來,并計(jì)算出它們相互間的比例。通過對患者淋巴細(xì)胞各亞群數(shù)量的測定了解淋巴細(xì)胞的分化功能,鑒別新的淋巴細(xì)胞亞群。更重要的是通過研究大多數(shù)疾病的特異性淋巴細(xì)胞亞群或某些細(xì)胞表面標(biāo)志的存在、缺乏、過度表達(dá)等,對一些疾病,如免疫性疾病、感染性疾病、腫瘤等診斷、治療、免疫功能重建和器官移植監(jiān)測等有重要的臨床意義。如HIV主要侵襲CD4+T細(xì)胞而導(dǎo)致CD4淋巴細(xì)胞減少,CD4/CD8淋巴細(xì)胞比值下降,為艾滋病的診斷和治療提供依據(jù)[2]。在其它免疫功能性疾病的診治方面如系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者的淋巴細(xì)胞變化可反映該病的活動(dòng)情況和器官侵犯程度,伴有嚴(yán)重腎臟損害的SLE患者可出現(xiàn)低CD4+、高CD8+的現(xiàn)象[3]。此外,FCM可以用來進(jìn)行組織相容性抗原(HLA)群體分析;HLA-B27抗原陽性與強(qiáng)直性脊柱炎等一系列關(guān)節(jié)病有著不同程度的正相關(guān)。FCM應(yīng)用HLA-B27特異性單抗檢測抗原，其敏感性較傳統(tǒng)的微量細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)大大提高,同時(shí)多參數(shù)的熒光測定使我們能夠在特定的細(xì)胞亞群中分析HLA-B27[4-5],還可以利用FCM進(jìn)行移植配型移植后免疫狀態(tài)監(jiān)測。

2 流式細(xì)胞術(shù)在血液學(xué)中的應(yīng)用

血液系統(tǒng)腫瘤的診斷和治療 FCM通過對外周血細(xì)胞或骨髓細(xì)胞表面抗原和DNA的檢測分析，對白血病、淋巴瘤等各種血液病的診斷、預(yù)后判斷和治療起著舉足輕重的作用。FCM采用各種抗血細(xì)胞表面分化抗原的單克隆抗體，借助于各種熒光染料測定一個(gè)細(xì)胞的多種參數(shù)，以正確地判斷出該細(xì)胞的屬性。各種血細(xì)胞系統(tǒng)都具有其獨(dú)特的抗原，當(dāng)形態(tài)學(xué)檢查難以區(qū)別時(shí)，免疫表型參數(shù)對各種急性白血病、淋巴瘤的診斷和鑒別診斷有決定性作用，其診斷的準(zhǔn)確性可達(dá)到90%左右[5]。微小殘留病變(MRD)是白血病復(fù)發(fā)的主要根源,FCM能在患者緩解期檢測是否有殘留病變細(xì)胞，及早發(fā)現(xiàn)后采取措施避免復(fù)發(fā)。而且測定 DNA倍體和進(jìn)行細(xì)胞周期分析對指導(dǎo)白血病化療也有一定作用，不同的白血病患者或同一患者在不 同病期白血病細(xì)胞增殖狀況不同，定期了解細(xì)胞增殖情況采取相應(yīng)藥物可以提高療效。急性白血病的多耐藥基因(MDR)也常用FCM檢測，F(xiàn)CM特有的敏感性和特異性，用于檢測二氨基苯茚酮 mRNA的表達(dá)產(chǎn)物 P糖蛋白(Pgp)及其活性(作為藥物的排出泵，降低細(xì)胞內(nèi)藥物濃度)，可以更直接的反映耐藥程度。陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)是一種造血干細(xì)胞克隆病,細(xì)胞 CD55、CD59抗原表達(dá)減低是該病的一個(gè)特點(diǎn)。FCM采用熒光標(biāo)記的單克隆抗體對血細(xì)胞 CD59的表達(dá)做定量分析，可以協(xié)助臨床做出診斷并判斷疾病的嚴(yán)重程度。網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)是反映骨髓造血功能的重要指標(biāo)。FCM通過某些熒光染料(吖啶橙等)與紅細(xì)胞中 RNA結(jié)合，定量測定網(wǎng)織紅細(xì)胞中 RNA，得到網(wǎng)織紅細(xì)胞占成熟紅細(xì)胞的百分比。有報(bào)道認(rèn)為[6]FCM比目測法的精確度更高。此外，F(xiàn)CM還可以測量出網(wǎng)織紅細(xì)胞的成熟度，對紅細(xì)胞增殖能力的判斷很有意義，為干細(xì)胞移植術(shù)后恢復(fù)的判斷、貧血的治療監(jiān)測、腫瘤患者放、化療對骨髓的抑制狀況等提供了依據(jù)。造血干/祖細(xì)胞計(jì)數(shù)造血干/祖細(xì)胞具有自我復(fù)制和多向分化潛能，是各種血細(xì)胞和免疫細(xì)胞的始祖。造血干/祖細(xì)胞計(jì)數(shù)對造血干細(xì)胞移植意義重大。CD34抗原是早期造血干/祖細(xì)胞的表面標(biāo)志，應(yīng)用 FCM分析、計(jì)數(shù) CD34 細(xì)胞已成為造血干/祖細(xì)胞移植、造血重建的重要指標(biāo)。由于血小板的活化程度可由血小板膜糖蛋白的表達(dá)水平的高低來判斷,FCM測定血小板膜糖蛋白的表達(dá)情況可以診斷血小板膜糖蛋白異常所致疾病,這類疾病很少見但病因明確,主要是GpⅡb/Ⅲa或GpⅠb/Ⅸ/Ⅴ缺陷所致。患者血小板膜GpⅡb/Ⅲa的缺乏,導(dǎo)致血小板聚集功能明顯低下,這就是常染色體隱性遺傳病-血小板無力癥。而巨血小板綜合征是由于GpⅠb/Ⅸ/Ⅴ復(fù)合物數(shù)量或質(zhì)量的缺陷導(dǎo)致的遺傳性出血性疾病。FCM還可以通過單抗免疫熒光標(biāo)記血小板膜糖蛋白監(jiān)測血小板功能及活化情況,評(píng)價(jià)活化血小板程度在血栓性疾病和血栓前狀態(tài)發(fā)生發(fā)展中的作用,有利于血栓栓塞性疾病的診斷和治療,此外血小板活化時(shí)細(xì)胞內(nèi)的鈣離子濃度是活化血小板監(jiān)測的一項(xiàng)非免疫性指標(biāo),免疫性血小板減少性紫癜患者血漿中可產(chǎn)生血小板自身抗體,結(jié)合在血小板表面,稱為血小板相關(guān)抗體,檢測血小板表面或血清中的相關(guān)抗體,可用于該病的診斷及治療監(jiān)測[7]。

3 流式細(xì)胞術(shù)在腫瘤學(xué)中的應(yīng)用

FCM在腫瘤學(xué)中的應(yīng)用主要是利用DNA含量測定進(jìn)行包括癌前病變及早期癌變的檢出、化療指導(dǎo)以及預(yù)后評(píng)估等工作,FCM可精確定量DNA含量,能對癌前病變的性質(zhì)和發(fā)展趨勢做出判斷,有助于癌變的早期診斷[6]。首先需要把實(shí)體瘤組織解聚、分散制備成單細(xì)胞懸液,用熒光染料(碘化吡啶P1)染色后對細(xì)胞的DNA含量進(jìn)行分析,將不易區(qū)分的群體細(xì)胞分成三個(gè)亞群(G期、S期、G2期),DNA含量直接代表細(xì)胞的倍體狀態(tài),非倍體細(xì)胞與腫瘤惡性程度有關(guān)。DNA非整倍體細(xì)胞峰存在可為腫瘤診斷提供有力依據(jù)[6]。腫瘤細(xì)胞DNA倍體分析對患者預(yù)后的判斷亦有重要作用。異倍體腫瘤惡性病變的復(fù)發(fā)率、轉(zhuǎn)移率及死亡率均較高,而二倍體及近二倍體腫瘤的預(yù)后則較好。FCM不僅可以對惡性腫瘤DNA含量進(jìn)行分析,還可根據(jù)化療過程中腫瘤DNA分布直方圖的變化去評(píng)估療效,了解細(xì)胞動(dòng)力學(xué)變化,對腫瘤化療具有重要的意義。臨床醫(yī)師可以根據(jù)細(xì)胞周期各時(shí)相的分布情況,依據(jù)化療藥物對細(xì)胞動(dòng)力學(xué)的干擾理論,設(shè)計(jì)最佳治療方案。從DNA直方圖直接地看到腫瘤細(xì)胞的殺傷變化,及時(shí)選用有效的藥物對腫瘤細(xì)胞達(dá)到最大的殺傷效果。

4 流式細(xì)胞術(shù)在細(xì)胞凋亡和多藥耐藥基因中的應(yīng)用

細(xì)胞凋亡是機(jī)體生長發(fā)育、細(xì)胞分化和病理狀態(tài)中細(xì)胞死亡的過程,凋亡典型的形態(tài)特征是核染色質(zhì)固縮并分離,細(xì)胞質(zhì)濃縮,細(xì)胞膜和核膜皺曲,核斷裂形成片斷,最后形成數(shù)量不等的凋亡小體。FCM可以進(jìn)行DNA含量分析,通過二倍體細(xì)胞G0/G1期峰前的亞二倍體峰來確定。在凋亡早期,一些與膜通透性改變及凋亡有關(guān)的蛋白在細(xì)胞膜表面有特定表達(dá)。通過FCM結(jié)合單克隆抗體可以檢測表達(dá)這些蛋白的細(xì)胞,從而確定細(xì)胞的凋亡情況。多重耐藥性(multidrugresistance,MDR)是由多藥耐藥基因編碼的P糖蛋白(P-gp)親脂化合物,包括多種抗癌藥物和熒光染料的跨膜性排出泵。從人淋巴細(xì)胞排除熒光染料與細(xì)胞內(nèi)P-gp的含量直接相關(guān)。當(dāng)淋巴細(xì)胞出現(xiàn)MDR陽性細(xì)胞時(shí),患者對化療藥物開始出現(xiàn)耐藥性,需要考慮其它治療方式。多藥耐藥是腫瘤患者化療失敗的主要原因,FCM對多藥耐藥基因(如P170)和凋亡抑制基因及凋亡活化基因表達(dá)的測定,可為臨床治療效果分析提供有力依據(jù)[8]。

5 流式細(xì)胞術(shù)在器官移植中的應(yīng)用

FCM在器官移植中占有重要地位,可被用來判斷供者與受者之間是否合適,用來鑒別和定型同種異體反應(yīng)抗體[6]。通過供者白細(xì)胞和受者的血清共同孵育,如果受者血清中存在針對供者的循環(huán)抗體,就會(huì)同供者的淋巴細(xì)胞結(jié)合,再加入熒光素標(biāo)記的二抗來顯示這種結(jié)合,此方法能在移植手術(shù)前發(fā)現(xiàn)高風(fēng)險(xiǎn)的受體。移植后免疫表型的監(jiān)測也很重要。FCM可用于檢測移植后血液或移植內(nèi)免疫成分的變化,以預(yù)防移植后免疫

排斥反應(yīng),細(xì)胞免疫抑制治療效果和移植存活情況,可敏感地預(yù)測排斥反應(yīng)的發(fā)生,為臨床治療提供有效依據(jù)。

6 流式細(xì)胞術(shù)在臨床細(xì)菌學(xué)中的應(yīng)用

流式細(xì)胞術(shù)在臨床細(xì)菌學(xué)中的應(yīng)用具有快捷、靈敏,能同時(shí)進(jìn)行多參數(shù)分析等優(yōu)點(diǎn),可廣泛用于細(xì)菌、病原體、毒素和血清抗體及藥敏試驗(yàn)。免疫熒光檢測方法中的流式微球分析(CBA)是FCM的一個(gè)新應(yīng)用。這種方法也可用于真菌、寄生蟲、病毒以及這些病原體的混合感染的檢測。近年來,FCM與熒光染料的聯(lián)合運(yùn)用可判斷細(xì)菌的活力和功能狀態(tài),由于速度快,該方法已被建議作為臨床實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)藥敏試驗(yàn)。FCM藥敏檢測方法較多,通過測量加入藥物孵育后的散射光的DNA含量來判斷抗生素對細(xì)菌的敏感性。該法現(xiàn)被認(rèn)為是FCM在該領(lǐng)域應(yīng)用的經(jīng)典方法[6]。

7 FCM在細(xì)胞生物學(xué)中的應(yīng)用

在細(xì)胞周期內(nèi),DNA含量隨時(shí)相發(fā)生周期性的變化,通過熒光探針對細(xì)胞進(jìn)行相對DNA含量測定,可分析細(xì)胞周期各時(shí)相細(xì)胞的百分比,周期動(dòng)力學(xué)參數(shù)以及DNA異倍體。可利用與鈣離子特異結(jié)合的熒光染料和激發(fā)光譜或發(fā)射光譜是pH值依賴熒光染料進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度測定和細(xì)胞內(nèi)pH值測定[9]。

8 流式細(xì)胞術(shù)在優(yōu)生遺傳領(lǐng)域中的應(yīng)用

流式細(xì)胞術(shù)可使含量極微的胎兒有核紅細(xì)胞得到富集,因?yàn)橛泻思t細(xì)胞含有胎兒的全部基因,并具有不影響多胎妊娠等優(yōu)點(diǎn),結(jié)合FISH,PCR等技術(shù),使之具有應(yīng)用于無創(chuàng)性產(chǎn)前診斷的廣闊前景[10]。

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干細(xì)胞在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用范文3

關(guān)鍵詞：流式細(xì)胞術(shù)；臨床醫(yī)學(xué)；應(yīng)用

近年來，隨著單克隆抗體的應(yīng)用及流式細(xì)胞術(shù)的快速發(fā)展，流式細(xì)胞術(shù)（FCM）已成為許多疾病診斷和分性的重要依據(jù)。流式細(xì)胞術(shù)是20世紀(jì)70年展起來的一項(xiàng)高新技術(shù)，它作為一門生物檢測技術(shù)集計(jì)算機(jī)技術(shù)、測量技術(shù)、激光技術(shù)、流體動(dòng)力學(xué)、細(xì)胞化學(xué)、細(xì)胞免疫學(xué)于一體，是對快速直線運(yùn)動(dòng)狀態(tài)中的細(xì)胞、生物顆粒或液體中的大分子物質(zhì)進(jìn)行多參數(shù)的、快速的定量分析和分選的一種技術(shù)［1］。1973年美國BD公司推出全國第一臺(tái)流式細(xì)胞儀，通過對流動(dòng)液體中排列成單列細(xì)胞或顆粒進(jìn)行逐個(gè)檢測得到該細(xì)胞或顆粒的光散射和熒光指標(biāo)，分析它們的體積、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、DNA、RNA、蛋白質(zhì)、抗原等物理及化學(xué)性質(zhì)，還能對所需要的細(xì)胞進(jìn)行分選等。具有檢測速度快、測量指標(biāo)多、采集數(shù)量大，對所需的細(xì)胞或生物顆粒進(jìn)行分析或分選等特點(diǎn)［2］，其在生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、遺傳免疫學(xué)、腫瘤學(xué)等眾多研究領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。

1流式細(xì)胞儀的結(jié)構(gòu)及工作原理

1．1流式細(xì)胞儀的結(jié)構(gòu)

主要由五部分組成：（1）流動(dòng)室及液流驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)；（2）激光光源及光束形成系統(tǒng)；（3）光學(xué)系統(tǒng)；（4）信號(hào)檢測與儲(chǔ)存、顯示、分析系統(tǒng)；（5）細(xì)胞分選系統(tǒng)。

1．2流式細(xì)胞儀的工作原理

將待測細(xì)胞染色后制成單細(xì)胞懸液，用一定壓力將待測樣品壓入流動(dòng)室，不含細(xì)胞的硫酸緩沖液在高壓下從鞘液管噴出，鞘液管入口方向與待測樣品流成一定角度，這樣鞘液就能夠包繞樣品高速流動(dòng)，組成一個(gè)圓形的流束，待測細(xì)胞在鞘液的包繞下單行排列，依次通過檢測區(qū)域。流式細(xì)胞儀通常以激光作為光源，經(jīng)過聚焦整形后的光束，垂直照射在樣品流上，被熒光染色的細(xì)胞在激光束的照射下，產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光，這兩種信號(hào)同時(shí)被前向光電二極管和90°方向的光電倍增管接收，光散射信號(hào)在前向小角度進(jìn)行檢測，這種信號(hào)基本上反映了細(xì)胞體積的大小；熒光信號(hào)的接受方向與激光束垂直，經(jīng)過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離，形成多個(gè)不同波長的熒光信號(hào)，這些熒光信號(hào)的強(qiáng)度代表了所測細(xì)胞膜表面抗原的強(qiáng)度或核內(nèi)物質(zhì)的濃度，經(jīng)光電倍增管接收后可轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，再通過模／數(shù)轉(zhuǎn)換器將連續(xù)的電信號(hào)轉(zhuǎn)換為可被計(jì)算機(jī)識(shí)別的數(shù)字信號(hào)，計(jì)算機(jī)系統(tǒng)將這些數(shù)字信號(hào)收集、儲(chǔ)存，以一維直方圖或二維點(diǎn)陣圖及數(shù)據(jù)表或三維圖形顯示出來，可以用不同的標(biāo)記物進(jìn)行雙參數(shù)、三參數(shù)甚至多參數(shù)的分析［3，4］。

2流式細(xì)胞儀的技術(shù)指標(biāo)

包括：（1）分析速度：很高可以達(dá)到5000個(gè)／s左右，大型的流式細(xì)胞儀的分析速度可達(dá)10000個(gè)／s；（2）熒光檢測靈敏度：單個(gè)細(xì)胞上的熒光分子＜600個(gè)，或兩個(gè)細(xì)胞之間的熒光差＞5％就能區(qū)分；（3）前向角散射光檢測靈敏度：一般的可以檢測到的最小顆粒直徑在0．2～0．5μm；（4）分辨率（CV）：一般流式細(xì)胞儀能夠達(dá)到＜2．0％；（5）分選速度：一般流式細(xì)胞儀分選速度＞100個(gè)／s，分選細(xì)胞純度可達(dá)99％［5］。

3流式細(xì)胞術(shù)在臨床中的應(yīng)用

3．1在血液學(xué)中的應(yīng)用

流式細(xì)胞術(shù)通過對外周血細(xì)胞和骨髓細(xì)胞表面抗原和DNA的檢測分析對各種血液病如白血病、淋巴瘤等血液系統(tǒng)疾病的分型、診斷、治療及預(yù)后判斷均有重要作用。血細(xì)胞在白細(xì)胞系、紅細(xì)胞系、巨核細(xì)胞系、血小板及非造血細(xì)胞均有不同的分化抗原表達(dá)，分布在細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜中。血液腫瘤細(xì)胞的特征是喪失了正常細(xì)胞的系類專一性和分化階段的規(guī)律性，運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)將具有系列特異性并涵蓋不同分化階段的單克隆體作為分子探針來檢測血液腫瘤細(xì)胞的內(nèi)外抗原，可以反映其本質(zhì)上與正常造血細(xì)胞的差異［6］。流式細(xì)胞術(shù)采用各種抗血細(xì)胞表面分化抗原的單克隆抗體，借助于各種熒光染料（異硫氰基熒光素FITC，藻紅蛋白PE等）測定一個(gè)細(xì)胞的多種參數(shù)，以正確判斷出該細(xì)胞的屬性。流式細(xì)胞術(shù)還可以應(yīng)用在白血病免疫分型方面，目前國內(nèi)外均主張采用FCMCD45／SSC雙參數(shù)散點(diǎn)圖設(shè)計(jì)方法進(jìn)行白血病免疫分析。采用此法可將骨髓細(xì)胞清晰地分成淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、成熟粒細(xì)胞、幼稚細(xì)胞和有核紅細(xì)胞群，這樣可以排除正常細(xì)胞對免疫分型的干擾，從而提高免疫分析的準(zhǔn)確性，而且測量細(xì)胞一般在1～5萬個(gè)細(xì)胞，快速特異、準(zhǔn)確性好，并且能夠提供正常細(xì)胞在演變成惡性腫瘤過程細(xì)胞基因及抗原標(biāo)志發(fā)生變化的信息。而這種細(xì)胞的變化是常規(guī)FAB法所不能分辨的。這種分型對于治療方案的正確選擇與預(yù)后有著重要的意義同時(shí)也提供了可靠的依據(jù)［7］。近年研究發(fā)現(xiàn)，在臨床血液病檢測和診斷中診斷準(zhǔn)確率高達(dá)90％以上，與普通檢測法相比準(zhǔn)確率提高達(dá)20％［8］。流式細(xì)胞術(shù)可以通過某些熒光染料與紅細(xì)胞中的RNA結(jié)合，定量地測定網(wǎng)織紅細(xì)胞中的RNA，得到網(wǎng)織紅細(xì)胞占成熟紅細(xì)胞的百分比，從而準(zhǔn)確地反映骨髓造血功能。有作者報(bào)道FCM方法比目測法結(jié)果精確度更高［9］。此外FCM還可以測出網(wǎng)織紅細(xì)胞的成熟度，對紅細(xì)胞增值能力的判斷很有意義，為干細(xì)胞移植術(shù)后恢復(fù)的判斷、貧血的治療監(jiān)測、腫瘤患者放化療對骨髓的抑制狀況等提供依據(jù)。

3．2在腫瘤學(xué)中的應(yīng)用

流式細(xì)胞術(shù)在腫瘤學(xué)中的應(yīng)用主要是對腫瘤細(xì)胞DNA含量進(jìn)行測定，包括癌前病變及早期癌變的檢出，輔助腫瘤的早期診斷和鑒別診斷。不僅如此，還可以根據(jù)化療過程中腫瘤DNA分布直方圖的變化評(píng)估療效，了解細(xì)胞動(dòng)力學(xué)的變化。臨床醫(yī)生可根據(jù)各細(xì)胞周期各時(shí)相的分布情況，結(jié)合化療藥物對細(xì)胞動(dòng)力學(xué)的干擾理論，設(shè)計(jì)最佳治療方案，再依照DNA直方圖直接地看到腫瘤細(xì)胞的殺傷變化，及時(shí)調(diào)整治療方案，選取有效藥物以使對腫瘤細(xì)胞達(dá)到最大的殺傷效果［10］。

3．3在免疫學(xué)中的應(yīng)用

利用抗原抗體特異性反應(yīng)的原理將流式細(xì)胞儀與單克隆抗體結(jié)合，對細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)抗原、癌基因蛋白及膜受體進(jìn)行定量檢測，廣泛應(yīng)用于臨床，對人體細(xì)胞免疫功能的評(píng)估具有重要的意義。流式細(xì)胞術(shù)可進(jìn)行T、B和NK淋巴細(xì)胞水平的分析，還可以進(jìn)行淋巴細(xì)胞亞群的分析，區(qū)分不同的淋巴細(xì)胞亞群，計(jì)算其相互間的比例，進(jìn)而了解淋巴細(xì)胞的分化功能。更重要的是，通過研究大多數(shù)疾病的特異性淋巴細(xì)胞亞群，對一些疾病如免疫性疾病、感染性疾病、腫瘤等的診斷、治療、免疫功能的重建具有重要的指導(dǎo)意義。例如CD4是輔淋巴細(xì)胞，它是遲發(fā)性超敏反應(yīng)的啟動(dòng)者，是促使B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的輔細(xì)胞，也是抑制性T細(xì)胞的誘導(dǎo)細(xì)胞，而CD8是抑制性T細(xì)胞，是細(xì)胞毒性T細(xì)胞介導(dǎo)反應(yīng)的效應(yīng)細(xì)胞，是抑制B細(xì)胞產(chǎn)生抗體的抑制性細(xì)胞［11］。在許多免疫性疾病中，淋巴細(xì)胞亞群的增多與減少對疾病的發(fā)展具有重要的作用。如在先天性發(fā)育不良綜合征中FCM分析顯示外周血CD3TCD4＋和CD8＋T細(xì)胞均減少，在殘余T細(xì)胞中T細(xì)胞受體（TCR）αβ分子表達(dá)減少，γδ分子表達(dá)正常，CD4＋／CD8＋T細(xì)胞比例升高，隨著受累者年齡的增加CD8＋細(xì)胞數(shù)增多，而有些患者T細(xì)胞數(shù)量增加，最終可達(dá)正常［12］。流式細(xì)胞術(shù)還可以進(jìn)行HLA群體分析，在強(qiáng)直性脊柱炎患者中用流式細(xì)胞術(shù)檢測HLA－B27抗原陽性率高達(dá)92．6％，而且可以排除交叉反應(yīng)，提高檢測的靈敏度和準(zhǔn)確性［13］。

3．4在中醫(yī)藥研究方面的應(yīng)用

流式細(xì)胞術(shù)可用于單味中藥有效成分的作用效果測定分析。如研究復(fù)方苦參方劑對大腸癌LoVo細(xì)胞體外增值凋亡的影響中，分析DNA含量及細(xì)胞周期，結(jié)果顯示Lo－Vo細(xì)胞可檢測亞G1峰，凋亡率于對照組相對比例增高，細(xì)胞周期分析發(fā)現(xiàn)S期阻滯現(xiàn)象，表明復(fù)方苦參方劑具有一定的抑制腫瘤細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡的作用［14］。在慢性阻塞性肺疾病的肺氣虛證、肺陰虛證患者中CD4＋、CD4＋／CD8＋均降低，CD8＋升高，說明肺氣虛證與肺陰虛證患者均存在細(xì)胞免疫功能低下［15］。

3．5在細(xì)菌學(xué)中的應(yīng)用

流式細(xì)胞術(shù)具有快速、靈敏、精確并能進(jìn)行多參數(shù)分析的特點(diǎn)，可廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的診斷和藥敏實(shí)驗(yàn)，是研究細(xì)菌異質(zhì)性、細(xì)菌抗生素后效應(yīng)、多種病原菌混合感染等的有效方法。常用的為流式細(xì)胞術(shù)藥敏試驗(yàn)：檢測不同細(xì)菌時(shí)，根據(jù)藥物對細(xì)菌的作用機(jī)理選擇合適的熒光染料，通過細(xì)菌總體平均熒光強(qiáng)度束反映抗生素對細(xì)菌的抗菌活性，3h左右即可得出檢測結(jié)果，尤其適用于急需藥敏報(bào)告的重癥感染病菌的檢測。

3．6在血小板疾病診斷中的作用

血小板是止血機(jī)制中一個(gè)重要因素，其表面含有多種糖蛋白及各種受體，這些受體與相應(yīng)的配體相結(jié)合后，血小板被激活，并發(fā)生形態(tài)變化，血小板聚集和顆粒釋放等一系列反應(yīng)。利用流式細(xì)胞術(shù)檢測血小板標(biāo)志物在許多血小板相關(guān)疾病的診斷上具有重要的臨床價(jià)值［16］。如GPⅠb／Ⅸ復(fù)合物先天缺陷導(dǎo)致巨大血小板綜合征；GPⅡb／Ⅲa復(fù)合物先天缺陷導(dǎo)致血小板無力癥［17］。在免疫性血小板減少性紫癜的患者中，F(xiàn)CM可以測定患者血液中的PAIgG、PAIgM、PAIgA，熒光陽性百分率的診斷效率為45．8％，平均熒光強(qiáng)度的診斷效率為72．5％，兩項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合的診斷效率為74．2％［18］；因此FCM檢測血小板抗體可用于免疫性血小板減少性紫癜的診斷及治療監(jiān)測。用FCM內(nèi)參定位法定量分析血小板微粒在血栓性疾病和血栓前狀態(tài)的發(fā)生發(fā)展中的作用，有利于血栓性疾病的診斷和治療。

3．7在相關(guān)疾病檢測中的應(yīng)用

質(zhì)量檢測是診斷男性不育癥的重要手段，由于檢測數(shù)低及主觀因素的影響，常規(guī)的檢查只能反映的形態(tài)特征和有限的功能，不能為生育能力提供準(zhǔn)確評(píng)估的依據(jù)，用FCM檢查可把定性的描述變成定量的研究，提高了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，可對進(jìn)行高通量、多參數(shù)分析，得到不同時(shí)期的細(xì)胞數(shù)據(jù)及形態(tài)指標(biāo)，對臨床診斷發(fā)生障礙的性質(zhì)、原因和程度提高了客觀依據(jù)，可對少、弱和無癥的判斷、治療及療效的觀察作出正確的評(píng)價(jià)，為客觀評(píng)價(jià)男性生育能力提供了有力的依據(jù)。用FCM檢測生精細(xì)胞凋亡情況是迅速、準(zhǔn)確、客觀、可靠地評(píng)估功能和男性生育力的新方法［19］。

3．8在器官移植中的作用

可用流式細(xì)胞術(shù)判斷供者與受者之間的配型是否合適。檢測受者血清中抗供者的抗HLA抗體，如果受者血清中存在針對供者的循環(huán)抗體，就會(huì)同供者的淋巴細(xì)胞結(jié)合，在加入熒光素的二抗來顯示這種結(jié)合，就可在移植前后發(fā)現(xiàn)高風(fēng)險(xiǎn)抗體，以判斷供者與受者之間是否合適。移植后的免疫表型監(jiān)測也很重要，移植后的CD4／CD8比值低下的患者排斥反應(yīng)發(fā)生較多，受者血清中產(chǎn)生抗供體細(xì)胞抗體預(yù)后較差，應(yīng)及時(shí)監(jiān)測以便進(jìn)行抗排斥的預(yù)防和治療［4］。綜上所述，流式細(xì)胞術(shù)是一種在醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)、臨床及科學(xué)研究中具有廣泛應(yīng)用前景的細(xì)胞分析技術(shù)。它具有分辨率高、分辨細(xì)胞數(shù)量大、參數(shù)多、準(zhǔn)確性高、速度快等優(yōu)點(diǎn)。隨著流式細(xì)胞分析技術(shù)與方法的迅速發(fā)展，流式細(xì)胞術(shù)在臨床的應(yīng)用范圍也不斷拓展，并將成為推動(dòng)臨床醫(yī)學(xué)發(fā)展的重要手段。

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［16］劉婷婷．流式細(xì)胞儀在中西醫(yī)領(lǐng)域的應(yīng)用〔J〕．西部醫(yī)學(xué)，2011，23（6）：1148－1149．

［17］王志杰．流式細(xì)胞術(shù)在血小板疾病中的應(yīng)用〔J〕．血栓與止血學(xué)2004，10（1）：39－41．

［18］吳艾霖，吳麗娟，劉毓剛，等．流式細(xì)胞術(shù)檢測血小板相關(guān)免疫球蛋白的臨床應(yīng)用〔J〕．國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32（20）：2304－2306．

干細(xì)胞在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用范文4

1．1轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的發(fā)展歷程及現(xiàn)狀

轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)提倡以患者個(gè)體為中心，強(qiáng)調(diào)多學(xué)科交叉合作。轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)作為一個(gè)新的領(lǐng)域，從發(fā)展走向成熟，需要多專業(yè)的交流與協(xié)作。在國外轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)起步較早。2003年，美國國立衛(wèi)生研究院（NIH）宣布了發(fā)展生物醫(yī)學(xué)的長期計(jì)劃，主要是培養(yǎng)具有不同專業(yè)背景、能在基礎(chǔ)研究和臨床工作間互相協(xié)作研究的團(tuán)隊(duì)。在NIH的推動(dòng)下，2011年美國已有包括哈佛大學(xué)、耶魯大學(xué)、斯坦福大學(xué)等名校在內(nèi)的38個(gè)大學(xué)和醫(yī)學(xué)院建立了進(jìn)行轉(zhuǎn)化研究的醫(yī)學(xué)中心；2005年蘇格蘭政府與惠氏制藥公司合作，建立了世界上第一個(gè)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)合作研究中心；2007年，歐盟實(shí)施的第7個(gè)框架研究計(jì)劃，將預(yù)算中的60億歐元用于轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究方面。同時(shí)世界著名醫(yī)學(xué)類核心期刊都為轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)開辟了專欄，相繼組建了ScienceTranslationalMedicine、JournalofTranslationalMedicine和TranslationalResearch等國際性專業(yè)雜志。相比較而言，中國在轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的研究和實(shí)踐方面尚處于初級(jí)階段，但發(fā)展勢頭日趨高漲。2007年上海交通大學(xué)成立了專門從事轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究的“Med－X研究院”；2008年上海復(fù)旦大學(xué)依托其附屬醫(yī)院，率先成立了“出生缺陷研究中心”；2009年中南大學(xué)湘雅醫(yī)院組建了“湘雅轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中心”，研究惡性腫瘤；2011年總醫(yī)院附屬八一腦科醫(yī)院建立了國內(nèi)第一個(gè)“神經(jīng)科學(xué)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中心”等。

2010年陳竺等在《科學(xué)》雜志上發(fā)表了一項(xiàng)研究成果，揭示了砷劑治療急性早幼粒細(xì)胞性白血病（APL）的直接藥物作用靶點(diǎn)為PML－RARa。這一研究成果對于推動(dòng)該類型白血病的分子靶向治療具有重要意義。砷劑成功治療APL的研究成果成為我國轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究的典范之一。

1．2轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的研究內(nèi)容

轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)是蛋白質(zhì)組學(xué)和基因組學(xué)及生物信息學(xué)等生物醫(yī)學(xué)發(fā)展的時(shí)代產(chǎn)物，其中心思想是以解決臨床和健康問題為目標(biāo)的實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)研究。轉(zhuǎn)化研究是轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中最重要的內(nèi)容之一，主要包括：①分子靶向治療；②尋找適當(dāng)生物分子標(biāo)志物，提高臨床輔助技術(shù)對臨床工作的輔助效力；③藥物二期臨床實(shí)驗(yàn)。此外，還有基因診斷治療、干細(xì)胞與再生醫(yī)學(xué)、基因組藥理學(xué)與個(gè)體化醫(yī)學(xué)。其中最重要的環(huán)節(jié)是生物分子標(biāo)志物的研究。

1．2．1基于分子分型的個(gè)體化治療惡性腫瘤、心腦血管病及糖尿病等大多數(shù)慢性病是多病因疾病，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜、疾病異質(zhì)性很大，因此，對這些疾病不能采用單一方法來進(jìn)行診治。著眼于患者的遺傳、分子生物學(xué)特征和疾病基本特征進(jìn)行分子分型，以此為基礎(chǔ)實(shí)施個(gè)體化治療是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的目標(biāo)。實(shí)施個(gè)體化的治療，可以對治療方法、藥物、劑量進(jìn)行優(yōu)化，達(dá)到最好的治療效果。

1．2．2生物分子標(biāo)志物的鑒定與運(yùn)用基于各種組學(xué)方法篩選出早期診斷疾病、預(yù)測疾病、判斷藥物治療效果和評(píng)估患者預(yù)后的生物分子標(biāo)志物及藥物靶標(biāo)，如DNA、miRNA、蛋白質(zhì)及多肽、炎性因子及其通路等，有利于針對性地探索新的藥物和治療方法，提高藥物篩選的成功率，縮短藥物研究從實(shí)驗(yàn)走向臨床應(yīng)用階段的時(shí)間。這些分子標(biāo)志物的開發(fā)應(yīng)用，對疾病的預(yù)防、診斷、治療和預(yù)后有重要指導(dǎo)作用。

1．2．3藥物臨床實(shí)驗(yàn)及研發(fā)美國曾有報(bào)告稱，研制一種新藥，從選題到臨床應(yīng)用，平均要用14年的時(shí)間。近40年來，美國在惡性腫瘤的研究方面投入2000多億美元，收獲了156萬篇研究論文，但腫瘤患者的生存率卻沒有得到顯著改變。轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)通過收集和分析分子生物學(xué)和生物信息學(xué)的海量數(shù)據(jù)，篩選出分子標(biāo)志物和藥物靶標(biāo)，有效地降低在臨床二期實(shí)驗(yàn)中藥物靶點(diǎn)驗(yàn)證性研究的失敗率，提高了基礎(chǔ)研究的轉(zhuǎn)化率和速度，為新藥的臨床應(yīng)用和個(gè)體化治療研究開辟出一條革命性的道路。

2轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)與中醫(yī)藥學(xué)的基本理念一致

中醫(yī)學(xué)是我國醫(yī)學(xué)重要的組成部分，進(jìn)入新世紀(jì)，中醫(yī)學(xué)先進(jìn)的理念與落后的技術(shù)手段之間的矛盾愈發(fā)突出，限制了中醫(yī)理論的廣泛傳播及其診療技術(shù)的普及與應(yīng)用。然而轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的出現(xiàn)為中醫(yī)藥的現(xiàn)代化研究提供了一個(gè)良好的發(fā)展機(jī)遇。轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的基本理念與中醫(yī)藥學(xué)從臨床到基礎(chǔ)理論再到臨床的發(fā)展歷程和“辨證論治”的個(gè)體化治療思想不謀而合。

2．1轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)與中醫(yī)學(xué)的運(yùn)行模式相同臨床實(shí)踐一直是中醫(yī)學(xué)產(chǎn)生、發(fā)展、繁榮的根本原因，從臨床積累的經(jīng)驗(yàn)中抽提理論，再用理論指導(dǎo)臨床實(shí)踐的過程是中醫(yī)藥發(fā)展的經(jīng)典模式。基于基礎(chǔ)科學(xué)與臨床應(yīng)用出現(xiàn)嚴(yán)重脫節(jié)而產(chǎn)生的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)，其主要目的就是加強(qiáng)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)之間的聯(lián)系，將實(shí)驗(yàn)室的研究成果快速轉(zhuǎn)化為臨床應(yīng)用，同時(shí)臨床上出現(xiàn)的新問題可以指導(dǎo)基礎(chǔ)研究方向。雖然傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)不進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室研究，但其“臨床－理論－臨床”這個(gè)螺旋上升的模式與轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的運(yùn)行模式是一致的。

2．2轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)與中醫(yī)學(xué)的理念統(tǒng)一基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)存在著方法論方面的差異，主要體現(xiàn)在：臨床醫(yī)學(xué)以系統(tǒng)論為導(dǎo)向，基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)則以簡化論為基礎(chǔ)。轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究的對象是人，人的健康除與人體結(jié)構(gòu)與功能相關(guān)外，還涉及自然環(huán)境和社會(huì)環(huán)境因素的作用，這決定了轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)必然是一種復(fù)雜性研究系統(tǒng)。以轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)為基礎(chǔ)的系統(tǒng)生物學(xué)應(yīng)用系統(tǒng)工程的概念、定量分析生物系統(tǒng)若干組成部分的動(dòng)態(tài)相互作用，通過反復(fù)計(jì)算和／或數(shù)學(xué)建模及試驗(yàn)來研究復(fù)雜的生物系統(tǒng)。中醫(yī)學(xué)是借助古代哲學(xué)、自然科學(xué)和臨床實(shí)踐發(fā)展起來的一種系統(tǒng)科學(xué)，其蘊(yùn)含的“整體觀”、“天人合一”等思想，與系統(tǒng)生物學(xué)的理念相統(tǒng)一。

2．3轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)與中醫(yī)學(xué)所倡導(dǎo)的治療方式相同現(xiàn)代疾病譜逐漸向慢性病方向轉(zhuǎn)變，其發(fā)病原因有多種且機(jī)制復(fù)雜，以往的單一治療方法難以奏效。轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)針對這一問題提出了基于患者遺傳、分子生物學(xué)特征和分子分型的個(gè)體化治療方案。中醫(yī)學(xué)治病的基本原則———辨證論治，其本質(zhì)就是個(gè)體化醫(yī)學(xué)，體現(xiàn)了現(xiàn)代個(gè)體化醫(yī)學(xué)的特征。

3中醫(yī)藥轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的特點(diǎn)

3．1以中醫(yī)基礎(chǔ)理論為指導(dǎo)原則中醫(yī)基礎(chǔ)理論是中醫(yī)學(xué)的精髓，如果中醫(yī)藥的研究忽視中醫(yī)學(xué)的特色，一味地追求細(xì)胞乃至分子層面的機(jī)制，或盲目地模仿化學(xué)藥物研發(fā)模式，必然導(dǎo)致臨床與科研的脫節(jié)，最后中醫(yī)臨床只能依據(jù)古代經(jīng)典，缺乏令人信服的科學(xué)證據(jù)。因此，中醫(yī)藥轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究必須以中醫(yī)基礎(chǔ)理論為指導(dǎo)，才能更好地服務(wù)于臨床。

3．2以患者個(gè)體為中心中醫(yī)學(xué)的整體觀既強(qiáng)調(diào)人是一個(gè)有機(jī)整體，又強(qiáng)調(diào)人與自然、社會(huì)環(huán)境的密切相關(guān)，并建立“觀其脈證，知犯何逆，隨證治之”的辨證論治體系，也是一種人本主義的醫(yī)學(xué)研究模式。

3．3基礎(chǔ)研究與臨床應(yīng)用之間相互促進(jìn)的連續(xù)過程中醫(yī)藥轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的實(shí)質(zhì)是理論與實(shí)踐的結(jié)合，是基礎(chǔ)與臨床的整合，具有“實(shí)驗(yàn)室－臨床－實(shí)驗(yàn)室－臨床”不斷循環(huán)的運(yùn)作特色。中醫(yī)學(xué)也是在不斷的臨床實(shí)踐中逐漸發(fā)展壯大。只有通過基礎(chǔ)與臨床之間不斷地循環(huán)轉(zhuǎn)化，才能促進(jìn)中醫(yī)醫(yī)療技術(shù)水平的整體提高。

4中醫(yī)藥轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的實(shí)施

中醫(yī)藥轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究如何開展，如何順應(yīng)世界醫(yī)學(xué)發(fā)展潮流，是當(dāng)前中醫(yī)藥界必須思考的一個(gè)重要問題，其中中醫(yī)藥語言現(xiàn)代化和中醫(yī)臨床、中藥創(chuàng)新藥物研究的現(xiàn)代化是中醫(yī)藥轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)實(shí)施的關(guān)鍵。

4．1建立中醫(yī)學(xué)轉(zhuǎn)化研究機(jī)構(gòu)有條件的研究型或教研型中醫(yī)藥大學(xué)、研究型醫(yī)院或國家中醫(yī)臨床研究基地可采用加盟或聯(lián)合方式進(jìn)行資源整合，建立以臨床和基礎(chǔ)及藥物研發(fā)為主體，結(jié)合中醫(yī)古籍研究的跨學(xué)科中醫(yī)藥轉(zhuǎn)化研究中心，并吸引相關(guān)企業(yè)共同參與，以平臺(tái)管理方式進(jìn)行統(tǒng)一部署和聯(lián)合攻關(guān)，構(gòu)建起一條高效率的轉(zhuǎn)化鏈。此外，也可以通過內(nèi)部選拔或?qū)ν庹衅傅姆绞浇M建一個(gè)交叉學(xué)科研究室。此外，生物醫(yī)學(xué)信息學(xué)為解決轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)相關(guān)問題提供了一系列方法學(xué)，其研究者應(yīng)該成為中醫(yī)藥轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究團(tuán)隊(duì)的核心成員。

4．2加強(qiáng)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)推廣教育和轉(zhuǎn)化型人才培養(yǎng)長久以來，基礎(chǔ)研究領(lǐng)域人才的提拔和獎(jiǎng)勵(lì)主要依據(jù)研究者的論文，而不是其帶來了多大的臨床效果。而臨床醫(yī)生則缺少時(shí)間去閱讀相關(guān)文獻(xiàn)，這在相當(dāng)程度上限制了基礎(chǔ)研究與臨床之間的交流。要解決這個(gè)問題，就必須加強(qiáng)基礎(chǔ)研究者和臨床醫(yī)生之間的交流、合作。當(dāng)前中醫(yī)藥基礎(chǔ)研究的人才隊(duì)伍建設(shè)比較薄弱，整體科研水平較低，知識(shí)結(jié)構(gòu)也較單一，學(xué)科滲透和交叉能力相對欠缺，對世界醫(yī)學(xué)最新進(jìn)展和前沿動(dòng)態(tài)信息了解滯后，創(chuàng)新能力不足。因此，需要加強(qiáng)對既懂中醫(yī)又具有現(xiàn)代西醫(yī)科學(xué)實(shí)驗(yàn)技能，并有轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)理念的復(fù)合型人才的培養(yǎng)。國內(nèi)中醫(yī)藥大學(xué)與開設(shè)的中醫(yī)學(xué)國家理科基地專業(yè)是一個(gè)很好的探索。

4．3加大扶持力度與政策引導(dǎo)長期以來，高昂的經(jīng)費(fèi)支出是造成轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究發(fā)展十分緩慢的核心問題，原因在于科研成果從實(shí)驗(yàn)室走向臨床的轉(zhuǎn)化過程成本高，前期的巨大投入使許多企業(yè)和醫(yī)療機(jī)構(gòu)失去投資的動(dòng)力。其次，中醫(yī)藥轉(zhuǎn)化研究的過程涉及多學(xué)科、多部門的利益協(xié)調(diào)，很容易在關(guān)鍵環(huán)節(jié)產(chǎn)生脫節(jié)現(xiàn)象。因此，政府除了要在政策上加以傾斜和扶持，引導(dǎo)大型企業(yè)贊助中醫(yī)藥轉(zhuǎn)化研究外，還應(yīng)制定有效的體制、規(guī)定，將各學(xué)科、各部門緊密地聯(lián)系在一起，形成一個(gè)團(tuán)結(jié)高效的研究團(tuán)隊(duì)。

4．4緊密結(jié)合中醫(yī)特色和優(yōu)勢，展開中醫(yī)藥轉(zhuǎn)化研究中醫(yī)藥轉(zhuǎn)化研究是中醫(yī)藥現(xiàn)代化研究的需求，有助于更好地促進(jìn)和加快中醫(yī)藥向更深層次水平邁進(jìn)。中醫(yī)藥轉(zhuǎn)化研究的開展應(yīng)緊密結(jié)合中醫(yī)特色和優(yōu)勢。主要包括：①重視中醫(yī)經(jīng)典的指導(dǎo)作用：2006年頒布的《中醫(yī)藥創(chuàng)新發(fā)展規(guī)劃綱要》，明確了中醫(yī)藥發(fā)展的“繼承、創(chuàng)新、現(xiàn)代化、國際化”四項(xiàng)基本任務(wù)，強(qiáng)調(diào)在“繼承”基礎(chǔ)上加以豐富發(fā)展、充實(shí)完善，才會(huì)有中醫(yī)的創(chuàng)新。②推動(dòng)經(jīng)典復(fù)方的方劑組學(xué)研究：方劑組學(xué)以中醫(yī)方劑作為研究內(nèi)容，以提取物的質(zhì)量控制為前提，以臨床療效為基礎(chǔ)，然后應(yīng)用基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)明確其作用靶點(diǎn)、研究其調(diào)控機(jī)制。③協(xié)作進(jìn)行病證結(jié)合的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究：陳可冀院士認(rèn)為，西醫(yī)診斷與中醫(yī)辨證的病證結(jié)合充分體現(xiàn)了中西醫(yī)兩種醫(yī)學(xué)的優(yōu)勢互補(bǔ)，是中西醫(yī)結(jié)合的最佳模式。④注重結(jié)合中醫(yī)臨床：進(jìn)行中醫(yī)藥轉(zhuǎn)化研究時(shí)，必須充分體現(xiàn)中醫(yī)整體觀及辨證論治的特色，針對證候的分類、治則治法、方藥選用、證候轉(zhuǎn)變、療效評(píng)價(jià)等關(guān)鍵環(huán)節(jié)，應(yīng)用各種組學(xué)技術(shù)，篩選出不同層面的與證候發(fā)生發(fā)展、辨證分類、治法方藥和療效評(píng)價(jià)相關(guān)聯(lián)的敏感性生物標(biāo)志物群，并給予其在臟腑及四診信息中的定位。

5結(jié)語

干細(xì)胞在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用范文5

【關(guān)鍵詞】生物化學(xué)；微信平臺(tái)；教學(xué)應(yīng)用

生物化學(xué)是醫(yī)學(xué)類院校一門極其重要的基礎(chǔ)學(xué)科，在臨床醫(yī)學(xué)中具有顯著的應(yīng)用價(jià)值。但由于該課程理論抽象、概念繁多以及代謝反應(yīng)錯(cuò)綜復(fù)雜的特點(diǎn)一直是生物化學(xué)教學(xué)中亟待解決的難題[1]。目前醫(yī)學(xué)類生物化學(xué)教材內(nèi)容有所刪減，根據(jù)安徽中醫(yī)藥大學(xué)臨床專業(yè)學(xué)生的掌握水平來看，仍未達(dá)到良好的教學(xué)效果。面對教學(xué)難題，教學(xué)改革的重點(diǎn)不僅是教材內(nèi)容本身，而應(yīng)適當(dāng)考慮教學(xué)方式的改革與創(chuàng)新。

1目前生物化學(xué)教學(xué)存在的問題

生物化學(xué)是安徽中醫(yī)藥大學(xué)臨床各專業(yè)的一門基礎(chǔ)課程，在臨床和科研中起著舉足輕重的作用。但由于生物化學(xué)的學(xué)科特點(diǎn)，一定程度上影響了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，學(xué)生對生物化學(xué)的學(xué)習(xí)存在抵觸和懼怕。目前安徽中醫(yī)藥大學(xué)生物化學(xué)教學(xué)中存在的主要問題總結(jié)如下：（1）學(xué)生化學(xué)基礎(chǔ)參差不齊。我校臨床專業(yè)實(shí)行文理科招生，學(xué)生化學(xué)基礎(chǔ)參差不齊，其中文科學(xué)生的化學(xué)三基知識(shí)大多停留在初中階段，導(dǎo)致教學(xué)進(jìn)度和教學(xué)內(nèi)容難以統(tǒng)一。（2）學(xué)生認(rèn)知程度不足。臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)學(xué)生普遍對該門課程認(rèn)知程度不足，生物化學(xué)的重要性尚未充分體現(xiàn)，學(xué)生并未把生物化學(xué)和臨床實(shí)踐有效連接起來。（3）教學(xué)形式單一。目前我校生物化學(xué)理論教學(xué)仍采用傳統(tǒng)的講授法，學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性未充分調(diào)動(dòng)，一定程度上影響了學(xué)生的學(xué)習(xí)熱情。（4）教學(xué)學(xué)時(shí)不足。我校臨床專業(yè)生物化學(xué)理論教學(xué)僅有40學(xué)時(shí)，在這種學(xué)時(shí)較少的情況下，授課教師只能采用滿堂灌的方式，很難激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性和主動(dòng)性。（5）課程銜接不充分。其它醫(yī)學(xué)相關(guān)課程與生物化學(xué)存在廣泛的聯(lián)系，這就要求學(xué)生在學(xué)習(xí)生物化學(xué)前具備一定的醫(yī)用化學(xué)等知識(shí)。但由于部分文科學(xué)生基礎(chǔ)薄弱等多種原因，在學(xué)習(xí)生物化學(xué)之前，對醫(yī)學(xué)相關(guān)課程特別是醫(yī)用化學(xué)的知識(shí)掌握程度不夠。（6）缺乏師生交流。授課教師與學(xué)生的交流機(jī)會(huì)少，導(dǎo)致學(xué)生在日常學(xué)習(xí)中遇到問題得不到及時(shí)解答，挫傷了學(xué)生學(xué)習(xí)的欲望。

2微信平臺(tái)在生物化學(xué)教學(xué)中的應(yīng)用

微信是一款具有支持語音、視頻、圖片和文字傳送，具有多人群聊、實(shí)時(shí)交流功能的特色手機(jī)應(yīng)用軟件[2]。隨著微信平臺(tái)在大學(xué)生中的普及，在高校各學(xué)科教學(xué)應(yīng)用的越來越廣泛，給高校師生提供了一個(gè)彼此交流、共享知識(shí)的新的輔學(xué)習(xí)平臺(tái)。它是移動(dòng)學(xué)習(xí)和傳統(tǒng)課堂教學(xué)相結(jié)合的一項(xiàng)新技術(shù)，是一種易于接受的輔助教學(xué)手段[3]。授課教師可以根據(jù)課程特點(diǎn)與學(xué)生特點(diǎn)，進(jìn)行針對性的教學(xué)設(shè)計(jì)，通過微信平臺(tái)傳送到學(xué)生手機(jī)終端。學(xué)生可以隨時(shí)進(jìn)行課下學(xué)習(xí)，解決問題，充分實(shí)現(xiàn)師生互動(dòng)交流，是傳統(tǒng)教學(xué)模式的一種創(chuàng)新。

2.1課前建立資源庫，充分準(zhǔn)備教學(xué)內(nèi)容

上課一周前，組建授課班級(jí)微信群，推送相關(guān)學(xué)習(xí)材料（包括教學(xué)目標(biāo)、教學(xué)重難點(diǎn)、教學(xué)課件、知識(shí)點(diǎn)總結(jié)、自主學(xué)習(xí)任務(wù)單、同步習(xí)題等），讓學(xué)生對即將所學(xué)內(nèi)容進(jìn)行充分預(yù)習(xí)。學(xué)生通過教材、圖書館、網(wǎng)絡(luò)等多種途徑完成學(xué)習(xí)材料，并在上課前將預(yù)習(xí)情況通過微信反饋給授課教師。授課教師對學(xué)生反饋的情況進(jìn)行分析，找出學(xué)生已經(jīng)掌握的知識(shí)點(diǎn)和需要課堂教學(xué)重點(diǎn)講授的內(nèi)容。同時(shí)，授課教師可以在微信平臺(tái)上傳、轉(zhuǎn)載有趣的相關(guān)病例討論資料、實(shí)時(shí)新聞、醫(yī)學(xué)前沿等，拓展學(xué)生視野，提高學(xué)習(xí)積極性，擴(kuò)大學(xué)習(xí)廣度和深度，提高學(xué)生對專業(yè)的熱愛度。

2.2互動(dòng)式課堂教學(xué)

通過授課教師課前的學(xué)習(xí)材料以及授課教師在課堂上有針對性地進(jìn)行知識(shí)點(diǎn)講解后，學(xué)生則可以根據(jù)自己的預(yù)習(xí)結(jié)果在課堂教學(xué)中抓住重點(diǎn)，做到心中有數(shù)、有的放矢，提高學(xué)習(xí)效果。這種模式能讓學(xué)生與教師有更多的時(shí)間進(jìn)行交流，使傳統(tǒng)的講授式教學(xué)方法轉(zhuǎn)變?yōu)閹熒?dòng)交流和探討學(xué)習(xí)，從而提高了學(xué)生主動(dòng)學(xué)習(xí)的積極性。

2.3課后交流反饋

通過微信平臺(tái)，學(xué)生課后學(xué)習(xí)中遇到困惑和無法解決的問題時(shí)，可及時(shí)與授課教師及班級(jí)其它同學(xué)進(jìn)行互動(dòng)、討論，發(fā)揮學(xué)習(xí)主動(dòng)性，提高學(xué)習(xí)積極性。授課教師課后可以利用微信平臺(tái)檢查學(xué)生對所講知識(shí)點(diǎn)的掌握情況，然后獲得學(xué)生的反饋信息，最后進(jìn)行課堂小結(jié)與反思，及時(shí)優(yōu)化教學(xué)方法、方式，努力達(dá)到良好的教學(xué)效果。授課教師在每章教學(xué)結(jié)束后可以利用微信平臺(tái)進(jìn)行在線測試，對學(xué)生進(jìn)行階段性評(píng)價(jià)，及時(shí)了解學(xué)生的掌握情況，發(fā)現(xiàn)學(xué)生學(xué)習(xí)中存在的問題，及時(shí)給予糾正。

3微信平臺(tái)應(yīng)用在生物化學(xué)教學(xué)中的優(yōu)勢

傳統(tǒng)的課堂灌輸式教學(xué)模式抑制了學(xué)生的學(xué)習(xí)熱情，如何激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣，培養(yǎng)學(xué)生對知識(shí)點(diǎn)理解能力、應(yīng)用能力是生物化學(xué)課程改革的重要目標(biāo)。隨著現(xiàn)代網(wǎng)絡(luò)技術(shù)的蓬勃發(fā)展，網(wǎng)絡(luò)環(huán)境不斷優(yōu)化，在生物化學(xué)課程改革過程中，只要合理設(shè)計(jì)，以手機(jī)為媒介的微信互動(dòng)必然成為高效的教學(xué)輔助工具，發(fā)揮積極的作用[4]。

3.1傳統(tǒng)教學(xué)的有力補(bǔ)充

微信平臺(tái)的應(yīng)用對傳統(tǒng)的課堂教學(xué)是一個(gè)有力的補(bǔ)充，在一定程度上能夠解決我校生物化學(xué)課時(shí)少，內(nèi)容多的矛盾。在傳統(tǒng)的講授方式中，授課教師在課堂上機(jī)械的向?qū)W生灌輸生物化學(xué)的知識(shí)點(diǎn)，學(xué)生并未完全理解教師講授的內(nèi)容，也不可能把課堂中學(xué)習(xí)的內(nèi)容融會(huì)貫通。利用微信教學(xué)平臺(tái)，學(xué)生可以方便快捷的學(xué)習(xí)，它與傳統(tǒng)教學(xué)相輔相成，是傳統(tǒng)教學(xué)的重要補(bǔ)充形式。

3.2培養(yǎng)學(xué)生的興趣，激發(fā)學(xué)習(xí)的積極性

微信平臺(tái)是目前學(xué)生非常喜愛并經(jīng)常使用的網(wǎng)絡(luò)交流平臺(tái)，以此平臺(tái)輔助生物化學(xué)教學(xué)，學(xué)生樂于接受。從傳統(tǒng)的“教師-教材-學(xué)生”轉(zhuǎn)變?yōu)樾滦偷摹敖處?教材-微信-學(xué)生”，學(xué)生可以通過微信，下載到與生物化學(xué)相關(guān)的材料進(jìn)行輔助學(xué)習(xí)。一方面學(xué)生在課堂上可以獲得有限的知識(shí)，另一方面學(xué)生又可以通過微信獲取更多的相關(guān)知識(shí)，這種教學(xué)模式將有助于學(xué)生將教學(xué)重點(diǎn)掌握的更牢，教學(xué)難點(diǎn)理解得更加透徹，能夠激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)的興趣。在這種教學(xué)模式下，學(xué)生由“被動(dòng)學(xué)習(xí)”變?yōu)椤爸鲃?dòng)學(xué)習(xí)”，授課教師由“主導(dǎo)者”轉(zhuǎn)變?yōu)椤昂献髡摺薄?/p>

3.3加強(qiáng)師生交流溝通，構(gòu)建教學(xué)輔助平臺(tái)

教學(xué)過程是情感過程和認(rèn)知過程的統(tǒng)一。融洽的師生感情有助于學(xué)生非智力因素的開發(fā)，并能夠提高課堂教學(xué)效果。目前，授課教師課下很少與學(xué)生當(dāng)面交流并答疑解惑。學(xué)生遇到的問題如果未能及時(shí)解答，會(huì)影響學(xué)習(xí)該門課程的學(xué)習(xí)積極性和效果。微信平臺(tái)作為共同語言把授課教師與學(xué)生聯(lián)系起來，通過微信聊天、朋友圈等進(jìn)行交流和溝通，拉近了師生距離，建立了良好的師生感情，使授課教師的角色由單純的老師轉(zhuǎn)變?yōu)槔蠋熀团笥眩玫搅藢W(xué)生的廣泛支持，通過授課教師和學(xué)生的互動(dòng)交流，對教學(xué)目標(biāo)的圓滿完成具有積極的促進(jìn)作用，授課教師也能及時(shí)反思教學(xué)過程，改變教學(xué)策略，以此逐步提高教學(xué)質(zhì)量。

3.4促進(jìn)教師教學(xué)水平逐步提高

在以微信平臺(tái)為輔助的教學(xué)模式下，學(xué)生掌握和理解的知識(shí)進(jìn)一步增加，他們會(huì)提出更多的專業(yè)問題，這就要求授課教師應(yīng)充分利用課余時(shí)間拓寬知識(shí)領(lǐng)域，并及時(shí)掌握生物化學(xué)的最新理論和研究成果。通過微信平臺(tái)向?qū)W生介紹生物化學(xué)方向的重大進(jìn)展。例如，體細(xì)胞克隆的流程，干細(xì)胞的研究進(jìn)展等。這些資料給學(xué)生打開了一扇窺視生物化學(xué)前沿的窗口。微信平臺(tái)也是自由、平等的社交平臺(tái)，學(xué)生可表達(dá)自己對授課教師的喜愛和肯定，同時(shí)學(xué)生也可以向授課教師提出一些教學(xué)上的建議或意見，授課教師可以實(shí)時(shí)的根據(jù)學(xué)生的反饋及時(shí)地進(jìn)行反思。這樣授課教師將會(huì)投入更多的精力和熱情在課堂教學(xué)中，不斷豐富教學(xué)內(nèi)容，改進(jìn)教學(xué)方法，促進(jìn)教學(xué)質(zhì)量的提高。

4網(wǎng)絡(luò)教學(xué)平臺(tái)應(yīng)用展望

微信教學(xué)平臺(tái)輔助教學(xué)創(chuàng)造了一個(gè)新型的教學(xué)模式，實(shí)現(xiàn)了與傳統(tǒng)課堂教學(xué)的優(yōu)勢互補(bǔ)，正逐漸成為高校生物化學(xué)教學(xué)改革的重要手段之一[5]。授課教師應(yīng)該積極更新教學(xué)觀念，努力提高專業(yè)素養(yǎng)，掌握更多的網(wǎng)絡(luò)新技術(shù)，努力探索網(wǎng)絡(luò)環(huán)境下的教學(xué)模式，盡快適應(yīng)新媒體時(shí)代教學(xué)的挑戰(zhàn)。如何能更好地發(fā)揮授課教師在微信平臺(tái)輔助教學(xué)中的指導(dǎo)作用，建立更加合理的、完善的、操作性強(qiáng)的網(wǎng)上作業(yè)、網(wǎng)上測試、教學(xué)效果評(píng)價(jià)體系等，還有待于進(jìn)一步的研究。

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干細(xì)胞在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用范文6

【關(guān)鍵詞】 甲狀腺腫瘤； 外科手術(shù)； 保守治療； 效果

中圖分類號(hào) R736.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1674-6805（2016）4-0046-02

doi：10.14033/ki.cfmr.2016.4.026

甲狀腺腫瘤是一種內(nèi)分泌腫瘤，為臨床常見病癥，具有多發(fā)性。甲狀腺腫瘤分為良性與惡性兩種，部分發(fā)展為惡性淋巴瘤和癌癥，大多數(shù)發(fā)生良性病變。在甲狀腺腫瘤的治療過程中，隨著臨床醫(yī)學(xué)的發(fā)展，目前有多種治療方法，外科手術(shù)治療與保守治療是主要的治療方法類型[1-3]。本次研究將選取2014年3月-2015年3月筆者所在醫(yī)院收治的甲狀腺腫瘤患者78例作為研究對象，探討甲狀腺腫瘤外科手術(shù)冶療效果，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年3月-2015年3月筆者所在醫(yī)院收治的甲狀腺腫瘤患者78例作為研究對象，隨機(jī)分為觀察組與對照組，各39例。觀察組患者男18例，女21例，年齡21～61歲，平均（42.6±13.2）歲；病程5個(gè)月～19年，平均（3.1±1.2）年。對照組患者男17例，女22例，年齡20～59歲，平均（42.3±12.9）歲；病程6個(gè)月～18年，平均（3.0±1.3）年。此次研究方法與目的均告知患者及其家屬，均在自愿原則下參加本次試驗(yàn)，且簽署知情同意書。兩組患者的性別、年齡、病程等一般資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

對照組采取保守治療。對患者疾病屬性和發(fā)展進(jìn)度進(jìn)行了解、分析，對患者的身體機(jī)能進(jìn)行全面的檢查與分析，制定出調(diào)理方案，通過對患者體質(zhì)進(jìn)行有效的改善，來達(dá)到對疾病的治愈能力。

觀察組采取外科手術(shù)治療。對患者進(jìn)行全面的術(shù)前檢查，主要采用CT、高頻超聲檢查，對患者的病灶性質(zhì)與大小進(jìn)行了解分析，制定最佳的手術(shù)時(shí)間，行手術(shù)治療。依據(jù)目前甲狀腺腫瘤外科手術(shù)治療指征標(biāo)準(zhǔn)，選取合適的外科手術(shù)治療方法。對于原發(fā)狀腫瘤（直徑

1.3 觀察指標(biāo)與療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

觀察比較兩組患者治療效果和復(fù)況。療效評(píng)價(jià)指標(biāo)：（1）治愈：臨床癥狀消失，無復(fù)發(fā)，無其他并發(fā)癥。（2）顯效：臨床癥狀消失，有復(fù)發(fā)或者其他并發(fā)癥。（3）有效：臨床癥狀基本消失，有復(fù)發(fā)與其他并發(fā)癥。（4）無效：臨床癥狀未改善或病情加劇[4]。總有效率=治愈率+顯效率+有效率。復(fù)發(fā)率=復(fù)發(fā)例數(shù)/（總例數(shù)-無效例數(shù)）[5]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 17.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)。P

2 結(jié)果

2.1 觀察組患者手術(shù)治療情況

觀察組手術(shù)中出血量為20.5～70.5 ml，平均（36.5±8.5）ml；手術(shù)時(shí)間為50.6～98.5 min，平均（64.9±10.2）min；住院時(shí)間為5～13 d，平均（7.2±0.6）d。觀察組患者中出現(xiàn)胸部麻木不適

1例，切口淤血1例，暫時(shí)性喉返神經(jīng)損傷2例，并發(fā)癥發(fā)生率為10.3%，護(hù)理之后癥狀消失。

2.2 兩組患者治療效果和復(fù)發(fā)率比較

兩組復(fù)發(fā)率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；觀察組治療總有效率為82.1%，明顯高于對照組的61.5%，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=4.052，P

3 討論

本次研究結(jié)果表明，觀察組手術(shù)中出血量為20.5～70.5 ml，平均（36.5±8.5）ml；手術(shù)時(shí)間為50.6～98.5 min，平均（64.9±10.2）min；住院時(shí)間為5～13 d，平均（7.2±0.6）d。觀察組患者中出現(xiàn)胸部麻木不適1例，切口淤血1例，暫時(shí)性喉返神經(jīng)損傷2例，并發(fā)癥的發(fā)生率為10.3%，護(hù)理之后癥狀消失。對甲狀腺腫瘤患者行外科手術(shù)冶療，手術(shù)效果較好，手術(shù)時(shí)間短，術(shù)中出血量較少，但是術(shù)后有并發(fā)癥的發(fā)生，需要結(jié)合較好的護(hù)理進(jìn)行處理。對患者可能造成一定的心理緊張，需要加強(qiáng)對患者的心理護(hù)理。兩組復(fù)發(fā)率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），采用保守治療與外科手術(shù)治療均會(huì)出現(xiàn)病情反復(fù)的現(xiàn)象，需要在臨床醫(yī)學(xué)中對這一問題進(jìn)行更加深入的研究，希望在未來能有所進(jìn)展。觀察組治療總有效率為97.4%，明顯高于對照組的74.4%，組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

林舒文[9]在腔鏡在甲狀腺手術(shù)患者應(yīng)用中的護(hù)理配合與管理探討中，討論了甲狀腺腫瘤外科手術(shù)治療中腔鏡手術(shù)與術(shù)后護(hù)理之間的重要關(guān)系，與本次研究中得出術(shù)后護(hù)理能夠有效促進(jìn)并發(fā)癥狀的消失具有一致性。可見，在臨床上對甲狀腺腫瘤患者進(jìn)行外科手術(shù)治療的過程中，需要加強(qiáng)護(hù)理措施，提高護(hù)理效果，幫助患者消除術(shù)后并發(fā)癥，促進(jìn)患者早日康復(fù)。李家發(fā)等[10]在甲狀腺側(cè)葉切除術(shù)治療孤立性甲狀腺結(jié)節(jié)78例臨床分析中，討論了甲狀腺腫瘤外科手術(shù)治療中甲狀腺側(cè)葉切除術(shù)對孤立性甲狀腺結(jié)節(jié)的治療效果，其總有效率為85.5%，本次研究所得結(jié)果基本一致，雖然為甲狀腺腫瘤外科手術(shù)治療中的個(gè)別手術(shù)方法的治療，但具有一定的參考價(jià)值。因此，對甲狀腺腫瘤患者采取外科手術(shù)治療方法，具有普遍的應(yīng)用意義和較好的應(yīng)用效果，同時(shí)能夠促進(jìn)相關(guān)護(hù)理的發(fā)展。對患者的康復(fù)和生活質(zhì)量的提高具有十分重要的意義。

綜上所述，本次研究通過對外科手術(shù)治療甲狀腺腫瘤的手術(shù)中出血量、手術(shù)時(shí)間以及術(shù)后并發(fā)癥、復(fù)發(fā)率的研究分析，了解到甲狀腺腫瘤外科手術(shù)冶療效果顯著，手術(shù)時(shí)間短，術(shù)中出血量較少，但是術(shù)后易發(fā)生并發(fā)癥和復(fù)發(fā)現(xiàn)象。同時(shí)，結(jié)合保守治療進(jìn)行探討，比較兩種治療方式在甲狀腺腫瘤治療中的臨床療效，發(fā)現(xiàn)保守治療不會(huì)有并發(fā)癥現(xiàn)象的發(fā)生，在臨床治療過程中可與保守治療相結(jié)合，以促進(jìn)患者病情好轉(zhuǎn)與早日康復(fù)。

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