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永遠在身邊范文1
我在天堂,望著你,守在你身邊。
親愛的寶貝,不要害怕黑暗,天,肯定是晴的。只是偶暗一暗,睜開眼睛就是嶄新的明天。寶貝,你知道嗎?我好想把你擁懷里,吻吻你的臉。但……我只能靜靜的望著你,看著你均勻的呼吸,把小小的手含在嘴里。
媽媽快要堅持不住了,寶貝,原諒媽媽不能永遠陪著你。但是,寶貝,你會知道媽媽是很愛很愛你的。
寶貝……媽媽真的不想讓你一個人孤零零地活在世上。媽媽多么希望看著你長大,看著你學會走路,看著你柔柔的唇,聽你叫我一聲媽媽!
親愛的,我的寶貝,你的睫毛長長的,真好看!你微微上揚的嘴角,呵,你在笑啊,寶貝!寶貝,沒有……在沒有媽媽的日子,你一定要學會堅強,你一定要快樂!媽媽希望你做一個快樂的孩子。這……是媽媽的的一個心愿。
我的寶貝,我的孩子!你手中的那枚戒指是媽媽唯一能給你的東西了。以后,你一定要繼承我的幸福,不!一定要更幸福!
寶貝,媽媽好累好累,媽媽好想閉上眼睡一覺,真的……好累……
讓我再看你最后一眼,寶貝,媽媽多不舍得,多舍不得離開你,媽媽多堅強呵!沒有把眼淚落在寶貝的臉上,媽媽很堅強對吧!但,媽媽的心卻在滴著血……
寶貝,我走了!媽媽不會離開你,在天堂望著寶貝,守著寶貝,等來世再做寶貝的媽媽,把還未來得及對你的所有愛,用一百倍,一千倍償還給寶貝。
永遠在身邊范文2
就在今天中午吃飯時,我突然感到很難受。我的第一反應是頭昏腦漲,第二反應是渾身發熱。媽媽摸了摸我的額頭覺得有點兒熱,就從她包里拿出體溫計,不量不知道呀,一量嚇一跳!居然發燒都燒到38。6度了!媽媽十分著急,又想不到好辦法,就叫爸爸回來了。
爸爸媽媽把我送到了醫院以后給醫生檢查,醫生叔叔說我的病情稍微有點兒重,可能要住院,媽媽不知所措地說了一句:“好,好。”醫生和護士阿姨給我打了點滴,之后我就坐在床上看電視。
不知不覺晚上到啦!寧靜的夜晚即將到臨!忽然,一陣響聲把我和媽媽給提高了警惕性,一看,呦,原來是我的肚子叫啦,媽媽一聽,捧腹大笑,便說:“原來是你的肚子叫啦,我還以為,哈哈哈哈,這樣吧,我到樓下買碗面給你吃啊。”我連忙回答:“恩恩。”過了一會兒,媽媽用那驚人的速度買好了面,我怕眼看著一碗香氣十足的面迎我而來,我立馬狼吞虎咽的吃了起來。在這短短的幾分鐘里就被我吃完了。
吃完之后,媽媽說該睡覺了,于是我在媽媽的催促下邊睡著啦。別看就這個簡凡的夜晚,有一位母親正在為她的孩子又是蓋被子,又是擔心睡著了又踢被子咋辦,操心這個、那個,而那個孩子正在香香的睡著……
一眨眼,天亮了!我睡醒了,看見媽媽正依偎在我的身旁睡著,我幫她蓋了一下被子,不小心把媽媽給驚醒了,這是爸爸進來是,他的手里提著香噴噴的早飯,爸爸叫媽媽出去一下,我無意間聽見了他們的談話,媽媽說她做完一個晚上都沒有睡覺,就早上睡一會兒,我還聽見媽媽咳嗽了幾聲,這是我的眼了頓時嘩嘩的流了下來,媽媽連忙跑進來說:“你怎么了?干嘛哭呀?”我一時半會兒說不出口,穿著鞋子沖向媽媽緊緊地抱著她不放,便說:“媽媽,對不起,我讓你操心了,嗚嗚。”媽媽說傻孩子,你就是我身上的一塊肉,我能不疼你嗎,我能不照顧你嗎?”“媽媽把我的眼淚擦干,醫生進來了說:“情況很好可以出院了。爸爸跟著醫生去辦出院手續。
永遠在身邊范文3
【摘要】 目的:探討血紅素加氧酶1(HO1) 在鋁過負荷致神經元退行性變中變化和意義. 方法:雄性NIH小鼠75只,體質量24~26 g,隨機分為對照組,氯化鋁低劑量組(3.75 mg/d)和高劑量組(7.50 mg/d),每組25只. 各組分別采取腦室內注射人工腦脊液、1.25 g/L氯化鋁溶液或2.50 g/L氯化鋁溶液3 μL/只,1次/d,連續5 d,建立神經元退行性變模型;以血紅素加氧酶(HO)活性和HO1蛋白表達與丙二醛水平,金屬離子含量及海馬病理形態學變化關系評價HO1在鋁過負荷致神經元退行性變中的作用. 結果:與對照組相比,各氯化鋁組均可見海馬CA1區細胞層變薄伴明顯核固縮. HO1蛋白:氯化鋁低劑量組0.24±0.01,高劑量組 0.33±0.01; 鐵離子含量:低劑量組(31.34±2.85) mg/g,高劑量組(54.01±2.31) mg/g,均較對照組HO1蛋白 0.10±0.01,鐵離子含量(22.54±4.48) mg/g顯著升高,差異具有統計學意義(P
【關鍵詞】 血紅素加氧酶1; 鋁過負荷; 神經元退行性變;鋁/毒性
【Abstract】 AIM: To investigate the effect of heme oxygenase1 (HO1) on neurodegeneration induced by aluminum overloading (AO). METHODS: Seventyfive male NIH mice weighing 24-26 g were pided into control, aluminum chloride low dosage group (3.75 mg/d, LD) and high dosage group (7.50 mg/d, HD), which were intracerebraventricularly injected with 3 μL per mouse of artificial cerebrospinal fluid, 1.25 g/L aluminum chloride solution and 2.50 g/L aluminum chloride solution, respectively once a day for 5 d to build the neurodegenerative model. The effect of HO1 on neurodegeneration induced by AO was evaluated by parameters including HO activity, HO1 expression, content of malonaldehyde (MDA), levels of metal ions, and pathomorphological changes of hippocampi. RESULTS: The layer of CA1 pyramidal cells in both AO groups became thinner with pyknotic nuclei than control. The significant increases of HO1 expression (LD 0.24±0.01, HD 0.33±0.01) and level of iron [(LD (31.34±2.85) mg/g, HD (54.01±2.31) mg/g)] with elevation of MDA level, HO activity and aluminum level were observed in both AO groups, compared with control group [HO1 0.10±0.01, iron (22.54±4.48) mg/g, P
【Keywords】 heme oxygenase1; aluminum overloading; neurodegeneration; aluminum/to
0 引言
鋁過負荷是引起神經元退行性變疾病的重要原因之一[1],其發病機制迄今尚未完全闡明. 有研究發現鋁過負荷致神經元退行性變中鐵異常升高,且與神經元損傷程度相關[2]. Ke等[3]的研究也提示體內鐵異常升高涉及神經元退行性變的發生. 血紅素加氧酶1(heme oxygenase1,HO1)催化血紅素降解是生成內源性鐵的主要來源. 本研究擬采用本室建立的鋁過負荷致小鼠神經元退行性變模型,探討HO1在神經元退行性變中的變化及其與內源性鐵的關系,旨在揭示HO1參與神經元退行性變過程的本質.
1 材料和方法
1.1 材料 Ⅰ級NIH雄性小鼠75只,鼠齡55 d,體質量24~26 g(動物證書號:scxk20020001,由重慶醫科大學實驗動物中心提供);6磷酸葡萄糖、還原型輔酶Ⅱ(NADPH),氯化正鐵血紅素和6磷酸葡萄糖脫氫酶(美國Sigma公司);兔抗鼠HO1和HO2多克隆抗體(美國Oncogene公司);丙二醛測定試劑盒(南京生物建成公司);氯化鋁(AlCl.6H2O)分析純(上海興塔美興化工廠).
1.2 方法
1.2.1 動物分組 動物隨機分為對照組、氯化鋁低劑量組(3.75 mg/d)和高劑量組(7.50 mg/d),每組25只動物.
1.2.2 模型制作 參照文獻[4]的方法,制作不銹鋼導管(外徑0.6 mm,內徑0.4 mm)和錐形不銹鋼內芯(與外套吻合,下端與外套相平).以40 g/L水合氯醛400 mg/kg腹腔注射麻醉小鼠,俯臥固定. 剪去前囟周圍頭皮,刮去骨膜,于中線旁1.3 mm,前囟后0.3 mm鉆孔. 導管沿孔垂直插入2 mm,用牙托粉和502速凝膠水固定. 術后7 d,對照組小鼠腦室內注射人工腦脊液3 μL/只,其余兩組分別注射相同容積的1.25 g/L或2.50 g/L氯化鋁溶液;1次/d,連續5 d. 末次注射30 d后行各項檢測.
1.2.3 組織病理學檢測 小鼠以40 g/L水合氯醛400 mg/kg腹腔注射麻醉,仰臥固定,經左心室快速滴入肝素化磷酸緩沖液(PBS) 50 mL,然后緩慢滴入40 g/L多聚甲醛(PBS 0.1 mol/L,pH 7.4,4℃) 50 mL;同時剪碎肝臟作為血液和灌注液出口. 分離腦組織,于40 g/L多聚甲醛中固定,常規HE染色.
1.2.4 血紅素加氧酶活性檢測 參照文獻[5]的方法進行. 分離海馬,加3倍體積勻漿緩沖液(蔗糖0.01 mol/L,三(羥甲基)氨基甲烷鹽酸鹽0.01 mol/L,乙二胺四乙酸二鈉0.0001 mol/L,pH 7.4),4℃勻漿;4℃超聲處理30 s;4℃,18 800 g離心15 min;取上清0.2 mL,加反應混合液0.8 mL(6磷酸葡萄糖2 mmol/L,6磷酸葡萄糖脫氫酶3.33 nkat,氯化正鐵血紅素20 mmol/L,大鼠肝胞質2 mg,NADPH 0.8 mmol/L). 酶促反應在加入NADPH后開始計時,37℃避光反應1 h. 加預冷氯仿1 mL終止反應并抽提生成的膽紅素. 7500 r/min離心20 min,分離有機相. 波長464~530 nm比色,氯仿調零(膽紅素消光系數40/mmol/L/cm). 考馬斯亮藍蛋白定量.
1.2.5 蛋白免疫印跡技術檢測HO蛋白表達水平 按照100 mg組織1 mL細胞裂解液的比例,勻漿提取總蛋白. 以核酸蛋白定量儀進行蛋白定量. 每孔加入40 mg蛋白進行SDSPAGE電泳,蛋白電泳轉移儀將分離后的蛋白條帶轉至硝酸纖維膜上,封閉液室溫封閉2 h;按1∶200分別加入兔抗鼠HO1,HO2抗體,37℃孵育2 h;洗膜;按1∶400加入羊抗兔抗體,37℃孵育2 h;化學發光試劑反應2 min,發光成像儀取像并測定條帶灰度值. 以HO1或HO2灰度值與βactin灰度值的比值表示蛋白表達水平,比值越高則蛋白表達越高.
1.2.6 金屬離子含量測定 采用等離子體原子發射光譜分光光度儀進行測定. 分離海馬并稱重,加入2 mL雙蒸水勻漿,按8 mL/g腦質量(濕質量)加入25 g/L四乙基氫氧化銨溶液,80℃消化24 h至溶液澄清,雙蒸水定容到10 mL. 所有過程均采用一次性塑料試管. 測定波長:鋁309.27 nm,鐵238.20 nm.
1.2.7 丙二醛含量檢測 按照試劑盒說明書所示操作方法進行.
統計學處理:計量資料以x±s表示,組間比較采用單因素方差分析及LSDt檢驗,P
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2 結果
2.1 海馬病理組織學檢測 對照組HE染色,海馬CA1區錐體細胞3~4層,排列整齊,胞漿呈淡紫色,細胞核呈藍黑色,胞核為圓形;氯化鋁低劑量組和高劑量組HE染色均可見海馬CA1區神經元出現核固縮、細胞染色加深、細胞形態改變,細胞排列混亂,細胞層次減少. 其中以氯化鋁高劑量組細胞損傷最為嚴重(圖1).
2.2 海馬HO活性 HO活性為對照組(0.60±0.07)×10-6 kat/kg,氯化鋁高劑量組和低劑量組分別為(0.95±0.04)×10-6 kat/kg和(0.81±0.06)×10-6 kat/kg;顯示各氯化鋁組HO活性均較對照組顯著升高(P
2.3 海馬HO蛋白表達 HO1蛋白表達水平為對照組0.10±0.010,氯化鋁高劑量組和低劑量組分別為0.33±0.01和0.24±0.01;各氯化鋁組HO1蛋白表達均較對照組顯著升高(P
2.4 海馬金屬離子水平 鋁離子含量為對照組(0.35±0.04) mg/g,氯化鋁高劑量組和低劑量組分別為(2.08±0.10) mg/g和(1.34±0.13) mg/g. 各氯化鋁組鋁離子含量均較對照組顯著升高(P
2.5 海馬丙二醛含量 丙二醛含量為對照組(0.22±0.07) nmol/mg,氯化鋁高劑量組和低劑量組分別為(0.63±0.06) nmol/mg和(0.43±0.05) nmol/mg. 各氯化鋁組丙二醛含量均較對照組顯著升高(P
A:對照組;B:低劑量組(3.75 mg/d×5 d);C:高劑量組(7.50 mg/d×5 d).
圖1 海馬病理組織學檢測 HE ×400(略)
1: 高劑量組(7.50 mg/d×5 d);2: 低劑量組(3.75 mg/d×5 d);3: 對照組.
圖2 血紅素加氧酶蛋白免疫印跡分析結果(略)
3 討論
眾所周知,鋁神經毒性的重要靶點是海馬,可導致神經元結構和功能的損傷. 但鋁的神經毒理機制尚未完全闡明. 我們采用腦室內微量注射氯化鋁法,已成功誘導小鼠海馬神經元退行性變. 表現為學習記憶能力減退,海馬神經元出現核固縮,染色加深及細胞丟失等;同時發現腦內氧化應激反應增強和鐵離子水平顯著升高[3-4].
HO1是腦內重要的抗氧化應激系統成員之一,可被多種因素誘導表達[6],其表達增強對多種因素所致的急性神經元損傷有明顯保護作用[7];這與其催化血紅素降解生成具有強自由基清除作用的膽綠素有關[8]. 但HO1在鋁負荷致神經元退行性變中是否仍有類似保護作用尚未見報道.
本研究發現,微量氯化鋁腦室注射30 d后海馬HO1蛋白表達及活性均顯著升高,鐵離子水平和丙二醛含量也隨之明顯升高,海馬神經元出現核固縮和細胞丟失;上述變化隨著氯化鋁劑量的增加而更加明顯,提示在停止氯化鋁腦室內注射后,腦組織內存在慢性氧化應激. HO1表達升高是由于機體對慢性氧化應激作出的保護性反應,目的是催化產生膽綠素,清除自由基. 在HO1表達增加的情況下氧化應激反應仍持續增強并最終出現海馬神經元退行性變,可能的原因是,HO1表達升高所催化產生的膽綠素量不足以清除自由基,而對抗后者所致的氧化損傷. 產生這種現象可能與HO1催化血紅素產生的鐵離子水平同步增加有關. 后者能通過Fenton反應促進羥自由基產生. 雖然腦內存在鐵結合蛋白,絡合鐵離子而使之“解毒”,但鋁離子可競爭鐵結合蛋白,使游離鐵離子增加[9]. 據此,我們認為在鋁過負荷致神經元退行性變中,HO1表達升高具有雙重作用:促進膽綠素和鐵離子生成;前者雖可抗氧化應激卻被迅速消耗,后者因鋁離子存在而不能被有效“解毒”,導致氧化應激反應加重,出現進行性神經元退行性變. 近年一些神經退行性變疾病進程伴HO1表達增強的研究報道支持我們的上述觀點[10].
【參考文獻】
參考文獻
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永遠在身邊范文4
BOBLLY,為你鐘情一生。
BOBLLY,這“飾”界需要你!
愛,無處不在——BOBLLY(鉑寶利)珠寶。
愛她,就送BOLLY,真品質,真生活。
愛你一生不變,鉑寶利。
愛需要表達出來,你是我今生的摯愛。
寶緣世界,利享大眾。
鉑寶麗,讓“飾”界更美麗!
傳承記憶,一生追求。
純粹的愛,愛得純粹。
點石能成金,源于鉑寶利。
點綴生活,裝扮人生。
獨享女人的關愛BOBLLY。
翡翠,鉆石,玉器等等,選中的每一個,都想讓它們能永遠在身邊。
高端品質,打動你的靈魂。
給你全世界最尊貴的享受和永恒的愛戀。
光耀寰宇,雅貫中西。
恒久記憶,真情見證。
華美尊貴,舍我其誰?
慧眼識鉑寶,芳姿更炫麗。
今生與你結緣,最珍貴的收藏,最永恒的記憶。
今世有約,一生一“飾”
金珠玉寶一線永牽,鉑寶利圓您一生之緣!
驚世絕俗,魅力無限。
驚世之作,經世之寶。
聚焦世界目光,“緣”來只有你。
看到你的第一眼,我就知道選擇的就是你——鉑寶利。
浪漫、幸福,總在身邊。
浪漫同在,只因有你。
鉑寶利,戴出人生新(心)篇章。
鉑寶利,戴來屬于你的魅力。
鉑寶利,給你想不到的驚喜。
鉑寶利,美麗不能沒有你!
鉑寶利,你我的共同選擇。
鉑寶利,讓您更美麗。
鉑寶利,只為您的尊貴而飾。
鉑寶利珠寶,給您貴婦的感覺。
不僅僅是禮物,更是一份心意。
永遠在身邊范文5
一個平凡無奇的上午,我趴在窗外,小腦瓜也不知在想些什么,媽媽走了過來,輕輕地用手指敲了一下我的小腦袋,笑著問我:“小寶貝,想什么呢?”我緩緩地轉過頭,用稚嫩的聲音問她:“媽媽,世上有沒有天使呢?”媽媽用手指蹭了一下我的鼻尖回答說:“有呀!她一直在你的身邊守護著你呢!”哦!原來天使是我的守護者。
時間悄悄流逝……
我長大了些,也學會陪著媽媽看電視。有一次我看到了處決犯人的畫面,一下子把幼小的我給嚇哭了。我拽著媽媽的衣角,哭著問媽媽:“媽媽,你不是說有天使守護嗎?那他們的天使呢?為什么他們會死呢?”媽媽疼惜地把我抱在懷里,邊擦拭著我的眼淚邊說:“寶貝,別哭!他們都是壞人,天使便離開了他們,所以他們才死了啊!我的小寶貝可是個乖孩子,所以天使會永遠守護著你的!”我終于破涕為笑,哦!只要我是個乖孩子天使就會永遠守護我。
時間無聲無息的飄走……
一轉眼我便是一個小學生了,對天使的好奇心也跟隨著年齡直線上升,我問媽媽:“媽媽,哪里可以看到真正的天使呢!”媽媽撫摸著我的頭發,微笑著說:“可是天使是隱形的啊!”我的眼神突然黯淡下來,媽媽見了又笑著說:“只有到了真正的大教堂才能看見哦!”“真的嗎?”我的眼睛又閃爍起來了,“嗯!”媽媽很肯定回答了我。哦!只要到了真正的教堂就能看見真正的天使。
也許是上帝應了我的心愿,爸爸那時正好要到美國做訪問學者,我終于有機會去教堂見到天使真容了!我心里異常興奮。可我的簽證沒有通過,那天我哭得很兇,媽媽一直哄著我,可一點用都沒有,我整整哭了一個下午。那是我生下的7年來哭的時間最長的一次。晚上,我總是睡不著,媽媽坐在床邊依舊哄著我,給我講天使的故事:“天使有一對潔白無比的翅膀,她穿著雪白的衣服……”我在媽媽的輕語聲中睡著了,那一晚我夢見了天使,她跟媽媽講的一樣,有著一對潔白的翅膀,穿著雪白的衣服,可無論我怎樣努力,卻始終看不清她的臉,只是看見她似乎在微笑著,還對我說:“我會永遠在你身邊,我會永遠在你身邊……”早上我醒來,興沖沖地告訴媽媽:“我夢見天使了!她說她會永遠在我身邊哦!”媽媽摸了摸我的腦袋微笑著說:“是的,好孩子,天使一定會永遠守在你身邊的!”
時間偷偷從指甲縫里溜走……
永遠在身邊范文6
用愛來掩飾幸福
我知道愛并不只是簡簡單單的一個字,它代表了許多人的生命和靈魂。
愛有無數中表達方式,也許它只是簡簡單單的一句話,或是一個微笑,在這些細節中,都擁有愛的滋味,只要回味和咀嚼,你遲早會唱出愛的味道。
如果你并不想相信這個世界上有愛神(愛神不是指丘比特)而是你我心中的對方,因為你永遠在心中激勵我,鼓勵我,在我失敗時,因為有愛我堅持了下去,每想到你時我才會覺的愛就在身邊。
有人為了自己想要的幸福奮都了一生,但還是為找到他想要的幸福,如果他問幸福是什么?我的回答就是:浪漫牽手是幸福的、同舟共濟是幸福的、平淡安閑也是幸福的、粗茶淡飯也幸福。幸福是一種感覺,你感覺到了便擁了。