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白細胞范文1
【關鍵詞】 尿液;白細胞酯酶試驗;鏡檢白細胞;分析
隨著尿液分析儀的廣泛使用,干化學試劑帶法已作為尿液檢驗的常規項目;尿沉渣人工鏡檢耗時、費力,以致有許多工作人員不愿意進行此項檢驗。筆者使用兩種方法聯合檢測286例尿液標本,將其中的有關白細胞檢驗項目進行統計分析,結果報告如下。
1 材料與方法
1.1標本來源 本院門診以及住院患者共286例,年齡6~69歲,平均29歲。其中男131例,女155例。
1.2 方法 干化學法白細胞酯酶試驗:使用Uritest-200尿液分析儀及其配套試劑,嚴格按照使用要求及說明,進行實驗操作。取新鮮尿液10 ml,混勻,浸入檢測試紙條,1 s后取出,放置于儀器內自動檢測,打印報告結果。結果報告:(-)、(±)、(+)、(++)、(+++)、(++++)。本次實驗,白細胞酯酶試驗檢測結果(±)統計為陽性。鏡檢白細胞:留取新鮮尿液標本10.0 ml于試管中,在1200~1300 r/min轉速條件下,離心 5 min,棄去上清液,留沉渣0.2 ml。充分混勻后,取20ul 滴在載玻片上,加蓋蓋玻片(1.8~1.8 cm ),使用OLYMPUS光學顯微鏡進行檢測。先以較弱的光線,使用低倍鏡觀察全貌,再用高倍鏡仔細辨認白細胞(WBC)。結果報告:WBC: x 個/高倍視野(HPF )[1],本次實驗,白細胞:>5個/HPF 判為陽性。將檢驗結果進行統計,比較分析。
2 結果
見表1。
表1
286例尿液白細胞酯酶試驗與鏡檢白細胞檢驗結果(例)
白細胞酯酶試驗鏡檢白細胞結果
陽性陰性合計
陽性17421
陰性3262265
合計 20266286
干化學法白細胞酯酶試驗陽性率為7.3%,鏡檢白細胞陽性率為7.0%。
3 討論
兩種方法檢測陽性率相差不大,但是陰性、陽性結果之間有相互交叉的情況,這與各自不同的實驗原理及其相關影響因素有著密切的關系。白細胞酯酶試驗原理:細胞胞質含嗜苯胺藍顆粒的細胞,如中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、單核細胞和巨噬細胞等均含有白細胞酯酶,該酶能水解吲哚酚酯,生成吲哚酚和有機酸,吲哚酚可進一步氧化形成靛藍;或吲哚酚和重氮鹽發生反應生成重氮色素,使試帶發生顏色變化,尿液分析儀檢測這種變化,從而報告出相應的檢驗結果[2]。鏡檢白細胞則是利用顯微鏡的放大作用,將細胞等有形成分呈現于鏡下(如進行染色分析,則效果更佳),根據觀察到的情況,進行結果報告。至于尿液白細胞酯酶試驗陽性,鏡檢白細胞陰性的結果,可能存在以下原因:(1)陰道分泌物污染可以導尿液白細胞酯酶試驗致假陽性[1];(2)尿液標本放置時間過長、低滲尿、高PH尿或者標本處置不當等,尿液中的白細胞被破壞,顯微鏡下看不見,或僅見細胞碎片;(3)尿沉渣內白細胞含量較少且未充分混勻,細胞分布不均,以至鏡檢結果陰性。這種現象在白細胞酯酶試驗結果為(±)的情形較易出現。尿液白細胞酯酶試驗結果陰性,鏡檢白細胞陽性,其可能原因有 :(1)尿液中蛋白濃度高(>5.0 g/L)、葡萄糖濃度高(大于30.0 g/L)或尿液比密度降低等均可導致白細胞酯酶試驗假陰性結果;(2)尿中某些藥物的影響,如尿中高濃度四環素可以導致白細胞酯酶試驗假陰性;(3)試帶失效、某些因素致白細胞酯酶試劑靈敏度降低,未能顯示陽性結果;(4)尿液白細胞中的單核細胞、淋巴細胞不與白細胞酯酶試劑發生反應。在腎移置患者發生排異反應時,尿中以淋巴細胞為主或其他病因引起的單核細胞增多的尿液時,白細胞酯酶為陰性結果[3];(5)尿中或者某些上皮細胞、陰道滴蟲等誤判為白細胞等;(6)其他人為錯誤等。
參 考 文 獻
[1] 葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程.東南大學出版社,2006:293-296.
白細胞范文2
【關鍵詞】
全血;去白細胞全血;去白細胞懸浮紅細胞;儲存期末溶血率
溶血是紅細胞膜的完整性受到破損或裂解釋放血紅蛋白引起血漿顏色改變,儲存期末紅細胞制品的溶血程度是評價保存紅細胞質量的重要參數,常用溶血率來表示。雖然已有多種措施能提高紅細胞在血液制備、保存和運輸過程中的穩定性,但紅細胞離體后仍將增加溶血的危險,其溶血率并隨保存期的延長而明顯升高。紅細胞制品中游離血紅蛋白含量過高,對于接受輸血治療的患者具有潛在的安全隱患[1]。《全血及成分血質量要求(GB18469-2012)》中增加了紅細胞儲存期末溶血率標準,作者于2012年8~12月對全血﹑去白全血和去白細胞懸浮紅細胞儲存期末溶血率進行比較。現報告如下。
1材料與方法
1.1材料采血用由山東威高集團醫用高分子有限公司提供的采血袋與白細胞過濾器一體的四聯袋(血液保存液為CPD-A;紅細胞保存液為MAP,含腺嘌呤、甘露醇﹑氯化鈉﹑枸櫞酸﹑枸櫞酸鈉、葡萄糖和磷酸二氫鈉),大容量低溫離心機(德國賀力士),低溫操作臺,分漿夾,熱合機,無菌結合機,冰箱(4℃±2℃,日本SANYO公司)。
3討論
由表Ⅰ可以看出,三種不同血液制品儲存期末溶血率均低于0.8%,符合《全血及成分血質量要求(GB18469-2012)》,但也發現儲存期末溶血率C組與A﹑B兩組比較差異都具有統計學意義(P
本結果也顯示,三種不同血液制品儲存期末溶血率A、B兩組比較差異無統計學意義,提示雖然過濾前混勻及過濾使部分紅細胞的穩定性和變形能力降低,增加了儲存期末溶血的風險,但在一定程度上彌補了白細胞在保存期間破損導致的紅細胞溶血,因為未過濾血液中存在的白細胞可能導致增加保存期間的溶血,由于在保存期間,白細胞破損并釋放出一些化學物質和酶如過氧化氫和蛋白酶等,已有報道指出,保存期白細胞釋放的蛋白酶可造成紅細胞溶血,破壞紅細胞的代謝和活性。
本研究對三種不同血液制品儲存期末溶血率進行分析,其檢測樣本均符合《全血及成分血質量要求(GB18469-2012)》,但由于樣本數量有限,不能以偏概全,因為血液離體后雖然有保養液保存,但血液在制備和保存過程中發生了物理和生物化學的變化,細胞膜結構發生一系列變化,紅細胞膜的結構及其變形性是影響紅細胞變形性能及血液流動,特別是通過微循環的重要因素之一[6]。因此為了提高輸血安全,保證血液質量,血液在采集、制備和保存過程中必須注意以下幾個問題:①全血必須完全抗凝,避免采血量不足或過多,未經充分抗凝的血袋中有可見凝塊,切勿使用。②嚴格按按廠家說明使用白細胞濾器,成分制備人員必須經過必要的培訓,并定期檢測以保證設備使用按廠家說明進行。③保存超過1d的全血,在制備過程中必須特別小心,避免將裝有血液的血袋反復振搖﹑擠壓,白細胞過濾前可以用2次顛倒血袋方法來進行血液混勻,濾器的初始化應采用自然重力,避免將血液強行通過濾器,過濾過程中避免氣泡進入過濾系統。④全血制備去白細胞懸浮紅細胞過程中應避免高速離心,防止紅細胞過度壓縮,紅細胞用保養液懸浮時要小心,避免紅細胞被破壞。⑤全血或去白細胞懸浮紅細胞必須在合適的容器中運輸,此容器必須保持血液制品在規定的溫度內,不要將血液儲存在冷庫的通風口,此處溫度有可能低于規定的2~6℃。
參考文獻
[1]NightingaleMJ,NorfolkDR,PinchonDJ.Currentusesoftransfusionsets:acauseforconcern.TransfusMed,2010,20:291-302.
[2]陳冬梅,任芙蓉,龔曉燕,等.全血、懸浮紅細胞和去白細胞懸浮紅細胞儲存期末溶血率調查.北京醫學,2012,34(8):773-775.
[3]王云英,李興錄,張莉萍,等.血液經白細胞過濾后紅細胞膜的損傷.重慶醫科大學學報,2008,33(2):210-212.
[4]陸瑤,張嘉卿,周晨,等.白細胞濾除、離心對紅細胞的損傷分析.臨床輸血與檢驗,2006,23(4):212-213.
白細胞范文3
1、白細胞減少癥是由于原因不明和繼發于其他疾病之后而引起的疾病,分為原發性和繼發性兩大類,一般原發性原因不明,是繼發性者認為其病因可由急性感染,物理化學因素,血液系統疾病等。
2、一般白細胞減少應該及時檢查原因,再根據自己的具體情況進行治療,平時一定要注意自己身體的抵抗力提升,避免免疫力下降引起白細胞減少的現象,也避免長期服用藥物。在平時飲食上可以多吃一些易于消化和吸收的食物,注意增強自己的體質,養成良好的生活習慣。
(來源:文章屋網 )
白細胞范文4
幼兒白細胞計數的正常值是5-12,如果有發燒,且白細胞數下降的話,這個要考慮是病毒性的感染所致。
白細胞是人體與疾病斗爭的"衛士"。當病菌侵入人體體內時,白細胞能通過變形而穿過毛細血管壁,集中到病菌入侵部位,將病菌包圍﹑吞噬。如果體內的白細胞的數量高于正常值,很可能是身體有了炎癥。
(來源:文章屋網 )
白細胞范文5
關鍵詞:紅細胞 白細胞 顯微鏡檢查
Doi:10.3969/j.issn.1671-8801.2014.03.547
【中圖分類號】R9 【文獻標識碼】B 【文章編號】1671-8801(2014)03-0353-01
尿液檢查是診斷腎臟疾病和泌尿道疾病的重要方法。隨著醫學技術的發展,尿干化學法因其靈敏度高、快捷、標本用量少、重復性好等優點,已逐步在基層醫院普及。但是尿干化學法還不能完全替代顯微鏡檢查。在一些情況下,如管型、紅細胞、白細胞等可能導致假陽性或假陰性。這兩種方法均為臨床上常用的檢測方法,各有其優點及不足。本文分別用干化學法顯微鏡檢法對180例尿樣進行檢測,以探討尿液檢驗中顯微鏡檢查尿液紅細胞、白細胞的重要性。
1 材料與方法
1.1 樣本來源。取自住院患者晨尿中段尿液樣本160份,進行尿干化學分析和顯微鏡檢。
1.2 檢測儀器。采用優利特-500B尿液干化學分析儀和配套尿11項試紙;Olympus光學顯微鏡。
1.3 檢測方法。按照《全國臨床檢驗操作規程》第三版進行操作,用一次尿杯留取晨尿約30mL,取10mL置于特制的塑料離心管中,將試紙條浸入2s后取出,放于分析儀上作干化學檢測。完畢后將尿液于1500r/min離心5min,棄去上清,剩余0.2mL左右,混勻,先用低倍鏡觀察全片,再以高倍鏡仔細觀察,并計數每個視野內紅細胞、白細胞的數目,記錄方式為:×個細胞/HP,×個管型/LP。
1.4 參考范圍及結果判定。連續鏡檢10個視野:WBC:0~5個/HP,RBC:0~3個/HP,超出此范圍則判定為陽性。假陰性:干化學法正常,鏡檢異常。假陽性:干化學異常,鏡檢正常。
1.5 統計學方法。采用SPSS16.0軟件包進行統計學分析。組間的陽性率比較采用X2檢驗,以P
2 結果分析
對180例尿液樣本進行干化學法和顯微鏡法檢驗分析。干化學法RBC陽性94例,占58.75%,顯微鏡法陽性63例,占39.38%,差異具有統計學意義(X2=2.532,P
3 討論
3.1 目前,干化學法尿液分析儀以其方法簡捷、檢測快速、靈敏度高、重復性較好,一般可檢測10項及以上等優點而被廣泛地應用。但由于干化學分析儀原理是試劑帶墊呈色反應與光、電學相結合而檢測紅細胞和白細胞,從而對有形成分的檢測具有一定局限性。由于尿液成分復雜,干化學項目繁多,其檢測原理各不相同,所以影響因素很多,易出現假陰性和假陽性結果;而尿沉渣鏡檢雖操作繁瑣,但標準化的顯微鏡檢查仍是尿沉渣分析的“金標準”,其通過顯微鏡的放大作用,直接將紅細胞、白細胞等有形成分直觀、真實地呈現于鏡下。
3.2 干化學法檢測紅細胞原理:血紅蛋白類過氧化物作用催化分解過氧化物,釋放出氧使鄰聯甲苯胺氧化而呈色。其色澤的深淺與尿中的血紅蛋白或紅細胞量呈正比。多數情況下可以真實反映尿中紅細胞的情況,但某些情況下與鏡檢結果不一致。尿路感染而出現的分泌物和某些氧化物的污染如次氯酸鹽可引起干化學法假陽性,一些疾患如腎病引起尿中紅細胞破壞、溶血性疾病導致血紅蛋白尿等都能產生假陽性。尿液pH值低、比重低、放置時間長,尿中紅細胞就會開始溶解,也會導致假陽性結果產生。維生素C具有還原性,可競爭性抑制反應,若尿中含有大量的維生素C,可使干化學法檢測紅細胞呈現假陰性。
3.3 對于白細胞的檢測而言,干化學法的檢測原理是基于中性粒細胞胞質內含有特異性酯酶,而這種酯酶在紅細胞、淋巴細胞、單核細胞、血小板、血清、腎臟及尿液中均不存在,試紙反應基質是吲哚酚羥基酸酯,在酯酶作用下將其轉變為吲哚酚,再經氧化而產生靛藍,以其顏色深淺換算成白細胞數。但這只能檢測胞質內含酯酶的粒細胞,而不與淋巴細胞和單核細胞反應。因此,當尿液中只有淋巴細胞或單核細胞時,對淋巴細胞和單核細胞會漏診,從而產生假陰性結果。
本文研究結果顯示,干化學法尿液白細胞陽性率為23.15%,低于顯微鏡檢尿液白細胞的35.62%,差異具有統計學意義(X2=3.218,P
3.4 要加強尿常規檢測的規范化和標準化,必須把干化學法和尿沉渣鏡檢結合起來,相互補充,如果兩種方法結果明顯不符,必須結合臨床綜合分析,只有這樣才能提高尿液檢測的準確性,為臨床提供準確的診斷和治療依據。通過本研究證實,兩種操作方法有各自的優缺點,只有將兩種方法有機結合,綜合分析,才能提高尿液檢測的準確性和可靠性,為臨床提供準確的參考、診斷和治療依據。
4 結語
尿液紅細胞、白細胞的檢查對腎疾病的檢測有重要意義,是泌尿系統疾病必不可少的診斷手段之一。目前,無論多么先進的尿分析儀,都無法完全取代尿液的顯微鏡檢查,而只能起到篩出的作用。中華醫學會多次專家研討之后也指出:在化學試劑帶的質量合格和尿液分析儀運轉正常的情況下,實驗結果中紅細胞、白細胞、蛋白和亞硝酸鹽中若有一項結果為陽性,就必須同時進行顯微鏡檢查。這表明了顯微鏡檢查是尿常規檢查中不可或缺的,也無法替代。只有結合顯微鏡檢查,才能提高尿液檢查的準確度和靈敏度,從而為臨床診斷及治療提供準確的依據。
參考文獻
[1] 叢玉隆,王淑娟.今日臨床檢驗學[M].北京:中國科技出版社,1997:236-239
白細胞范文6
妊娠合并哮喘是妊娠合并癥中最常見的一種,其發生率為3%~8.4%,且在世界各地呈上升趨勢[1]。哮喘喘息發作特別是重癥哮喘和哮喘持續狀態,可對胎兒和孕婦造成不良影響,評價哮喘婦女與非哮喘婦女妊娠結局的對照研究顯示,妊娠期哮喘婦女發生子癇前期、低出生體重兒和早產的危險性增加,圍生期死亡率較非哮喘女性高出2倍[2]。研究認為,妊娠可能激活易感女性體內與哮喘相關的炎癥途徑,導致并加重孕產婦哮喘的嚴重程度[3]。CD4+T細胞是效應T細胞的重要成分,其中Th17是特異性產生IL-17的T細胞亞型,被認為是介導炎癥反應的重要細胞[4]。研究者們發現,Th17細胞與Treg細胞相互抑制,分化發育以及功能的發揮、改變,都可能與哮喘發病有關,提示Th17/Treg細胞的穩態對維持正常免疫應答具有重要意義,但迄今為止該平衡狀態與妊娠期哮喘病程變化的機制尚不明確[5]。本研究擬通過觀察妊娠期哮喘小鼠模型T細胞亞群Th17及Treg細胞的變化情況,為進一步闡明Th17/Treg細胞免疫平衡在妊娠期哮喘發病機制中的調節作用提供理論和實驗依據。
1材料和方法
1.1材料清潔級健康雌性BALB/c小鼠24只(第四軍醫大學實驗動物中心),6~8周齡,體質量(20±2)g;雞卵清白蛋白(ovalbumin,OVA,GradeⅤ,純度>98%)、氫氧化鋁[Al(OH)3]、佛波酯、離子霉素、蛋白轉運抑制劑-BFA(美國Sig-ma);乙酰膽堿(methacholine,Mch,上海三愛思);電動霧化吸入器(英國葛蘭素史克);FIX&Perm試劑盒(固定/破膜劑,美國CALTAGLaboratories);熒光素標記抗小鼠mAb:異硫氰基(FITC)-anti-CD4、藻紅蛋白(PE)-anti-CD25、PE-anti-IL-17、別藻藍蛋白(APC)-anti-Foxp3、PE-anti-干擾素γ(IFN-γ)及同型對照(美國BD/Pharmingen);氣道阻力與肺順應性檢測系統(FinePointeRCsystem,美國BUXCO);流式細胞儀(FACSCaibur型,美國BectonDickinson)。
1.2方法
1.2.1實驗分組和模型構建模型構建根據實驗要求參照文獻[6]方法并加以改進。按照模型構建策略及干預措施的不同,將BALB/c小鼠隨機分為:妊娠期哮喘組(AP組)、非妊娠期哮喘組(ANP組)、健康妊娠組(HP組)及健康非妊娠組(HNP組),每組各6只。于實驗流程的0天(實驗當天)和7、14天時,分別給予AP組、ANP組腹腔注射含OVA/Al(OH)3的混懸液0.2ml[OVA100μg,Al(OH)340mg]致敏;給予HP組、HNP組腹腔注射只含5mgAl(OH)3/生理鹽水(normalsaline,NS)的混懸液0.2ml致敏。之后,AP組、HP組按2∶1的比例雌雄合籠至妊娠成功。于實驗流程的21天起,連續7天,每日將4組小鼠分別放至透明霧化箱內,AP組、ANP組以10g/LOVA/Al(OH)3霧化吸入,1次/d,40min/次進行激發;HP組、HNP組仍以等量Al(OH)3/NS霧化吸入,1次/d,40min/次進行激發以加強致敏。
1.2.2過敏反應評估依據文獻[7]的方法和觀察指標,監測并記錄各組小鼠致敏霧化激發40min后的臨床癥狀及生物學反應。
1.2.3肺功能檢測各組小鼠于末次激發24h后開始檢測,首先記錄小鼠氣道阻力基礎值。用NS霧化1min,然后再測定小鼠經0,10,20,30,40和50g/LMch霧化激發后的呼吸間歇(enhancedpause,Penh)值,每個濃度每次霧化1min,記錄3min。氣道反應性指標評定均以小鼠在NS激發后增強的Penh值為基線值,以Mch相應濃度激發下的Penh值與基線值的百分比來反映。Penh值(%)=(檢測Penh值-基礎Penh值)/基礎Penh值×100%。
1.2.4標本采集與處理小鼠肺功能檢測后,摘眼球放血并收集血清,-80℃凍存備用。頸椎脫臼處死,立即行頸前暴露,分離氣管并插入靜脈留置針,緩慢注入1mlPBS灌洗雙肺,見肺膨脹后反復抽吸3次,將回收的支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavagefluid,BALF)注入離心管中計量(回收率>80%為合格),4℃、1500r/min離心10min后收集上清,-80℃保存待測。吸取BALF中的細胞沉淀用NS重懸制備涂片,固定后行HE染色,連續計數400個細胞,計算細胞總數及嗜酸性粒細胞(eosinophils,Eos)、巨噬細胞(macropha-ges,Mac)、中性粒細胞(neutrophils,Neu)、淋巴細胞(lympho-cytes,Lym)所占百分比。BALF收集完畢后切取小鼠部分左肺組織備用。
1.2.5病理學觀察取各組小鼠部分左肺組織,40g/L多聚甲醛中固定24h,脫水、石蠟包埋、切片(4~6μm)行HE染色,光鏡下觀察氣道及肺組織炎性細胞浸潤等病理改變。
1.2.6流式細胞術檢測取肝素抗凝小鼠外周血100μl用RPMI1640等體積稀釋,調細胞密度1×105/L接種至6孔培養板,加入佛波酯50μg/ml和離子霉素1μg/ml共同刺激,再加入蛋白轉運抑制劑-BFA2μg/ml混均,37℃50ml/LCO2培養4~6h后收獲細胞。按抗體說明,測定管分別加FITC-anti-CD4、PE-anti-IL-17各20μl混勻,多聚甲醛固定20min,離心去上清,10g/L皂甙破膜10min;再加FITC-anti-CD4,PE-anti-CD25及APC-anti-Foxp3各0.2μl,對照管加入相應的同型對照,4℃避光孵育30min,10g/L皂甙緩沖液洗滌1次后,離心去上清,最后以PBS/多聚甲醛重懸細胞。FlowJoV7.3軟件分析Th17和Treg細胞所占CD4+T細胞比率變化。
1.2.7RT-PCR檢測嚴格按Trizol試劑說明提取小鼠肺組織細胞總RNA,紫外光法定量檢測A260/A280值,并計算RNA濃度,使用熒光定量逆轉錄試劑盒轉錄為cDNA,并以此為模板行PCR擴增。反應體系為50μl,上下游引物序列及條件見表1。反應條件:94℃預變性3min;94℃變性30s、58℃退火30s、72℃延伸1min,共30個循環;終末延伸72℃5min。以同時擴增的GAPDH為內參照,退火溫度56℃。PCR產物用12g/L瓊脂糖凝膠電泳檢測45min,每組實驗重復6次,采用Gel-pro軟件分析RT-PCR條帶平均灰度值并拍照,計算目的基因/GAPDH灰度比值,比較各樣本相對吸光度值并進行半定量分析。
1.3統計學處理用SPSS13.0軟件統計分析數據。計量資料以x珋±s表示,多個樣本組間比較采用單因素方差分析,兩組間樣本均數比較采用LSD檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。
2結果
2.1霧化激發后行為變化經致敏并激發后,HNP組無明顯過敏性反應;HP組多數未見明顯異常,僅個別小鼠偶見頭面部搔癢、煩躁不安等輕微反應。AP組和ANP組過敏性反應較重,于激發10min開始即出現搔抓頭、鼻、面部及軀干,明顯煩躁不安,隨著刺激時間的延長,呼吸加深、加快,表現為少動,前肢縮抬,腹肌抽搐,大、小便失禁,眼及口周組織浮腫,嚴重者對外界反應遲鈍,呼吸減慢或節律不規則,四肢癱軟甚至癱瘓。
2.2氣道反應性表現末次激發24h后,各組小鼠基礎肺阻力無顯著差異,隨著Mch給藥濃度逐漸增加,各組小鼠Penh值均出現隨Mch濃度升高而氣道反應性增強趨勢。Mch以0,10g/L激發時,各組組間Penh值差異不明顯。AP組從Mch30g/L開始,ANP組從Mch20g/L開始Penh值即明顯高于HP和HNP組(P<0.01)。尤其當Mch濃度達到40或50g/L時,ANP組小鼠氣道反應性最高,表現出敏感且過強的支氣管平滑肌收縮反應,Penh值也高于AP組(P<0.05)。見圖1。
2.3BALF中細胞計數和分類比較與HP組、HNP組相比較,AP組、ANP組BALF中Mac百分率均顯著降低(P<0.05);白細胞總數明顯升高,Neu、Eos和Lym增加,其中尤以Eos百分率增高顯著(P<0.01)。AP組與ANP組,HNP組與HP組組間比較,差異均無統計學意義。見表2,圖2。
2.4肺及氣道組織病理形態學變化光鏡下觀察可見,AP組病變嚴重、廣泛,細支氣管黏膜及下層伴行血管周圍有大量炎性細胞浸潤,以Eos浸潤為主,支氣管管腔內可見黏液栓堵塞,纖毛排列紊亂,上皮下基底層明顯增厚,上皮細胞、平滑肌細胞肥大增生,氣道上皮細胞壞死、脫落,肺泡間隔不同程度增寬,部分斷裂,形成肺氣腫(圖3A);ANP組也存在類似變化(圖3B);HP組僅呈現很輕微的形態學改變,部分支氣管黏膜輕度水腫,偶見炎性細胞浸潤,支氣管內皺褶減少及少許上皮脫落(圖3C);HNP組結構清晰、形態規則,基本無炎性細胞浸潤(圖3D)。
2.5肺組織中相關細胞因子mRNA表達所檢測小鼠肺組織中各細胞因子mRNA表達結果顯示,AP組IL-17、IL-23、IL-10均顯著高于HP組、HNP組(P<0.01);IFN-γ均顯著低于HP組、HNP組(P<0.01);ANP組肺組織各因子表達變化趨勢與AP組基本相同,組間無顯著差異。見表3,圖4。
2.6Th17及Treg細胞比率變化小鼠外周血中Th17及Treg細胞所占CD4+T細胞比率結果顯示,與HP組、HNP組相比較,AP組CD4+IL-17+T細胞(Th17)比值顯著升高(P<0.01);而Foxp3+T細胞(Treg)比值顯著降低(P<0.01);CD4+IL-17+/Foxp3+T細胞比值顯著升高(P<0.01),提示存在Th17/Treg比例失衡。ANP組Th17及Treg細胞比例與AP組無顯著差異。見圖5。
2.7相關性分析與氣道炎性指標相關分析表明,AP組小鼠肺組織中IL-17mRNA表達水平與BALF中的Neu、Eos絕對值呈顯著正相關(r=0.756,P<0.05;r=0.819,P<0.01)。